（1）在肉膏蛋白腖斜麵試管上，用記號筆寫上將接種的菌名、日期和接種者。

（2）點燃酒精燈或煤氣燈。

（3）將菌種試管和待接種的斜麵試管，用大拇指和食指、中指
、無名指握在左手中，並將中指夾在兩試管之間，使斜麵向上
，成水平狀態。在火焰邊用右手鬆動試管塞，以利於接種時拔出。

（4）右手拿接種環通過火焰燒灼滅菌（參照實驗一），在火焰邊用右手的手掌邊緣和小指
，小指和無名指分別夾持棉塞（或試管帽），將其取出，並迅速燒灼管口。

（5）將jiang滅mie菌jun的de接jie種zhong環huan伸shen入ru菌jun種zhong試shi管guan內nei，先xian將jiang環huan接jie觸chu試shi管guan內nei壁bi或huo未wei長chang菌jun的de培pei養yang基ji
，達da到dao冷leng卻que的de目mu的de，然ran後hou再zai挑tiao取qu少shao許xu菌jun苔tai。將jiang接jie種zhong環huan退tui出chu菌jun種zhong試shi管guan，迅xun速su伸shen入ru待dai接jie種zhong的de斜xie麵mian試shi管guan
，用yong環huan在zai斜xie麵mian上shang自zi試shi管guan底di部bu向xiang上shang端duan輕qing輕qing地di劃hua直zhi線xian，勿wu將jiang培pei養yang基ji劃hua破po
，也ye不bu要yao使shi環huan接jie觸chu管guan壁bi或huo管guan口kou。

（6）jiezhonghuantuichuxiemianshiguan，zaiyonghuoyanshaoguankou，bingzaihuoyanbianjiangshiguansaisaishang。jiangjiezhonghuanzhujianjiejinhuoyan，zaishaozhuo。ruguojiezhonghuanshangzhandejuntijiaoduoshi
，yingxianjianghuanzaihuoyanbiankaogan
，ranhoushaozhuo，yimianweishaosidejunzhongfeijianchuwuranhuanjing，jiezhongbingyuanjunshigengyaozhuyicidian。

二、液體培養基接種

xiangrougaodanbaidongyetipeiyangjizhongjiezhongshaoliangjuntishi，qicaozuobuzhoujibenyuxiemianjiezhongshixiangtong，butongzhichushitiaoqujuntidejiezhonghuanfangruyetipeiyangjihou，yingzaiyetibiaomianchudeguanneibishangqingqingmoca，shijunticonghuanshangtuoluo，hunjinyetipeiyangji
，saihaoshiguansaihou，yaodongyeti，shijuntizaiyetizhongfenbujunyun，huoyongshiguanzhendangqihunyun。

xiangyetipeiyangjizhongjiezhongliangdahuoyaoqiudingliangjiezhongshi，kejiangwujunshuihuoyetipeiyangjizhurujunzhongshiguan，yongjiezhonghuanjiangjuntaiguaxia
，zaijiangjunzhongxuanyeyiwujunxiguandingliangxichujiaru，huozhijiedaoruyetipeiyangji。ruguojunzhongweiyetipeiyangwu
，zekeyongwujunxiguandingliangxichujiaruhuozhijiedaoruyetipeiyangji。zhenggejiezhongguochengdouyaoqiuwujuncaozuo。

三、穿刺接種

用接種針挑取菌種（針必須挺直），自培養基的中心垂直地刺入半固體培養基中
，直至接近管底，但不要穿透，然後沿原穿刺線將針拔出，塞上試管塞，燒灼接種針。

上述幾種接種法的無菌操作
，凡未敘述的均按實驗一操作。試驗者應反複練習無菌操作接種技術，直至較熟練地掌握。

四、將已接種的斜麵
、液體和半固體培養基放置28—30℃溫箱，培養2—3天後取出觀察結果。