二(er)氧(yang)化(hua)碳(tan)培(pei)養(yang)箱(xiang)為(wei)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)提(ti)供(gong)了(le)理(li)想(xiang)的(de)生(sheng)長(chang)環(huan)境(jing),細(xi)胞(bao)在(zai)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)數(shu)月(yue)甚(shen)至(zhi)數(shu)年(nian),如(ru)果(guo)培(pei)養(yang)不(bu)當(dang)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)死(si)亡(wang)可(ke)能(neng)造(zao)成(cheng)極(ji)大(da)的(de)科(ke)研(yan)成(cheng)果(guo)損(sun)失(shi)。培(pei)養(yang)箱(xiang)本(ben)身(shen)性(xing)能(neng)的(de)穩(wen)定(ding)和(he)可(ke)靠(kao)性(xing)固(gu)然(ran)重(zhong)要(yao),另(ling)外(wai),正(zheng)確(que)的(de)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)和(he)日(ri)常(chang)保(bao)養(yang)對(dui)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)也(ye)是(shi)至(zhi)關(guan)重(zhong)要(yao)。
今天天美為大家介紹減少實驗室細胞汙染的三種途徑:
1.正確的使用培訓;
2.持續的日常保養;
3.適當的擺放位置。
shiyanshineiwangwangzhongduoshiyanrenyuangongyongyitaipeiyangxiang,nanmianyourenweicaozuoshiwu,douhuizengdajiaochawurandefengxian,yinciyingduisuoyoushiyanrenyuanjinxingpeiyangxiangdeshiyongpeixun。xuyaozhuyiyixiajidian:
設備使用培訓
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使用培養箱前必須著個人防護裝備,按照實驗室生物安全等級要求實施實驗室管理規範、無菌操作方法、標準操作流程(SOP)。
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實(shi)驗(yan)服(fu)袖(xiu)口(kou)需(xu)紮(zha)進(jin)手(shou)套(tao)內(nei),未(wei)紮(zha)進(jin)的(de)袖(xiu)口(kou)可(ke)能(neng)接(jie)觸(chu)到(dao)潔(jie)淨(jing)的(de)培(pei)養(yang)基(ji),會(hui)增(zeng)加(jia)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)的(de)風(feng)險(xian),另(ling)外(wai)裸(luo)露(lu)皮(pi)膚(fu)上(shang)的(de)可(ke)能(neng)潛(qian)在(zai)的(de)汙(wu)染(ran)源(yuan)也(ye)會(hui)增(zeng)加(jia)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)的(de)風(feng)險(xian);
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手套使用前用70%常用消毒劑消毒;
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培養瓶、培養盤、培養皿等在放入培養箱前需做好標記;
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從箱子後部依次往前擺放培養基,以免最早放置的被過多幹擾。
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近期需要取出的材料放至靠近箱門處並做好標記;
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帶蓋的長頸瓶應遠離箱門以避免交叉汙染;
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避免堆疊太多培養基;
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避免幹擾細胞生長盡量少開箱門。
人員操作培訓
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建立完善的實驗室管理規範;
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新進實驗員應建立培訓流程;
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實驗室內應定期或不間斷進行操作培訓;
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做好詳盡的文件記錄,文件記錄不僅單純的記錄實驗室事件,對設備定期維護、實驗數據查找都能起到很好的提示和記錄,比如提示每周檢查過濾器、記錄開門頻率對細胞生長的影響。
