一、切片前的準備:
1、恒溫水浴 鍋首先預熱至35℃—40℃。
2、蠟(la)塊(kuai)整(zheng)修(xiu),將(jiang)蠟(la)塊(kuai)組(zu)織(zhi)麵(mian)的(de)石(shi)蠟(la)用(yong)刀(dao)修(xiu)去(qu),使(shi)組(zu)織(zhi)全(quan)部(bu)暴(bao)露(lu)出(chu)切(qie)麵(mian)並(bing)修(xiu)平(ping),以(yi)減(jian)少(shao)切(qie)片(pian)刀(dao)的(de)磨(mo)損(sun)。將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)左(zuo)右(you)兩(liang)側(ce)的(de)石(shi)蠟(la)在(zai)不(bu)損(sun)傷(shang)組(zu)織(zhi)及(ji)影(ying)響(xiang)診(zhen)斷(duan)的(de)原(yuan)則(ze)上(shang),全(quan)部(bu)切(qie)除(chu);否則切片容易皺褶。組織塊上下邊緣的石蠟視組織情況修齊修平;shilabuxuliudeguoduo,yingjinliangshaoliu,yibaochizuzhijianjudezuixiaoxiandu。zheyangqiexiadeqiepianjichengdaizhuang,yebuwanqu。pianjuxiao,zaitiepianshijiukexiangyingduotiepian,youliyujianzhazhenduan。xiuqielakuaishizhinengyidianyidiandiqiediaolabian,yaoshidapianxiuqieyishilakuaiduanlieluchuzuzhi;遇此情況應返入新蠟再次包埋。
3.載玻片應事先洗滌幹淨,無油膩和不透明現象,應將載玻片浸入酸缸內12小時後流水衝洗,再烤幹備用。根據切片需要張數,每片塗上一層極薄的蛋白甘油,插於載片板(或載片架)上備用。
蛋白甘油的配製:取新鮮雞蛋1份加甘油1份再加適量麝香草酚攪勻。此法主要是防止脫片,實際上一張很清潔的載玻片不塗蛋白甘油也不會脫片。
4、將鋒利的刀片裝入切片刀夾鉗內,調整角度和位置後隨即緊固,檢查切片刀的傾斜度是否正確,傾角過大、則切片上卷;傾角過小則切片皺起,以20°-30°為佳。
5、備用小型毛筆、小型無鉤鑷子、鉛筆。
二、切片的步驟:
1、將蠟塊固定於切片機頭上的夾座內,調整到稍離開切片能夠切到的位置上,注意蠟塊組織切麵與切片刀口要垂直平行。
2、再調整蠟塊組織切麵恰好與刀口接觸,旋緊刀架,固定好機頭。
3、根據需要調整切片厚度。
4、搖動切片機手輪先進行修整切片,直到切出完整的最大組織切麵後,再進行切製。
5、實踐中可用右手轉動切片機手輪,左手用毛筆托起蠟片,協調地進行切片操作。
6、切(qie)下(xia)的(de)切(qie)片(pian)帶(dai),一(yi)端(duan)用(yong)鑷(nie)子(zi)輕(qing)輕(qing)拉(la)起(qi),應(ying)盡(jin)可(ke)能(neng)將(jiang)切(qie)片(pian)帶(dai)拉(la)直(zhi)展(zhan)開(kai),用(yong)毛(mao)筆(bi)將(jiang)切(qie)片(pian)帶(dai)從(cong)刀(dao)口(kou)向(xiang)上(shang)挑(tiao)起(qi),拉(la)下(xia)切(qie)片(pian)帶(dai),然(ran)後(hou)輕(qing)拖(tuo)鋪(pu)於(yu)恒(heng)溫(wen)水(shui)麵(mian)上(shang)。
三、切片的注意事項
1、切qie片pian質zhi量liang的de好hao壞huai,除chu與yu技ji術shu熟shu練lian程cheng度du和he切qie片pian機ji的de好hao壞huai有you關guan外wai,切qie片pian刀dao是shi決jue定ding的de因yin素su,所suo以yi刀dao一yi定ding要yao磨mo得de十shi分fen鋒feng利li。否fou則ze在zai切qie片pian時shi會hui自zi行xing卷juan起qi或huo皺zhou起qi,或huo將jiang組zu織zhi劃hua傷shang出chu現xian刀dao痕hen,更geng不bu能neng順shun利li地di將jiang切qie片pian切qie成cheng連lian續xu地di長chang條tiao帶dai狀zhuang。切qie片pian刀dao如ru有you缺que口kou存cun在zai,將jiang使shi製zhi成cheng的de切qie片pian斷duan裂lie、破碎,不完整,切片時應時時擦淨刀口。
2、切qie片pian機ji的de各ge個ge零ling件jian和he螺luo絲si應ying旋xuan緊jin,否fou則ze將jiang會hui產chan生sheng震zhen動dong。在zai每mei次ci更geng換huan蠟la塊kuai時shi,應ying習xi慣guan地di檢jian查zha一yi下xia組zu織zhi塊kuai是shi否fou夾jia緊jin,切qie片pian刀dao是shi否fou穩wen固gu,稍shao有you疏shu忽hu就jiu會hui影ying響xiang切qie片pian質zhi量liang,甚shen至zhi將jiang蠟la塊kuai全quan部bu切qie壞huai,造zao成cheng不bu可ke彌mi補bu的de後hou果guo。在zai切qie製zhi切qie片pian的de開kai頭tou階jie段duan如ru出chu現xian切qie製zhi不bu良liang與yu其qi他ta故gu障zhang,最zui常chang見jian的de原yuan因yin是shi蠟la塊kuai或huo切qie片pian刀dao的de鬆song動dong所suo致zhi。
3、在搖動切片機時,用力要求均勻一致,不宜過重過猛,否則可因用力過重而使機身震動,造成切片厚薄不均。遇有硬化過度的腦、肝、脾等組織時,更應該輕輕切削,以防組織由於震動形成空洞現象。
4、在夏秋季節進行切片時,應使用冰塊加強冷卻,這樣不僅可保持石蠟的硬度,同時也減少了切片的褶皺,給切片製作帶來方便。
四、貼片 :
1、將單張或數張切片,用鑷子夾住蠟片的一邊並提起,鋪於恒溫水中,(光亮的一麵朝下)lijiyongmaobiqingqinglazhanyiqiepianwuzhouzheweizuihao。ruyouzhouzheshiyongniezixixindizhugeqingqingbokai,zhuyibukebopozuzhi。ranhoufenkaimeizhangqiepian,xuanquqizhongzuiwanzhengde,meiyouzhouzhedeqiepian。
2、daiqiepianzaihengwenshuineichongfentankaizhanpinghou,jiangzaibopianchuizhicharushuizhongyituyoudanbaiganyoumianqingkaoqiepian,bingyongmaobijiangqiepianyibianboyubopianshang,suijijiangbopianzhilitiqi,chenbopianshangrengyoushaoliangshuifenshiyongmaobi,bozhengqiepianweizhi。ruzuzhijiaoxiao,kezaibopianshangduotiejipianhuojipai,danpailieyingmiji、整齊。
3、用鉛筆在玻片一端的毛玻璃上寫上標本編號,字要寫得小而清楚、端正。
4、將附貼好的切片置於60℃恒溫箱 內幹燥2小時,蛋白質凝固後即可進行染色。
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