一、斜麵培養基移種技術
(1)材料
瓊脂斜麵培養基
經分離培養的平板培養物。
(2)方法
①在瓊脂斜麵培養基試管上部標明移種的菌名(或編號)、接種日期、接種者的組別及代號。
②左zuo手shou持chi長chang有you細xi菌jun的de平ping板ban底di,右you手shou持chi接jie種zhong環huan。接jie種zhong環huan在zai火huo焰yan上shang滅mie菌jun冷leng卻que後hou,沾zhan取qu平ping板ban劃hua線xian上shang發fa育yu良liang好hao的de孤gu立li菌jun落luo。把ba平ping板ban放fang回hui原yuan處chu,立li即ji用yong此ci手shou取qu斜xie麵mian培pei養yang基ji斜xie持chi,用yong右you手shou小xiao指zhi與yu手shou掌zhang夾jia持chi棉mian塞sai,輕qing輕qing轉zhuan動dong後hou撥bo出chu棉mian塞sai,管guan口kou通tong過guo火huo焰yan滅mie菌jun。
③將已沾菌的接種環伸入斜麵培養基的管底部的凝固水,沿斜麵培養基的表麵從底向上劃一直線,然後再從底部向上劃連續曲折線;也可不劃直線隻劃曲折線。取出接種環,管口通過火焰滅菌,塞好棉塞,放試管架上,接種環火焰滅菌後放下。
xiangxiemianpeiyangjishangyizhongdexijunruguoshishengchangzaixiemianpeiyangjishangde,huoshishengchangzaiyetipeiyangjizhongde,zeyongzuoshoutongshixiechijunzhongguanhexiemianpeiyangjilianggeguan,youshouwumingzhi、小xiao指zhi手shou掌zhang同tong時shi拔ba起qi夾jia持chi二er個ge棉mian塞sai。管guan口kou及ji接jie種zhong環huan先xian經jing火huo焰yan滅mie菌jun後hou,從cong菌jun種zhong管guan取qu菌jun立li即ji移yi種zhong到dao斜xie麵mian上shang,塞sai好hao棉mian塞sai,接jie種zhong環huan火huo焰yan滅mie菌jun後hou放fang下xia。然ran後hou將jiang斜xie麵mian培pei養yang基ji放fang37℃恒溫箱中培養24h。結果斜麵表麵形成菌苔。
二、液體培養基移種技術
用於純種細菌的增菌及觀察細菌在液體環境中的生長特征(混濁生長,表麵生長或沉澱生長)
(1)材料
肉湯培養基
斜麵培養物(大腸埃希菌、化膿性鏈球菌、枯草芽胞杆菌)
(2)方法
①取接種環在火焰上灼燒滅菌、冷卻。
②以“雙管移植法”左(zuo)手(shou)持(chi)細(xi)菌(jun)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)物(wu)和(he)肉(rou)湯(tang)培(pei)養(yang)基(ji)兩(liang)支(zhi)試(shi)管(guan),右(you)手(shou)持(chi)接(jie)種(zhong)環(huan),按(an)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)法(fa)取(qu)少(shao)量(liang)細(xi)菌(jun),將(jiang)沾(zhan)菌(jun)的(de)接(jie)種(zhong)環(huan)在(zai)斜(xie)傾(qing)的(de)接(jie)近(jin)液(ye)麵(mian)的(de)管(guan)壁(bi)上(shang)輕(qing)輕(qing)塗(tu)抹(mo)研(yan)勻(yun),試(shi)管(guan)直(zhi)立(li)使(shi)沾(zhan)附(fu)在(zai)管(guan)壁(bi)上(shang)的(de)細(xi)菌(jun)沒(mei)入(ru)液(ye)體(ti)中(zhong),接(jie)種(zhong)後(hou)放(fang)37℃恒溫箱中培養。
(3)結果
①渾濁生長大腸埃希菌菌液呈均勻混濁,管底有少量沉澱。
②沉澱生長化膿性鏈球菌菌液管底有沉澱,菌液無明顯渾濁。
③菌膜生長枯草芽胞杆菌菌液表麵形成膜狀物。
三、半固體培養基移種技術
用於保存菌種及間接檢查細菌有無動力。
(1)材料
半固體培養基。
細菌斜麵培養物。
(2)方法
①將接種針經火焰滅菌冷卻後,從斜麵培養物表麵沾取細菌。
②用無菌法穿刺接種,將接種針刺入半固體培養基正中央,深度達距管底0.5cm處停止,然後循原路退出。注意在刺入及拔出時要保持接種針不向穿刺線外擺動。
③試管口通過火焰滅菌,塞上棉塞。接種針經火焰滅菌。培養物放37℃恒溫箱中培養。
(3)結果:有動力的細菌呈擴散生長,無動力的細菌沿穿刺線生長。
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