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液相分析中，在適當的分析方法條件下，單一化合物的色譜峰應是對稱、尖銳的峰型。
如果色譜圖上出現的是雙峰：
（1）首先就會推測樣品可能含有兩個或以上的化合物。
（2）如果確保進樣的是化學純的單一物質，應當考慮是否是光學純的問題，即可能存在手性異構體，這就需采用手性色譜柱進行分析；此ci外wai，還hai需xu考kao慮lv是shi不bu是shi樣yang品pin不bu穩wen定ding的de原yuan因yin，在zai該gai分fen析xi條tiao件jian下xia迅xun速su降jiang解jie成cheng兩liang個ge或huo以yi上shang的de化hua合he物wu。前qian麵mian兩liang種zhong情qing況kuang很hen好hao解jie決jue，畢bi竟jing是shi兩liang個ge不bu同tong的de化hua合he物wu，更geng換huan色se譜pu柱zhu、調整分析條件就能將其分開。
（3）ruguoquebaojinyangdeshiguangxuechundedanyiwuzhi，qiegaijiegouzaiciseputiaojianzhongwending，rengranchuxianleshuangfeng，tongchangbeichengweisepushuangfeng，yejiushidanyiwuzhizaiseputuzhongchuxianshuangfengdexianxiang。zhezhongqingkuangfeichangrongyiwudaofenxizhedepanduan，namesepushuangfenggairuhepanbiequfen？shishenmeyuanyinchansheng，yougairuhejiejuene？keyicongyixiajifangmiansikaosepushuangfengdechanshengdeyuanyin。
1.色譜柱或保護柱汙染或塌陷
這是遇到色譜雙峰首先考慮的方麵，如果你分析樣品時發現每個色譜峰都出現雙峰（出峰越快，出現雙峰的可能性越少），尤其采用單一純物質時，可以判定色譜柱出問題（柱頭受損或柱頭固定相變髒或流失）。如(ru)果(guo)進(jin)樣(yang)量(liang)少(shao)，原(yuan)來(lai)色(se)譜(pu)柱(zhu)正(zheng)常(chang)，色(se)譜(pu)峰(feng)的(de)形(xing)狀(zhuang)多(duo)為(wei)一(yi)大(da)峰(feng)帶(dai)一(yi)小(xiao)峰(feng)，不(bu)一(yi)定(ding)拖(tuo)尾(wei)，這(zhe)一(yi)般(ban)應(ying)是(shi)柱(zhu)頭(tou)端(duan)堵(du)塞(sai)，將(jiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)反(fan)接(jie)衝(chong)洗(xi)維(wei)護(hu)，一(yi)般(ban)情(qing)況(kuang)下(xia)可(ke)以(yi)解(jie)決(jue)。如(ru)果(guo)峰(feng)拖(tuo)尾(wei)，雙(shuang)峰(feng)強(qiang)弱(ruo)相(xiang)差(cha)不(bu)大(da)，柱(zhu)頭(tou)填(tian)料(liao)受(shou)汙(wu)染(ran)或(huo)鍵(jian)合(he)相(xiang)流(liu)失(shi)可(ke)能(neng)性(xing)更(geng)大(da)，這(zhe)時(shi)可(ke)以(yi)對(dui)色(se)譜(pu)柱(zhu)維(wei)修(xiu)處(chu)理(li)或(huo)者(zhe)使(shi)用(yong)新(xin)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)，維(wei)修(xiu)建(jian)議(yi)交(jiao)由(you)廠(chang)家(jia)處(chu)理(li)。
解決方案：將保護柱拿掉，檢測色譜雙峰是否有改善。如果沒有使用保護柱，那就是色譜柱汙染或者堵塞（可以通過壓力判斷），最好的方法是將色譜柱反過來接，用流動相或其它溶劑衝洗、酸(suan)洗(xi)，將(jiang)堵(du)在(zai)柱(zhu)頭(tou)的(de)殘(can)留(liu)物(wu)衝(chong)掉(diao)，一(yi)般(ban)情(qing)況(kuang)下(xia)可(ke)以(yi)解(jie)決(jue)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)問(wen)題(ti)。如(ru)果(guo)依(yi)舊(jiu)不(bu)行(xing)，那(na)就(jiu)是(shi)強(qiang)吸(xi)附(fu)物(wu)質(zhi)汙(wu)染(ran)了(le)色(se)譜(pu)柱(zhu)，則(ze)有(you)必(bi)要(yao)采(cai)取(qu)色(se)譜(pu)柱(zhu)再(zai)生(sheng)的(de)方(fang)法(fa)。
2.溶劑效應
