液相色譜儀，於多數檢測人來說是很好上手的儀器，但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員也會習慣於一些錯誤的操作，導致挺貴的機器沒用幾次就壞了。
簡化分析過程固然重要，但是為了省時間而忽略了一些必不可少的步驟，損壞了儀器就得不償失了。因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
流(liu)動(dong)相(xiang)不(bu)應(ying)含(han)有(you)任(ren)何(he)腐(fu)蝕(shi)性(xing)物(wu)質(zhi)，含(han)有(you)緩(huan)衝(chong)液(ye)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)不(bu)應(ying)保(bao)留(liu)在(zai)泵(beng)內(nei)，尤(you)其(qi)是(shi)在(zai)停(ting)泵(beng)過(guo)夜(ye)或(huo)更(geng)長(chang)時(shi)間(jian)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)。如(ru)果(guo)將(jiang)含(han)緩(huan)衝(chong)液(ye)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)留(liu)在(zai)泵(beng)內(nei)，由(you)於(yu)蒸(zheng)發(fa)或(huo)泄(xie)漏(lou)，甚(shen)至(zhi)隻(zhi)是(shi)由(you)於(yu)溶(rong)液(ye)的(de)靜(jing)置(zhi)，就(jiu)可(ke)能(neng)析(xi)出(chu)鹽(yan)的(de)微(wei)細(xi)晶(jing)體(ti)，這(zhe)些(xie)晶(jing)體(ti)將(jiang)和(he)上(shang)述(shu)固(gu)體(ti)微(wei)粒(li)一(yi)樣(yang)損(sun)壞(huai)密(mi)封(feng)環(huan)和(he)柱(zhu)塞(sai)等(deng)。因此，必須泵入純水將泵充分清洗後，再換成適合於色譜柱保存和有利於泵維護的溶劑（對於反相鍵合矽膠固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生漏液。可能是泵內有大量氣體，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5mL/min）下運轉，將氣泡排盡，也可用一個50mL針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損，需更換。原因可能是氣泡，需要排除；huozheshidanxiangfaneiyouyiwu，kexiexiadanxiangfa，jinrubingtongneichaoshengqingxi。youshikenengshishalvbangneiyouqipao，huobeiyandeweixijinglihuozishengdeweishengwubufendusai，zheshi，kexiexiashalvbangjinruliudongxiangneichaoshengchuqipao，huojiangshalvbangjinruxisuan（如4mol/L硝酸）內迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。 kenengshishiguanlubeidusai，xuyaoqingchuheqingxi。yalijiangdideyuanyinzekenengshiguanluyouxielou。jianzhadusaihuoxieloushiyingzhuduanjinxing。zaijinxingtiduxituoshi，youyuduozhongrongjihunhe，erqiezuchengbuduanbianhua，yincidailaiyixieteshuwenti，bixuchongfenzhongshi：PS：（在zai液ye相xiang色se譜pu中zhong對dui組zu分fen複fu雜za的de樣yang品pin采cai用yong梯ti度du洗xi脫tuo的de方fang法fa。在zai同tong一yi個ge分fen析xi周zhou期qi中zhong，按an一yi定ding程cheng序xu不bu斷duan改gai變bian流liu動dong相xiang的de濃nong度du配pei比bi，稱cheng為wei梯ti度du洗xi脫tuo。從cong而er可ke以yi使shi一yi個ge複fu雜za樣yang品pin中zhong的de性xing質zhi差cha異yi較jiao大da的de組zu分fen能neng按an各ge自zi適shi宜yi的de容rong量liang因yin子zik達到良好的分離目的。梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。）
