海南潭牛一養殖池塘出現羅非魚暴發性死亡,發病初期死亡40-60尾/天,高峰期死亡700-800尾/天,通過采樣、實驗室診斷治療,取得了較好的效果。
2015年11月中下旬,海南潭牛一養殖池塘出現羅非魚暴發性死亡,發病初期死亡40-60尾/天,高峰期死亡700-800尾/天,情況嚴重。水產養殖動物疾病防控技術國家地方聯合工程實驗室(簡稱“國家工程實驗室”)通(tong)過(guo)對(dui)該(gai)地(di)區(qu)的(de)羅(luo)非(fei)魚(yu)進(jin)行(xing)現(xian)場(chang)采(cai)樣(yang),並(bing)進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)室(shi)診(zhen)斷(duan)治(zhi)療(liao),取(qu)得(de)了(le)較(jiao)好(hao)的(de)效(xiao)果(guo),本(ben)文(wen)就(jiu)此(ci)病(bing)診(zhen)療(liao)情(qing)況(kuang)介(jie)紹(shao)如(ru)下(xia),以(yi)期(qi)對(dui)今(jin)後(hou)羅(luo)非(fei)魚(yu)嗜(shi)水(shui)氣(qi)單(dan)胞(bao)菌(jun)病(bing)的(de)防(fang)治(zhi)提(ti)供(gong)借(jie)鑒(jian)。
一、發病魚的臨床症狀
池塘水溫為26-28℃,暴發疾病的魚規格主要為400-500g,發病初期死亡40-60尾/天,而後逐漸增多,高峰期死亡量達800尾/天以上。患病魚主要表現為食欲下降,離群獨遊,反應遲鈍,在水麵上層漂浮遊動。病魚鰓蓋出血、肛門紅腫、鰭條、上下頜和腹部充出血。解剖後觀察發現,有胃出血、膽囊變大、膽囊壁變薄、ganzangchongxuehuochuxuehuochengxianhuabanzhengzhuang,changdaoneiwushiwudezhengzhuang。fabingchuqi,yangzhihurenweikenengshilianqiujunbingganransuozhi,jiushiyonglehuanganleikangshengsu,dansiwangliangbingweijianshao。housongyangzhibenguojiagongchengshiyanshijinxingzhenduan。
二、實驗室診斷
實shi驗yan室shi診zhen斷duan未wei發fa現xian寄ji生sheng蟲chong,使shi用yong通tong威wei股gu份fen最zui新xin研yan發fa的de無wu乳ru鏈lian球qiu菌jun快kuai速su診zhen斷duan試shi紙zhi條tiao未wei檢jian測ce到dao無wu乳ru鏈lian球qiu菌jun。而er通tong過guo對dui病bing原yuan菌jun分fen離li,采cai用yong腦nao心xin浸jin液ye(BHI)培養基在患病魚體內分離到一株革蘭氏陰性短杆菌,菌體兩端鈍圓,菌株大小為(0.3-0.6)μm×(1.0-1.5)μm,在28℃條件恒溫培養18-24h,形成針尖狀、直徑約為1mm左右、表麵光滑、邊緣整齊、圓形半透明的菌落。
通過16SrDNA基因擴增,得到約1500bp的擴增條帶,測序後在NCBI上進行BLAST比對,分離菌株與嗜水氣單胞菌的同源性最高,序列相似性達到99.5%。將分離到的細菌接種到健康羅非魚,在36h內實驗組出現死亡,且體表有點狀出血、鰭條出血、剖解見內髒充血或出血。並從人工接種感染的羅非魚肝髒組織分離到1株細菌,經16SrDNA基因擴增對比分析該菌株同樣為嗜水氣單胞菌。因而判斷該病為嗜水氣單胞菌感染所致。
三、藥敏試驗與治療
利用紙片擴散法,對該嗜水氣單胞菌株分別進行藥敏試驗,發現其對強力黴素、恩諾沙星、四環素、氟苯尼考敏感,而對卡那黴素、磺胺嘧啶、鏈黴素耐藥,丁胺卡那、慶大黴素、新黴素、壯觀黴素中度敏感。結合發病情況和藥用史,按照內服抗生素氟苯尼考(20mg/kg魚體重),同時內服維生素K3以6mg/kg魚體重,連續投喂5天;外用潑灑使用聚維酮碘消毒(1-2次)。藥物使用4天後,病情得到有效控製,死亡量降至70-80尾,連續使用2天後,死亡量減少到10餘尾。
