培pei養yang基ji的de作zuo用yong是shi為wei微wei生sheng物wu提ti供gong生sheng長chang和he繁fan殖zhi所suo需xu的de營ying養yang物wu質zhi和he環huan境jing條tiao件jian。培pei養yang基ji的de質zhi量liang直zhi接jie關guan係xi到dao檢jian驗yan結jie果guo的de準zhun確que性xing和he可ke靠kao性xing,因yin此ci對dui於yu微wei生sheng物wu檢jian驗yan而er言yan,培pei養yang基ji的de質zhi量liang控kong製zhi尤you為wei重zhong要yao。
培養基的主要作用有兩方麵:
①提供微生物生長所需的營養物質;
②培養基具有選擇性和差異性,可以選擇特定類型的細菌或真菌進行培養,並區分不同種類的微生物。
因此,在微生物檢驗中,必須對培養基進行嚴格的質量控製,隻有優質的培養基才能為微生物檢驗提供精準、可靠的檢測結果。
培養基的概述
培養基是用於保證微生物繁殖、鑒定、保持活力的物質,按照物理性質可以分成液體培養基、固體培養基、半固體培養基和脫水培養基,按照化學性質可以分成天然培養基、組合培養基和半組合培養基,按照功能可以分成選擇性培養基、鑒別培養基。不同培養基要求不同,保存方式也不同。在受熱、吸潮後,培養基極易被微生物汙染或分解變質,需在避光、防潮、陰涼處儲存。
培養基的采購驗收
微生物檢驗需使用大量培養基。為提高檢驗效率,實驗室多使用商品化即用型培養基、商品化脫水合成培養基。在培養基的采購中,應選擇國內、外知名商家的產品,並向生產企業索要培養基成分名稱、產品編號、批號、最終 pH 值、儲存條件、生產日期、有效期、質控報告和必要的相關信息,以保證培養基的質量。在產品交貨驗收時,購買者需對產品包裝的完整性、生產日期、有效期和產品合格證明等進行核驗,檢查培養基的顏色、性質等是否符合實驗室相關標準,培養基檢驗合格後進行入庫登記。
培養基的製備
配製要求
zhengqueanyaoqiuzhibeipeiyangjishizuohaoweishengwujianyandejichu。shiyanrenyuanshiyongshangpinhuatuoshuihechengpeiyangjipeizhipeiyangjishi,yaoyangeanzhaochanpinshuomingjinxingpeizhi,bingzuohaopeizhijilu。zaipeizhiguochengzhong,shiyanrenyuanxuyaoyangezunshouxiangguancaozuobiaozhun,peidaikouzhaojinxingcaozuo,bimianxiruhanyouyouduwuzhidepeiyangjifenmo,chengliang、溶解應使用專門的角匙,不使用金屬製品,避免金屬離子混入培養基,影響微生物生長;準確稱量後,應先加入適量的水充分溶解,再加水至所需量進行加熱,加熱中應不斷攪拌,防止培養基在容器底部積聚;調節pH值,分裝到比培養基體積最少大 20% 的容器中,按說明要求進行滅菌。粉末狀態的培養基開封後應存放在陰涼幹燥處,及時使用,環境濕度過大會使培養基出現受潮、結塊、汙染等情況。對於瓊脂類培養基,可采用沸水浴或流動蒸汽的加熱方式進行融化,但反複凍融隻允許進行1次。
配製用水
水是配製培養基不可或缺的一部分,一般使用純化水。還應定期檢查培養基配製用水的微生物汙染情況,應符合純化水要求。
滅(mie)菌(jun)能(neng)確(que)保(bao)培(pei)養(yang)基(ji)質(zhi)量(liang)達(da)標(biao),實(shi)驗(yan)室(shi)常(chang)采(cai)用(yong)濕(shi)熱(re)滅(mie)菌(jun)法(fa),培(pei)養(yang)基(ji)應(ying)按(an)照(zhao)產(chan)品(pin)使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun),每(mei)次(ci)滅(mie)菌(jun)需(xu)放(fang)置(zhi)壓(ya)力(li)蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)化(hua)學(xue)指(zhi)示(shi)卡(ka),驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)。一(yi)些(xie)培(pei)養(yang)基(ji)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)煮(zhu)沸(fei)的(de)方(fang)式(shi)進(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun),如(ru)結(jie)晶(jing)紫(zi)中(zhong)性(xing)紅(hong)膽(dan)鹽(yan)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)、亞硫酸鉍瓊脂培養基。實驗人員應及時將培養基從滅菌鍋中取出,盡快冷卻至所需溫度,防止加熱過度,對實驗數據造成影響;要檢查培養基的pH值、色澤、均勻度等指標,確保符合要求後貼上標簽,標明名稱、日期、效期等基本信息。製備平板時,將滅菌後的培養基傾注於滅菌過的幹燥平皿中,在平皿中形成至少3mm的厚度,直徑90mm 的平皿通常需要加入18~20 mL 的瓊脂培養基,需要保存或培養超過48h的培養基應傾注更多培養基 。培養基冷卻凝固後應立即使用或儲存,儲存時應標記好培養基名稱及製備日期,密封後放置在2~8 ℃冰箱中。製備斜麵培養基時,應先將培養基分裝到試管中,通常每管加入10mL培pei養yang基ji,高gao壓ya滅mie菌jun,在zai培pei養yang基ji冷leng卻que凝ning固gu前qian將jiang試shi管guan傾qing斜xie一yi定ding角jiao度du放fang置zhi,待dai冷leng卻que凝ning固gu後hou方fang能neng使shi用yong和he保bao存cun。對dui於yu液ye體ti培pei養yang基ji,根gen據ju使shi用yong要yao求qiu直zhi接jie分fen裝zhuang至zhi三san角jiao瓶ping或huo試shi管guan中zhong,滅mie菌jun,冷leng卻que至zhi室shi溫wen直zhi接jie使shi用yong或huo保bao存cun。驗收入庫的培養基應嚴格按照生產廠家標明的儲存條件、保存期限、使用方法保存和使用。開封後的商品化脫水合成培養基要放置在密閉容器中保存,在瓶身注明首次開封日期 。實驗室自製培養基應避光、幹燥保存,需冷藏的培養基可放置在2~8℃冰箱中保存,平板保存時間通常為2~4周,瓶裝及試管裝培養基保存時間一般為3~6個月,具體效期應進行驗證。每次使用培養基前,要觀察顏色變化、流動性、均勻性、是否結塊和是否汙染等情況。如果發現培養基出現受潮、結塊、其他性狀明顯改變的情況,應停止使用。