yaozhuyirongjidehurongxing，buxianghunrongderongjibunengyongzuotiduxituodeliudongxiang。youxierongjizaiyidingbilineihunrong，chaochufanweihoujiubuhurong，shiyongshigengyaoyinqizhuyi。當有機溶劑和緩衝液混合時，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時需特別小心。梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)所(suo)用(yong)的(de)溶(rong)劑(ji)純(chun)度(du)要(yao)求(qiu)更(geng)高(gao)，以(yi)保(bao)證(zheng)良(liang)好(hao)的(de)重(zhong)現(xian)性(xing)。進(jin)行(xing)樣(yang)品(pin)分(fen)析(xi)前(qian)必(bi)須(xu)進(jin)行(xing)空(kong)白(bai)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)，以(yi)辨(bian)認(ren)溶(rong)劑(ji)雜(za)質(zhi)峰(feng)，因(yin)為(wei)弱(ruo)溶(rong)劑(ji)中(zhong)的(de)雜(za)質(zhi)富(fu)集(ji)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)頭(tou)後(hou)會(hui)被(bei)強(qiang)溶(rong)劑(ji)洗(xi)脫(tuo)下(xia)來(lai)。用(yong)於(yu)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)的(de)溶(rong)劑(ji)需(xu)徹(che)底(di)脫(tuo)氣(qi)，以(yi)防(fang)止(zhi)混(hun)合(he)時(shi)產(chan)生(sheng)氣(qi)泡(pao)。混hun合he溶rong劑ji的de粘zhan度du常chang隨sui組zu成cheng而er變bian化hua，因yin而er在zai梯ti度du洗xi脫tuo時shi常chang出chu現xian壓ya力li的de變bian化hua。例li如ru甲jia醇chun和he水shui粘zhan度du都dou較jiao小xiao，當dang二er者zhe以yi相xiang近jin比bi例li混hun合he時shi粘zhan度du增zeng大da很hen多duo，此ci時shi的de柱zhu壓ya大da約yue是shi甲jia醇chun或huo水shui為wei流liu動dong相xiang時shi的de兩liang倍bei。因yin此ci要yao注zhu意yi防fang止zhi梯ti度du洗xi脫tuo過guo程cheng中zhong壓ya力li超chao過guo輸shu液ye泵beng或huo色se譜pu柱zhu能neng承cheng受shou的de最zui大da壓ya力li。①樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩衝鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結束後應衝洗進樣閥。通常可用水衝洗，或先用能溶解樣品的溶劑衝洗，再用水衝洗。
色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。一般說來色譜柱不能反衝，隻有生產者指明該柱可以反衝時，才可以反衝除去留在柱頭的雜質。否則反衝會迅速降低柱效。選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以(yi)避(bi)免(mian)固(gu)定(ding)相(xiang)被(bei)破(po)壞(huai)。有(you)時(shi)可(ke)以(yi)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)前(qian)麵(mian)連(lian)接(jie)一(yi)預(yu)柱(zhu)，分(fen)析(xi)柱(zhu)是(shi)鍵(jian)合(he)矽(gui)膠(jiao)時(shi)，預(yu)柱(zhu)為(wei)矽(gui)膠(jiao)，可(ke)使(shi)流(liu)動(dong)相(xiang)在(zai)進(jin)入(ru)分(fen)析(xi)柱(zhu)之(zhi)前(qian)預(yu)先(xian)被(bei)矽(gui)膠(jiao)“飽和”，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。bimianjiangjizhifuzadeyangpinyouqishishengwuyangpinzhijiezhuruzhunei，xuyaoduiyangpinjinxingyuchulihuozhezaijinyangqihesepuzhuzhijianlianjieyibaohuzhu。baohuzhuyibanshitianyouxiangsigudingxiangdeduanzhu。baohuzhukeyierqieyinggaijingchanggenghuan。
對dui於yu儀yi器qi本ben身shen一yi般ban不bu會hui有you問wen題ti，特te別bie是shi剛gang買mai回hui來lai的de新xin儀yi器qi。對dui於yu儀yi器qi本ben身shen最zui重zhong要yao的de就jiu是shi儀yi器qi的de校xiao驗yan，剛gang買mai回hui來lai的de儀yi器qi一yi般ban都dou是shi由you賣mai家jia先xian對dui儀yi器qi做zuo係xi統tong的de確que認ren工gong作zuo（包括IQ、PQ、OQ），確que認ren順shun利li通tong過guo後hou，再zai請qing國guo家jia或huo省sheng級ji儀yi器qi檢jian定ding局ju的de來lai校xiao驗yan，檢jian定ding合he格ge後hou就jiu可ke以yi放fang心xin使shi用yong了le，除chu此ci之zhi外wai，一yi些xie做zuo得de好hao的de公gong司si每mei半ban年nian會hui對dui儀yi器qi進jin行xing一yi次ci的de內nei部bu校xiao驗yan，目mu的de就jiu是shi為wei了le保bao證zheng儀yi器qi的de正zheng常chang可ke運yun行xing狀zhuang態tai。