一、黴菌和酵母菌介紹:
黴菌和酵母菌及其檢驗酵母菌是真菌中的一大類,通常是單細胞,呈圓形,卵圓形、臘腸形或杆狀。
黴菌也是真菌,能夠形成疏鬆的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為黴菌。
黴(mei)菌(jun)和(he)酵(jiao)母(mu)廣(guang)泛(fan)分(fen)布(bu)於(yu)自(zi)然(ran)界(jie)並(bing)可(ke)作(zuo)為(wei)食(shi)品(pin)中(zhong)正(zheng)常(chang)菌(jun)相(xiang)的(de)一(yi)部(bu)分(fen)。長(chang)期(qi)以(yi)來(lai),人(ren)們(men)利(li)用(yong)某(mou)些(xie)黴(mei)菌(jun)和(he)酵(jiao)母(mu)加(jia)工(gong)一(yi)些(xie)食(shi)品(pin),如(ru)用(yong)黴(mei)菌(jun)加(jia)工(gong)幹(gan)酪(lao)和(he)肉(rou),使(shi)其(qi)味(wei)道(dao)鮮(xian)美(mei);還可利用黴菌和酵母釀酒、製醬;食品、化學、醫(yi)藥(yao)等(deng)工(gong)業(ye)都(dou)少(shao)不(bu)了(le)黴(mei)菌(jun)和(he)酵(jiao)母(mu)。但(dan)在(zai)某(mou)些(xie)情(qing)況(kuang)下(xia),黴(mei)菌(jun)和(he)酵(jiao)母(mu)也(ye)可(ke)造(zao)成(cheng)中(zhong)腐(fu)敗(bai)變(bian)質(zhi)。由(you)於(yu)它(ta)們(men)生(sheng)長(chang)緩(huan)慢(man)和(he)競(jing)爭(zheng)能(neng)力(li)不(bu)強(qiang),故(gu)常(chang)常(chang)在(zai)不(bu)適(shi)於(yu)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)的(de)食(shi)品(pin)中(zhong)出(chu)現(xian),這(zhe)些(xie)食(shi)品(pin)是(shi)pH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品,含有抗菌素的食品等 。由於黴菌和酵母能抵抗熱、冷凍,以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術,它們能轉換某些不利於細菌的物質,而促進致病細菌的生長;有些黴菌能夠合成有毒代謝產物-黴菌毒素。黴菌和酵母往往使食品表麵失去色、香、wei。liru,jiaomuzaixinxiandehejiagongdeshipinzhongfanzhi,keshishipinfashengnanwendeyiwei,tahaikeyishiyetifashenghunzhuo,chanshengqipao,xingchengbomo,gaibianyansejisanfabuzhengchangdeqiweideng 。yincimeijunhejiaomuyezuoweipingjiashipinweishengzhiliangdezhishijun,bingyimeijunhejiaomujishulaizhidingshipinbeiwurandechengdu。muqianyiyouruogangeguojiazhidinglemouxieshipindemeijunhejiaomuxianliangbiaozhun。woguoyizhidingleyixieshipinzhongmeijunhejiaomudexianliangbiaozhun。
二、檢驗方法:
黴菌和酵母的計數方法,與菌落總數的測定方法基本相似。主要步驟為:
將樣品製作成10倍梯度的稀釋液,選擇3個合適的稀釋度,吸取1mL於平皿,傾注培養基後,培養觀察,計數。
對黴菌的計數,還可以采用顯微鏡直接鏡檢計數的方法。
具體檢測標準參見:
GB4789.15-94,《中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物檢驗 黴菌和酵母計數》
三、說明:
1.樣yang品pin的de處chu理li。為wei了le準zhun確que測ce定ding黴mei菌jun和he酵jiao母mu數shu,真zhen實shi反fan映ying被bei檢jian食shi品pin的de衛wei生sheng質zhi量liang,首shou先xian應ying注zhu意yi樣yang品pin的de代dai表biao性xing。對dui大da的de固gu體ti食shi品pin樣yang品pin,要yao用yong滅mie菌jun刀dao或huo鑷nie子zi從cong不bu同tong部bu位wei采cai取qu試shi驗yan材cai料liao,再zai混hun合he磨mo碎sui。如ru樣yang品pin不bu太tai大da,最zui好hao把ba全quan部bu樣yang品pin放fang到dao滅mie菌jun均jun質zhi器qi杯bei內nei攪jiao拌ban2min。液體或半固體樣品可用迅速顛倒容器25次來混勻。
2.樣品的稀釋:weilejianshaolvxishibeishudewucha,zailianxudizengxishishi,meiyixishiduyinggenghuanyigenxiguan。zaixishiguochengzhong,weileshimeijundebaozichongfensankai,xuyongmiejunxiguanfanfuchuixi50次。
3.培養基的選擇:在黴菌和酵母計數中,主要使用以下幾種選擇性培養基。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基(PDA):黴菌和酵母在PDA培養基上生長良好。用PDA作平板計數時,必項加入抗菌素以抑製細菌。
孟加拉紅(虎紅)培養基:該gai培pei養yang基ji中zhong的de孟meng加jia拉la紅hong和he抗kang菌jun素su具ju有you抑yi製zhi細xi菌jun的de作zuo用yong。孟meng加jia拉la紅hong還hai可ke抑yi製zhi黴mei菌jun菌jun落luo的de蔓man延yan生sheng長chang。在zai菌jun落luo背bei麵mian由you孟meng加jia拉la紅hong產chan生sheng的de紅hong色se有you助zhu於yu黴mei菌jun和he酵jiao母mu菌jun落luo的de計ji數shu。
高鹽察氏培養基:糧食和食品中常見的曲黴和青黴在該培養基上分離效果良好,它具有抑製細菌和減緩生長速度快的毛黴科菌種的作用。
4.傾注培養。每個樣品應選擇3個適宜的稀釋度,每個稀釋度傾注2個平皿。培養基熔化後冷卻至45℃,lijiqingzhubingxuanzhuanhunyun,xianxiangyigefangxiangxuanzhuan,zaizhuanxiangxiangfanfangxiang,chongfenhunhejunyun。peiyangjiningguhou,bapingminfanguolaifangwenxiangpeiyang。daduoshumeijunhejiaomuzai25-30℃的情況下生長良好,因此培養溫度25~28℃。培養3d後開始觀察菌落生長情況,共培養5d觀察記錄結果。
5.菌落計數及報告:選取菌落數10~150之間的平板進行計數。一個稀釋度使用兩個平板,取兩個平板菌落數的平均值,乘以稀釋倍數報告。固體檢樣以g為單位報告,液體檢樣以mL 單位報告。關於稀釋倍數的選擇可參考細菌菌落總數測定。
6.黴菌直接鏡檢計數法:對黴菌計數,可以采用直接鏡檢的方法進行計數。
在顯微鏡下,黴菌菌絲具有如下特征:
平行壁:黴mei菌jun菌jun絲si呈cheng管guan狀zhuang,多duo數shu情qing況kuang下xia,整zheng個ge菌jun絲si的de直zhi徑jing是shi一yi致zhi的de。因yin此ci在zai顯xian微wei鏡jing下xia菌jun絲si壁bi看kan起qi來lai象xiang兩liang條tiao平ping行xing的de線xian。這zhe是shi區qu別bie黴mei菌jun菌jun絲si和he其qi他ta纖xian維wei時shi最zui有you用yong的de特te征zheng之zhi一yi。
橫隔:許多黴菌的菌絲具有橫隔,毛黴、根黴等少數黴菌的菌絲沒有橫隔。
菌絲內呈粒狀:薄壁、呈管狀的菌絲含有原生質,在高倍顯微鏡下透過細胞壁可見其呈粒狀或點狀。
分枝:如菌絲不太短,則多數呈分枝狀,分枝與主幹的直徑幾乎相同,有分枝是鑒定黴功得出可靠的特征之一。
菌絲的頂端:常呈鈍圓形。
無折射現象。
凡有以上特征之一的絲狀均可判定為黴菌菌絲。
觀察視野中有無菌絲,凡符合下列情況之一者為陽性視野。
一根菌絲長度超過視野直徑1/6;
一根菌絲長度加上分枝的長度超過視野直徑1/6;
兩根菌絲總長度超過視野直徑1/6;
三根菌絲總長度超過視野直徑1/6;
一叢菌絲可視為一個菌絲,所有菌絲(包括分枝)總長度超過視野直徑1/6。
根據對所有視野的觀察結果,計算陽性視野所占比例,並以陽性視野百分數(%)報告結果。計算公式:
每件樣品陽性視野(%)=(陽性視野數 / 觀察視野數)×100
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