與其它蘑菇不同,銀耳各級菌種的生產是雙菌培養,即不管製作母種、原種或種植種,在每支試管、每個菌種瓶、每個種植袋(甚至每個接種穴)中都必須讓銀耳菌絲(雙核菌絲,又稱白毛團或芽孢狀菌種)和伴生菌香灰菌絲在培養基(料)中按比例、協調地生長,才能培養出有實用價值的,可以用於實際種植的有效菌種。
為了保證銀耳生產上用的菌種之質量,科研人員首先把銀耳雙核菌絲"白毛團"、酵母狀分生孢子"芽孢"、香灰菌絲(又稱羽毛狀菌絲、耳友菌絲)分別單獨分開培養,分開保藏。隻有到了製種季節才把兩種純菌種搭配起來,進行混合培養,製成生產上用的各級母種、原(yuan)種(zhong)或(huo)種(zhong)植(zhi)種(zhong)供(gong)各(ge)地(di)菌(jun)種(zhong)場(chang)或(huo)種(zhong)植(zhi)者(zhe)使(shi)用(yong)。由(you)此(ci)可(ke)以(yi)知(zhi)道(dao),研(yan)究(jiu)單(dan)位(wei)保(bao)藏(zang)的(de)銀(yin)耳(er)菌(jun)種(zhong)和(he)生(sheng)產(chan)單(dan)位(wei)使(shi)用(yong)的(de)菌(jun)種(zhong)是(shi)不(bu)同(tong)的(de)。研(yan)究(jiu)所(suo)用(yong)的(de)銀(yin)耳(er)菌(jun)種(zhong),可(ke)以(yi)說(shuo)是(shi)一(yi)種(zhong)始(shi)祖(zu)菌(jun)種(zhong),是(shi)社(she)會(hui)上(shang)一(yi)切(qie)生(sheng)產(chan)種(zhong)的(de)老(lao)祖(zu)宗(zong),育(yu)種(zhong)學(xue)家(jia)們(men)稱(cheng)之(zhi)"原原種",是單一菌種的純培養物。這些純菌種供育種、研究專用,一般不對外供應。而社會生產用的銀耳母種、原種和種植種則是雙菌培養物,即把銀耳菌絲或芽孢與香灰菌絲(子囊菌)同(tong)時(shi)接(jie)種(zhong)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)進(jin)行(xing)混(hun)合(he)培(pei)養(yang)。這(zhe)樣(yang)的(de)菌(jun)種(zhong)一(yi)般(ban)隻(zhi)使(shi)用(yong)一(yi)次(ci)。否(fou)則(ze)在(zai)轉(zhuan)管(guan)時(shi)容(rong)易(yi)人(ren)為(wei)地(di)把(ba)雙(shuang)菌(jun)分(fen)開(kai),使(shi)培(pei)養(yang)物(wu)中(zhong)銀(yin)耳(er)菌(jun)絲(si)逐(zhu)漸(jian)減(jian)少(shao),絕(jue)大(da)部(bu)分(fen)剩(sheng)下(xia)香(xiang)灰(hui)菌(jun)絲(si)而(er)致(zhi)使(shi)銀(yin)耳(er)種(zhong)植(zhi)失(shi)敗(bai)。下(xia)麵(mian)介(jie)紹(shao)銀(yin)耳(er)菌(jun)種(zhong)的(de)分(fen)離(li)、製備及保藏技術:
㈠ 分離技術 獲得銀耳菌種的方法主要有擔孢子彈射分離法、組織分離法和耳木分離法。
1.孢子彈射法 這是利用新鮮的、成熟的子實體自動彈射出擔孢子來獲得純菌種的方法。取朵大、色白、無病蟲害的新鮮銀耳作為種耳。
用無菌水漂洗銀耳數次,再用無菌紗布或吸水紙,把銀耳表麵
的de水shui分fen吸xi幹gan。因yin為wei耳er片pian表biao麵mian若ruo有you薄bo水shui層ceng,便bian會hui影ying響xiang銀yin耳er擔dan孢bao子zi的de彈dan射she,並bing容rong易yi汙wu染ran上shang雜za菌jun。再zai把ba種zhong耳er切qie一yi小xiao塊kuai,以yi放fang入ru三san角jiao瓶ping或huo放fang入ru試shi管guan中zhong不bu會hui碰peng到dao瓶ping壁bi或huo管guan壁bi為wei度du,隨sui後hou用yong不bu鏽xiu鋼gang小xiao鉤gou鉤gou住zhu小xiao耳er片pian,迅xun速su懸xuan掛gua在zai三san角jiao瓶ping或huo試shi管guan內nei,同tong時shi注zhu意yi勿wu使shi種zhong耳er碰peng到dao培pei養yang基ji表biao麵mian,以yi防fang汙wu染ran雜za菌jun,塞sai上shang棉mian塞sai,然ran後hou放fang在zai20-25℃條件下,經24小xiao時shi,從cong耳er片pian上shang彈dan射she出chu來lai的de擔dan孢bao子zi,落luo在zai光guang滑hua的de培pei養yang基ji表biao麵mian上shang形xing成cheng一yi個ge霧wu狀zhuang的de孢bao子zi印yin。