進jin行xing培pei養yang時shi，動dong作zuo要yao準zhun確que敏min捷jie，但dan又you不bu必bi太tai快kuai，以yi防fang空kong氣qi流liu動dong，增zeng加jia汙wu染ran機ji會hui。不bu能neng用yong手shou觸chu及ji已yi消xiao毒du器qi皿min

，如ru已yi接jie觸chu
，要yao用yong火huo焰yan燒shao灼zhuo消xiao毒du或huo取qu備bei品pin更geng換huan。為wei拿na取qu方fang便bian，工gong作zuo台tai麵mian上shang的de用yong品pin要yao有you合he理li的de布bu局ju

，原yuan則ze上shang應ying是shi右you手shou使shi用yong的de東dong西xi放fang置zhi在zai右you側ce，左zuo手shou用yong品pin在zai左zuo側ce，酒jiu精jing燈deng置zhi於yu中zhong央yang。工gong作zuo由you始shi至zhi終zhong要yao保bao持chi一yi定ding順shun序xu性xing


，組zu織zhi或huo細xi胞bao在zai未wei做zuo處chu理li之zhi前qian，勿wu過guo早zao暴bao露lu在zai空kong氣qi中zhong。同tong樣yang
，培pei養yang液ye在zai未wei用yong前qian，不bu要yao過guo早zao開kai瓶ping；用過之後如不再重複使用，應立即封閉瓶口直立可增加落菌機會。吸取營養液
、PBS、細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)及(ji)其(qi)它(ta)各(ge)種(zhong)用(yong)液(ye)時(shi)，均(jun)應(ying)分(fen)別(bie)使(shi)用(yong)吸(xi)管(guan)，不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)
，以(yi)防(fang)擴(kuo)大(da)汙(wu)染(ran)或(huo)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。工(gong)作(zuo)中(zhong)不(bu)能(neng)麵(mian)向(xiang)操(cao)作(zuo)野(ye)講(jiang)話(hua)或(huo)咳(ke)嗽(sou)

，以(yi)免(mian)唾(tuo)沫(mo)把(ba)細(xi)菌(jun)或(huo)支(zhi)原(yuan)體(ti)帶(dai)入(ru)工(gong)作(zuo)台(tai)麵(mian)發(fa)生(sheng)汙(wu)染(ran)。操(cao)作(zuo)前(qian)用(yong)酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)超(chao)淨(jing)台(tai)麵(mian)及(ji)雙(shuang)手(shou)。手(shou)或(huo)相(xiang)對(dui)較(jiao)髒(zang)的(de)物(wu)品(pin)不(bu)能(neng)經(jing)過(guo)開(kai)放(fang)的(de)瓶(ping)口(kou)上(shang)方(fang)，瓶(ping)口(kou)最(zui)易(yi)汙(wu)染(ran)，加(jia)液(ye)時(shi)如(ru)吸(xi)管(guan)尖(jian)碰(peng)到(dao)瓶(ping)口(kou)
，則(ze)應(ying)將(jiang)吸(xi)管(guan)丟(diu)掉(diao)。

【培養前準備】

 

在開始實驗前要製定好實驗計劃和操作程序。有關數據的計算要事先做好。根據實驗要求
，準備各種所需器材和物品、清點無誤後將其放置操作場所（培養室、超淨台）內
，然後開始消毒。這可以避免開始實驗後．囚物品不全往返拿取而增加汙染機會。

 

【操作野消毒】

 

無菌培養室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地麵—次（拖布要專用）．紫外線照射消毒30-50min，超淨工作台台麵每次實驗前要用75％酒精擦洗。然後紫外線淌毒30min。在工作台麵消毒時切勿將培養細胞和培養用液同時照射紫外線，消毒時工作台麵上用品不要過多或重疊放置．否則會遮擋射線降低消毒效果。—些操作用具如移液器
、廢液缸
、汙物盒、試管架等用75%酒精擦洗後置於台內同時紫外線消毒。

tiwaipeiyangxibaoquefakangganrannengli，suoyifangzhiwuranshijuedingpeiyangchenggonghuoshibaideshouyaotiaojian。jibianshiyongshebeiwanshandeshiyanshi。ruoshiyanzhecuxindayi，jishucaozuobuguifan,也會導致汙染。因而．為在一切操作中為最大可能的保證無菌．每一項工作都必須做到有條不紊和完全靠。

 

  

【洗手和著裝】

 

原則上和外科手術相同。平時僅做觀察不做培養操作時，可穿裝細胞培養室內紫外線照射30min的清潔工作服。在利用超淨台工作時，因整個前臂要伸入箱內，應著長袖的清潔工作服，並於開始操作前要用75％酒精消毒手。如果實驗過程中手觸及可能汙染的物品和出入培養室都要重新用消毒液洗手。進入原代培養室需徹底洗手還要戴口罩
、著消毒衣帽。

 

【火焰消毒】

 

在無菌環境進行培養或做其它無菌工作時
，首先要點燃酒精燈或煤氣燈。以後一切操作，如按裝吸管帽、打開或封閉瓶口等，都需在火焰近處並經過燒灼進行。但要注意：金jin屬shu器qi械xie不bu能neng在zai為wei焰yan中zhong燒shao的de時shi間jian過guo長chang
，以yi防fang退tui火huo
，燒shao過guo的de金jin屬shu鑷nie要yao待dai冷leng卻que後hou才cai能neng挾xie取qu組zu織zhi，以yi免mian造zao成cheng組zu織zhi損sun傷shang。吸xi取qu過guo營ying養yang液ye後hou的de吸xi管guan不bu能neng再zai用yong火huo焰yan燒shao灼zhuo
，因yin殘can留liu在zai吸xi管guan頭tou中zhong營ying養yang液ye能neng燒shao焦jiao形xing成cheng炭tan膜mo，再zai用yong時shi會hui把ba有you害hai物wu帶dai入ru營ying養yang液ye中zhong。開kai啟qi
、guanbichangyouxibaodepeiyangpingshi，huoyanmiejunshijianyaoduan。fangzhiyinwenduguogaoshaosixibao。lingwaijiaosaiguohuoyanshiyebunengshijianchang，yimianshaojiaochanshengyouduqiti
，weihaipeiyangxibao。