GB 4789.15-2016相比GB 4789.15-2010,最大的區別可能就在於對平皿的培養方式。2016版的國標在5.2中要求:瓊脂凝固後,正置平板,置28℃±1℃培養箱中培養,觀察並記錄培養至第5d的結果。
其實針對這一條,需要注意兩點:
第一,是需要對平板進行觀察的,不能直接培養至第5天計數,因為黴菌的特殊性,在培養過程中會產生大量孢子,導致整個平板蔓延。因此,在培養後的第2天開始,就要對平板進行觀察,並計數典型菌落,而這樣的觀察在之後每一天都應該進行,直至培養第5天。
第二,就是正置培養。這一點是16版國標與舊版最大的區別,10版之前的國標都是倒置培養的。而進行正置培養,很多朋友可能都會遇到平板被黴菌汙染的問題,比如圖中的情況,這怎麼解決呢?

遇到這種情況,一開始我們也是十分疑惑,檢測方法的黴菌是從哪裏來的呢!
其實造成這種情況的原因有很多種,可能有培養箱環境汙染,平皿冷凝水汙染,操作環境汙染、培養基問題等等,這些問題都該如何解決呢?
汙染原因與解決措施
一、培養箱環境汙染
很(hen)多(duo)實(shi)驗(yan)室(shi)培(pei)養(yang)黴(mei)菌(jun)采(cai)用(yong)的(de)是(shi)專(zhuan)用(yong)的(de)黴(mei)菌(jun)培(pei)養(yang)箱(xiang),所(suo)以(yi)培(pei)養(yang)箱(xiang)空(kong)間(jian)裏(li)會(hui)有(you)大(da)量(liang)的(de)黴(mei)菌(jun)孢(bao)子(zi)。而(er)平(ping)皿(min)的(de)蓋(gai)和(he)底(di)是(shi)有(you)一(yi)定(ding)縫(feng)隙(xi)的(de),尤(you)其(qi)是(shi)玻(bo)璃(li)平(ping)皿(min)縫(feng)隙(xi)還(hai)是(shi)比(bi)較(jiao)大(da)的(de),正(zheng)置(zhi)培(pei)養(yang)中(zhong),孢(bao)子(zi)會(hui)向(xiang)上(shang)飛(fei)揚(yang)通(tong)過(guo)縫(feng)隙(xi)落(luo)到(dao)平(ping)板(ban)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang),導(dao)致(zhi)汙(wu)染(ran)。細(xi)心(xin)地(di)實(shi)驗(yan)猿(yuan)可(ke)能(neng)發(fa)現(xian),汙(wu)染(ran)的(de)菌(jun)落(luo)大(da)部(bu)分(fen)都(dou)是(shi)在(zai)平(ping)皿(min)邊(bian)緣(yuan)生(sheng)長(chang)的(de)。用(yong)一(yi)次(ci)性(xing)塑(su)料(liao)平(ping)皿(min)來(lai)培(pei)養(yang),汙(wu)染(ran)的(de)概(gai)率(lv)就(jiu)會(hui)小(xiao)很(hen)多(duo),因(yin)為(wei)一(yi)次(ci)性(xing)塑(su)料(liao)平(ping)皿(min)的(de)蓋(gai)和(he)底(di)之(zhi)間(jian)的(de)縫(feng)隙(xi)相(xiang)比(bi)之(zhi)下(xia)是(shi)比(bi)較(jiao)小(xiao)的(de)。因(yin)此(ci)培(pei)養(yang)箱(xiang)環(huan)境(jing)中(zhong)的(de)孢(bao)子(zi)可(ke)能(neng)會(hui)是(shi)主(zhu)要(yao)汙(wu)染(ran)源(yuan)。
這樣一來,解決的方法就應該是對培養箱進行殺菌。可以考慮用紫外線殺一下菌,同時輔助消毒劑擦拭的方法,常用消毒劑比如75%jiujinghexinjieermiedeng,yinggaizhuyideshi,zheyangdeshajuncaozuoyeshixuyaojingchangjinxingde,yinweimeijundebaozishishifennanqingchude,ermeicipeiyangkenengyouhuiyinjinxindewuranyuan,keyikaolvmeizhoujinxingliangci,baozhengpeiyanghuanjingwuwuranyuan。
二、平皿冷凝水汙染
zhengzhipeiyangguochengzhong,ruoshipingmindeshanggaiyoulingningshui,zaipeiyangguochengzhonglengningshuidiluodaopeiyangjishang,yejirongyizaochengjunluomanyan,pingminwuran。yincizaipeiyangzhiqian,yidingyaobaozhengpingminganzao,keyibapingminfangzai37℃的環境裏烘幹,烘幹之後再進行培養,就會避免這個原因造成的汙染。
三、操作環境和培養基的汙染
因yin為wei無wu菌jun室shi裏li可ke能neng也ye會hui因yin為wei滅mie菌jun效xiao果guo不bu理li想xiang造zao成cheng汙wu染ran。小xiao編bian之zhi前qian工gong作zuo的de實shi驗yan室shi,操cao作zuo台tai使shi用yong紫zi外wai線xian滅mie菌jun,經jing常chang就jiu會hui滅mie菌jun不bu徹che底di有you孢bao子zi汙wu染ran,尤you其qi是shi在zai進jin行xing過guo黴mei菌jun的de相xiang關guan檢jian測ce之zhi後hou。所suo以yi在zai進jin行xing過guo黴mei菌jun檢jian測ce之zhi後hou,適shi當dang的de增zeng長chang滅mie菌jun時shi間jian,可ke能neng會hui達da到dao比bi較jiao理li想xiang的de效xiao果guo。另ling外wai,為wei了le徹che底di解jie決jue無wu菌jun室shi空kong間jian孢bao子zi汙wu染ran的de問wen題ti,可ke以yi購gou買mai安an裝zhuang臭chou氧yang發fa生sheng器qi,通tong過guo紫zi外wai線xian+臭氧的雙重消毒模式,效果就十分理想了。
大家如果還是想驗證一下究竟是什麼原因造成的汙染,這裏提供一個簡單的驗證試驗:在正常檢測的環境中倒一組空白平皿,將這些平皿分為AB兩組,其中A組用有充足氧氣的自封袋將平皿封好,B組不封,均放置在培養箱中正置培養。若是A組B組均有黴菌生長,則需要考慮培養基汙染或者操作環境的汙染;若是A組不生長黴菌而B組生長,則需要考慮是培養箱內的環境汙染。通過這個小試驗,可以基本上確定汙染源,然後針對汙染源進行相應的處理。
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