此ci時shi,在zai無wu菌jun箱xiang或huo無wu菌jun室shi中zhong,將jiang懸xuan於yu瓶ping內nei的de耳er片pian取qu出chu,再zai塞sai上shang棉mian塞sai,移yi到dao20-25℃的室中培養,經2-3天,培養基表麵就會出現許多乳白色、糊hu狀zhuang的de小xiao菌jun落luo。此ci係xi銀yin耳er的de酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi。當dang培pei養yang基ji上shang出chu現xian酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi的de菌jun落luo時shi,為wei了le防fang止zhi和he減jian少shao汙wu染ran,應ying盡jin快kuai地di進jin行xing提ti純chun,即ji挑tiao取qu少shao許xu沒mei有you雜za菌jun的de銀yin耳er酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi,移yi入ru新xin的de試shi管guan中zhong進jin行xing培pei養yang。不bu管guan銀yin耳er擔dan孢bao子zi或huo酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi都dou不bu容rong易yi萌meng發fa成cheng菌jun絲si,所suo以yi直zhi接jie用yong於yu生sheng產chan時shi有you困kun難nan,目mu前qian已yi較jiao少shao采cai用yong。不bu過guo,為wei了le獲huo得de銀yin耳er有you性xing繁fan殖zhi的de後hou代dai,必bi須xu采cai用yong擔dan孢bao子zi分fen離li法fa,並bing使shi之zhi萌meng發fa成cheng單dan核he菌jun絲si,然ran後hou進jin行xing配pei對dui實shi驗yan。
2.組織分離法 和香菇、平菇不同,銀耳組織分離法比較難操作,實用意義也不大。因為耳片一旦膠質化之後,就不容易再長出菌
絲,況且段木種植的或野生的銀耳,暴露在外界的
shengchangshijianhenchang,erpianshangbidinghuifuzhegezhongzajun,zuzhifenlishijiburongyibafuzhedezajunxidiao,youburongyiyongyaopinjinxingbiaomiandemiejunchuli,qierongyidaozhiyinerhetiaojuntongguiyujin。zhiyouweiyushupihemuzhibuzhijiandefeihoudeerjibijiaorongyijinxingzuzhifenli,keyihuodeyinerdechunjunsi。buguoyongerjifenlilaideyinerchunjunsichangshiehuangsedehuochenghuangsede,bushichunbaide,junsishengchangdesuduyebijiaoman,xiaoguoyebutailixiang。
3.耳木分離法 利用長了銀耳子實體的段木(簡稱耳木)來進行分離,是目前獲得有實用價值的銀耳菌種最主要的方法。
ermufenlifadezhuyaojishushipaichuermuzhongzajundeganrao,fangzhifenlishiwuranzajun,bixubayinerjunsihexianghuijunsidandufenlichulai。duichuxuezhelaishuo,ermufenlifashiburongyizhangwode,bixufanfulianxi,zhidaozhangwofenlideyaoling。ermufenlifadezhuyaobuzhouruxia:
(1)耳木選擇 在長第一、二批銀耳時,取長耳最多,質量最好(尤其是片寬、色白),雜菌最少的耳木一小段,作為分離材料。分離材料經風幹,並用熏蒸劑驅蟲(特別是蟎)後,移入無菌箱或無菌室中進行分離。
(2)耳木滅菌 先把耳木鋸成2-4cm厚的木輪,然後去掉樹皮、耳基,放入接種箱(室)中,耳木表麵用0.1%升汞水或70%酒精揩擦滅菌。技術熟練者也可以不經表麵滅菌,就進行分離。
(3)耳木取種 通過耳基著生處把耳木縱切成兩瓣。然後,在耳基著生處的正下方木材內部剃取極小的木屑粉末(不能用小木片,接種塊越小,得到銀耳純菌種的機會越大,接種塊越大得到香灰菌絲,或香灰菌絲夾雜一點銀耳菌絲的機會越多),接種在試管中的培養基表麵。接種後,把試管放在20-28℃的室溫下培養,數天之後接種塊的周圍就開始長出菌絲來。
(4)分離結果 由於分離的技巧不同,分離的結果也不一樣。大致可以得到如下幾種結果:
隻得到銀耳菌絲;隻得到香灰菌絲;同時得到銀耳菌絲和香灰菌絲,但香灰菌絲占絕對多數;得到銀耳酵母狀分生孢子和香灰菌絲。如果有雜菌幹擾,分離的結果就更複雜了。
為了獲得有生產價值的銀耳菌種,在分離後的第3-7天內要天天觀察,把銀耳菌絲和香灰菌絲單獨分離出來。
銀耳菌絲的特征: 白色、淡黃白色以及由白色至黃色之間的各種中間色,氣生菌絲直立、斜立或平貼於培養基表麵,基內菌絲生於培養基裏麵。菌絲直徑l.5-3微米,有橫隔膜,有明顯的(但不是每個橫隔膜上都有)鎖(suo)狀(zhuang)聯(lian)合(he),生(sheng)長(chang)速(su)度(du)比(bi)一(yi)般(ban)蘑(mo)菇(gu)緩(huan)慢(man)。在(zai)某(mou)些(xie)情(qing)況(kuang)下(xia),在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian)會(hui)出(chu)現(xian)纏(chan)結(jie)的(de)菌(jun)絲(si)團(tuan),並(bing)逐(zhu)漸(jian)膠(jiao)質(zhi)化(hua),變(bian)成(cheng)小(xiao)原(yuan)基(ji),長(chang)出(chu)小(xiao)耳(er)片(pian)。當(dang)雙(shuang)核(he)菌(jun)絲(si)開(kai)始(shi)膠(jiao)質(zhi)化(hua)時(shi),在(zai)菌(jun)絲(si)頂(ding)端(duan)可(ke)以(yi)發(fa)現(xian)有(you)若(ruo)幹(gan)擔(dan)子(zi)樣(yang)的(de)膨(peng)大(da)細(xi)胞(bao),這(zhe)意(yi)味(wei)著(zhe)雙(shuang)核(he)菌(jun)絲(si)已(yi)進(jin)入(ru)結(jie)實(shi)階(jie)段(duan)。雙(shuang)核(he)菌(jun)絲(si)繼(ji)代(dai)(移植)後或繼續長出新的菌絲,或迅速膠質化,長出耳片,也可以變成粘糊糊的酵母狀分生孢子(取決於菌株的菌齡、發育程度、培養基表麵的水層,接種針熱或冷,接種時手勢輕或重等刺激).由雙核菌絲斷裂成的"酵母狀分生孢子"在適宜條件下變成銀耳菌絲。
香灰菌絲的特征: 菌絲初無色,大量生長時白色,羽毛狀, 常有特別細長的主幹和側生的略呈"羽毛狀"defenzhi,laojunsibiandanhuangse,danzongse,peiyangjizhujianyoudanhesebianweiheisehuoheidailvse。peiyangjibiaomiandeqishengjunsihuibaise,xirongzhuang,youshiyoutanzideheiba,fenshengbaozigengjinsaozhouzhuang,fenshengbaozishaojian。ruoyongmuxiepeiyangji,popinghoukefashenghuanglvsezhicaolvsedejintuoyuanxingdefenshengbaozi。zaiduanmubiaomiankeyichanshengbianpingheisedezizuo。yizhixianghuijunkenengbushidanyigewuzhong,kenenglishuyutantuanshuhetandoushu。you3-4種,其中有一種經鑒定初步認為是阿切爾碳團(Hypoxylon archeri).
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