同時,簡易水質試劑盒測定該塘口後氨氮1.8mg/L、亞鹽高於0.3mg/L,因此先後使用底質改水解毒產品(如通威改水解毒寶,主要成分為吸附劑、絡合劑、表麵活性劑等)和培藻產品(如通威伴侶Ⅳ,主要成分為藻種、多種微生物、多肽、礦物元素)對水質進行調節。經過處理,病情得到有效處置。
四、小結
羅非魚已經成為我國主要的淡水魚類品種之一,而疾病的發生逐漸成為製約羅非魚養殖業健康、持續、快速發展的瓶頸。目前,羅非魚鏈球菌病已成為危害羅非魚的最主要疾病,而無乳鏈球菌病是其主要病原,但也有嗜水氣單胞菌、熒光假單胞、愛德華氏菌感染羅非魚的報道。該羅非魚嗜水氣單胞菌病發生在11月份,據報道羅非魚鏈球菌病主要流行於6-8月,經實驗室初步診斷、分子生物學診斷、回歸試驗,最終確認是由於嗜水氣單胞菌感染所致。
從魚體發病的症狀來看,鏈球菌病與羅非魚嗜水氣單胞菌兩者之間都有體表充、出血,羅非魚肝髒出血、膽dan囊nang腫zhong大da的de症zheng狀zhuang,僅jin從cong肉rou眼yan無wu法fa做zuo出chu準zhun確que判pan斷duan。而er如ru需xu進jin一yi步bu確que診zhen病bing因yin需xu使shi用yong分fen子zi生sheng物wu學xue等deng檢jian測ce手shou段duan,而er無wu乳ru鏈lian球qiu菌jun快kuai速su診zhen斷duan試shi紙zhi條tiao因yin其qi具ju有you操cao作zuo簡jian單dan、方便、準確性高,診斷時間短,能夠有效確診是否為無乳鏈球菌病,降低了藥物亂用所帶來的養殖風險。
通過對患病池塘的水質檢測發現,池塘的水質較差,氨氮、亞鹽偏高,且水質較為渾濁、老lao化hua,投tou料liao後hou羅luo非fei魚yu自zi身shen產chan生sheng的de排pai泄xie物wu較jiao多duo,投tou料liao產chan生sheng的de殘can餌er增zeng加jia與yu水shui質zhi變bian化hua加jia快kuai有you關guan係xi。嗜shi水shui氣qi單dan胞bao菌jun是shi屬shu於yu條tiao件jian性xing致zhi病bing菌jun,水shui體ti中zhong氨an氮dan、亞鹽的超標,或天氣的變化導致魚體處於應激狀態,自身抵抗力下降,導致了疾病的暴發。
在魚類疾病防控中,一直以來倡導“以防為主、快診早治、合理用藥”的(de)防(fang)控(kong)理(li)念(nian),加(jia)強(qiang)對(dui)養(yang)殖(zhi)水(shui)體(ti)的(de)管(guan)理(li),提(ti)高(gao)魚(yu)體(ti)自(zi)身(shen)的(de)免(mian)疫(yi)抵(di)抗(kang)力(li)。在(zai)平(ping)時(shi)的(de)養(yang)殖(zhi)過(guo)程(cheng)中(zhong),需(xu)要(yao)充(chong)分(fen)使(shi)用(yong)增(zeng)氧(yang)機(ji)增(zeng)氧(yang),特(te)別(bie)是(shi)在(zai)養(yang)殖(zhi)中(zhong)後(hou)期(qi),以(yi)保(bao)持(chi)水(shui)體(ti)氧(yang)氣(qi)的(de)充(chong)足(zu),有(you)條(tiao)件(jian)的(de)可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)水(shui)質(zhi)情(qing)況(kuang)進(jin)行(xing)換(huan)水(shui),日(ri)常(chang)可(ke)使(shi)用(yong)微(wei)生(sheng)態(tai)製(zhi)劑(ji)(EM菌、芽孢菌和光和菌等)對水質進行調節,保持水體處於良好的狀態。並可以通過對魚體內服保健(如多維和黃芪多糖等)來增強魚體免疫能力。對於發病池塘,因盡早確定病因,才能對症下藥,及時有效的采取相應措施控製病情,降低養殖經濟損失
作者:通威股份有限公司動物保健研究所、水產養殖動物疾病防控技術國家地方聯合工程實驗室 王浩丞 劉天強 戴景輝;通威(海南)水產食品有限公司 王勇強
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