培養箱日常維(wei)護(hu)保(bao)養(yang)對(dui)其(qi)性(xing)能(neng)的(de)保(bao)障(zhang)非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao),甚(shen)至(zhi)比(bi)操(cao)作(zuo)技(ji)術(shu)失(shi)誤(wu)對(dui)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)影(ying)響(xiang)更(geng)大(da)。做(zuo)好(hao)培(pei)養(yang)箱(xiang)的(de)日(ri)常(chang)維(wei)護(hu)不(bu)僅(jin)減(jian)少(shao)對(dui)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)影(ying)響(xiang)更(geng)能(neng)延(yan)長(chang)培(pei)養(yang)箱(xiang)的(de)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming),降(jiang)低(di)實(shi)驗(yan)室(shi)成(cheng)本(ben)。
完善的文件管理
changshangtigongdecaozuoweihushuomingshushihenhaodecankaowenjian,huiliejurichangshiyongjibaoyangxuzhuyideyaodian,keyizuoweishiyanshipeiyangxiangweihuwenjiandecankao。zhidingweihubaoyangwenjianshixuquanmiankaolvpeiyangxiangshiyongpinlv、實驗室環境潔淨度、使用人員的數量、以及培養細胞的類型等,綜合各方麵情況列出合理的方案。
箱體的定期清潔
培養箱內外部的定期清潔頻率取決於培養細胞的類型和實驗室環境。
外wai部bu清qing潔jie必bi須xu定ding期qi去qu除chu灰hui塵chen及ji長chang期qi附fu著zhe在zai表biao麵mian的de汙wu染ran物wu,這zhe些xie汙wu染ran物wu在zai開kai門men時shi很hen可ke能neng隨sui空kong氣qi流liu動dong潛qian入ru箱xiang體ti內nei。培pei養yang量liang大da的de實shi驗yan室shi建jian議yi每mei周zhou清qing潔jie一yi次ci,培pei養yang量liang小xiao的de實shi驗yan室shi建jian議yi每mei月yue清qing潔jie一yi次ci。使shi用yong較jiao溫wen和he的de家jia用yong清qing潔jie劑ji或huo蒸zheng餾liu水shui清qing潔jie即ji可ke。
不鏽鋼內膽建議每月清潔一到兩次,圓角的設計可以減少汙染物的產生,可使用70%異丙醇、酒精或其它無腐蝕性的消毒劑擦拭,切記不可使用鹵素類消毒劑(次氯酸、漂白粉)。門口墊圈處很易滋生汙染物,需注意加強清潔,或拆下進行高溫滅菌。
水盤的清潔
水shui盤pan的de清qing潔jie和he換huan水shui是shi培pei養yang箱xiang日ri常chang維wei護hu很hen重zhong要yao的de項xiang目mu,至zhi少shao一yi周zhou需xu清qing潔jie一yi次ci,頻pin繁fan加jia水shui以yi保bao障zhang飽bao和he濕shi度du。水shui盤pan加jia水shui使shi用yong蒸zheng餾liu水shui或huo去qu離li子zi水shui,可ke以yi加jia少shao劑ji量liang的de硫liu酸suan銅tong溶rong液ye抑yi製zhi汙wu染ran物wu。
防止幹燥
如果培養環境濕度不足,培養基中的水分會蒸發造成環境幹燥影響細胞生長。至少每周加一次水對保持培養箱濕度非常重要。
汙染風險降到最低
細菌、黴菌、病毒或支原體汙染是細胞生長最大的威脅。現代的培養箱的設計和特點可以適當減少汙染發生。
HEPA過濾器
閉環HEPA過濾器是減少汙染發生的一個重要設計。HEPA過濾器持續提供箱內潔淨的空氣。但為保證HEPA過濾的有效性,HEPA需要定期更換,每周或每兩周應定期檢查過濾器。進氣過濾器(圖F)的壽命一般在3-6個月。NuAire建議供氣過濾器每使用5瓶氣或已變黃時更換一次,大的囊性過濾器(圖H)每兩年需更換一次。
配備HEPA過濾器的培養箱類似一個微型潔淨間,箱內持續過濾的空氣使箱體空氣潔淨度達到百級。每一次開箱門都可能造成汙染物的侵襲,NuAire培養箱每20分鍾換氣一次,使汙染物快速被過濾,箱體內空氣潔淨度達ISO 5級。
循環滅菌
一些實驗室潛在病原微生物如HIV病毒,需要145℃幹熱循環滅菌才能有效滅殺。145℃滅菌程序需要持續8-14小時,可選擇在夜間運行。NuAire培養箱特有的層架和內部五金件耐受145℃滅菌,無需滅菌前取出,節約了滅菌時間。
145℃滅菌需要按照實驗室SOP根據實際需要運行,並且不能代替日常的清潔保養。
培養箱需要放置在實驗室內合適的位置:需xu遠yuan離li走zou廊lang,環huan境jing溫wen度du需xu穩wen定ding,遠yuan離li水shui源yuan,遠yuan離li通tong氣qi設she備bei以yi免mian空kong氣qi汙wu染ran,遠yuan離li窗chuang口kou避bi免mian陽yang光guang直zhi射she,遠yuan離li其qi它ta熱re源yuan如ru高gao壓ya蒸zheng汽qi滅mie菌jun器qi,以yi及ji離li電dian源yuan近jin的de位wei置zhi。
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