色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。 流動相就涉及到配製流動相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大於18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的幹擾。色se譜pu柱zhu會hui因yin不bu同tong的de品pin種zhong而er有you不bu同tong的de要yao求qiu，但dan每mei根gen色se譜pu柱zhu都dou有you它ta的de清qing洗xi要yao求qiu，這zhe個ge在zai色se譜pu柱zhu說shuo明ming書shu上shang都dou可ke以yi找zhao到dao，一yi定ding要yao根gen據ju上shang麵mian的de要yao求qiu進jin行xing，否fou則ze會hui造zao成cheng色se譜pu柱zhu效xiao下xia降jiang和he色se譜pu柱zhu的de使shi用yong壽shou命ming縮suo短duan，檢jian測ce波bo長chang也ye會hui因yin品pin種zhong的de不bu同tong有you不bu同tong的de要yao求qiu，這zhe裏li需xu要yao指zhi出chu的de是shi要yao注zhu意yi觀guan察cha檢jian測ce器qi氘dao燈deng能neng量liang的de變bian化hua，比bi如ru基ji線xian波bo動dong大da，活huo性xing成cheng分fen的de響xiang應ying值zhi突tu然ran變bian小xiao等deng，都dou有you可ke能neng是shi氘dao燈deng的de能neng量liang不bu足zu所suo引yin起qi的de，氘dao燈deng一yi般ban建jian議yi使shi用yong800小時，但實際上使用時間不止，可根據實際情況更換。流速也因品種的不同而不同，一般為1.0mL/min，流速是不可隨意改動的，特別是作為QCrenyuan，danshizuoweiyanfarenyuan，youshiweilemosuotiaojianhuojinxingfangfanaiyongxingyanzheng，huiduiliusujinxinggaibianyipingjiafangfadeshiyongxing。duiyujinyangliangyinbutongdepinzhongyeyoubutongguiding，jinyangliangzhekuaixianzaidoushiyongzidongjinyang，suoyijinyangjingmidudouhenhao，buxuqiangtiaoshenme。
首shou先xian，作zuo為wei液ye相xiang操cao作zuo人ren員yuan，一yi定ding要yao認ren真zhen學xue習xi液ye相xiang的de說shuo明ming書shu，掌zhang握wo液ye相xiang硬ying件jian和he軟ruan件jian的de操cao作zuo，掌zhang握wo日ri常chang的de維wei護hu保bao養yang，掌zhang握wo最zui基ji礎chu故gu障zhang的de排pai除chu和he維wei修xiu。一yi般ban液ye相xiang的de操cao作zuo規gui程cheng也ye是shi有you操cao作zuo人ren員yuan起qi草cao的de，所suo以yi隻zhi要yao嚴yan格ge按an照zhao操cao作zuo要yao求qiu進jin行xing操cao作zuo，一yi般ban不bu會hui出chu現xian問wen題ti，當dang然ran啫啫喱li需xu要yao特te別bie指zhi出chu的de是shi對dui於yu液ye相xiang的de日ri常chang維wei護hu保bao養yang很hen重zhong要yao，比bi如ru流liu動dong相xiang的de過guo濾lv、脫氣、泵密封墊的清洗、係統管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等，倘若不堅持，很容易導致色譜柱堵塞、係統壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費時間。其次，操作人員在配製液相分析用樣品溶液時，最好由同一個人單獨完成，以免不必要的偶然誤差。液相色譜儀應盡量安裝於水平、遠離振動、電(dian)磁(ci)幹(gan)擾(rao)的(de)屋(wu)內(nei)的(de)台(tai)麵(mian)上(shang)，有(you)條(tiao)件(jian)的(de)話(hua)盡(jin)量(liang)將(jiang)液(ye)相(xiang)數(shu)據(ju)處(chu)理(li)係(xi)統(tong)分(fen)隔(ge)開(kai)，一(yi)個(ge)是(shi)防(fang)止(zhi)色(se)譜(pu)基(ji)線(xian)噪(zao)音(yin)偏(pian)大(da)，基(ji)線(xian)不(bu)穩(wen)等(deng)，一(yi)個(ge)是(shi)為(wei)減(jian)少(shao)對(dui)人(ren)體(ti)的(de)危(wei)害(hai)。 
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