這zhe是shi雙shuang峰feng產chan生sheng的de一yi個ge很hen重zhong要yao的de原yuan因yin，即ji樣yang品pin溶rong劑ji與yu流liu動dong相xiang的de相xiang容rong性xing不bu好hao，導dao致zhi單dan一yi物wu質zhi出chu現xian色se譜pu雙shuang峰feng。例li如ru當dang以yi中zhong等deng極ji性xing的de溶rong劑ji作zuo為wei進jin樣yang溶rong劑ji，如ru純chun甲jia醇chun、純(chun)乙(yi)腈(jing)，純(chun)乙(yi)醇(chun)，而(er)流(liu)動(dong)相(xiang)體(ti)係(xi)中(zhong)以(yi)強(qiang)極(ji)性(xing)水(shui)為(wei)主(zhu)，樣(yang)品(pin)進(jin)樣(yang)體(ti)積(ji)較(jiao)大(da)時(shi)，很(hen)可(ke)能(neng)出(chu)現(xian)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)現(xian)象(xiang)。主(zhu)要(yao)是(shi)由(you)於(yu)樣(yang)品(pin)溶(rong)劑(ji)與(yu)流(liu)動(dong)相(xiang)極(ji)性(xing)相(xiang)差(cha)太(tai)大(da)，流(liu)動(dong)相(xiang)來(lai)不(bu)及(ji)將(jiang)進(jin)樣(yang)溶(rong)劑(ji)稀(xi)釋(shi)，從(cong)而(er)引(yin)起(qi)色(se)譜(pu)柱(zhu)內(nei)的(de)環(huan)境(jing)突(tu)然(ran)發(fa)生(sheng)較(jiao)大(da)的(de)變(bian)化(hua)（即極性不均勻），造zao成cheng組zu分fen洗xi脫tuo不bu均jun勻yun，導dao致zhi色se譜pu峰feng裂lie分fen或huo分fen叉cha。對dui極ji性xing比bi較jiao敏min感gan的de化hua合he物wu容rong易yi產chan生sheng此ci種zhong情qing況kuang，通tong常chang表biao現xian在zai出chu峰feng時shi間jian較jiao早zao的de色se譜pu峰feng裂lie分fen，對dui較jiao晚wan的de色se譜pu峰feng影ying響xiang較jiao小xiao，且qie第di二er峰feng比bi第di一yi峰feng小xiao，常chang伴ban有you拖tuo尾wei。
解決方案：調整樣品的進樣溶劑，盡可能與流動相溶劑保持一致；此外，減小樣品的進樣體積，亦可以減少色譜雙峰的發生。
3.進樣量過載
通tong常chang表biao現xian為wei雙shuang峰feng緊jin靠kao在zai一yi起qi，基ji本ben上shang齊qi高gao不bu拖tuo尾wei。主zhu要yao是shi由you於yu樣yang品pin進jin樣yang濃nong度du很hen高gao或huo進jin樣yang體ti積ji很hen大da，色se譜pu柱zhu過guo載zai，從cong而er出chu現xian色se譜pu雙shuang峰feng。如ru果guo降jiang低di進jin樣yang量liang將jiang樣yang品pin稀xi釋shi後hou再zai進jin樣yang，色se譜pu雙shuang峰feng基ji本ben就jiu可ke以yi改gai善shan。
解決方案：將樣品稀釋，同時減少進樣體積。
4.流動相的酸堿度
這種情況主要針對弱酸堿性化合物而言。流動相中酸堿pH值(zhi)不(bu)僅(jin)與(yu)峰(feng)拖(tuo)尾(wei)相(xiang)關(guan)，同(tong)時(shi)也(ye)可(ke)能(neng)出(chu)現(xian)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)。通(tong)常(chang)是(shi)第(di)二(er)峰(feng)比(bi)第(di)一(yi)峰(feng)小(xiao)，當(dang)出(chu)峰(feng)時(shi)間(jian)較(jiao)早(zao)時(shi)，兩(liang)峰(feng)高(gao)差(cha)距(ju)較(jiao)大(da)，第(di)二(er)峰(feng)較(jiao)小(xiao)，甚(shen)至(zhi)消(xiao)失(shi)；當dang出chu峰feng時shi間jian較jiao長chang時shi，峰feng高gao趨qu於yu相xiang等deng。主zhu要yao可ke能neng是shi樣yang品pin在zai流liu動dong相xiang中zhong存cun在zai酸suan堿jian解jie離li平ping衡heng，化hua合he物wu同tong時shi存cun在zai已yi解jie離li和he未wei解jie離li兩liang種zhong分fen子zi狀zhuang態tai。我wo們men曾zeng采cai用yongHPLC製備分離過一類膽汁酸類成分，流動相中加入0.01%甲酸，雖色譜峰不拖尾，但幾乎每個膽汁酸類色譜峰裂分成雙峰。當提高流動相中甲酸的濃度至0.05%和0.1%，可以明顯看到膽汁酸色譜峰的裂分距離縮小，明顯的由色譜雙峰向單峰融合。
解決方案：改變流動相中酸堿的pH值，提高酸堿的濃度，在更強的酸堿性條件進行分析。
5.樣品的互變異構
如果某一物質出現雙峰，兩峰緊靠且不拖尾，條件稍加變化，如pH、溫度改變，雙峰消失或減小，例如紅黴素等。有的樣品采用LC/MS分fen析xi時shi，紫zi外wai色se譜pu圖tu雖sui不bu易yi觀guan察cha到dao雙shuang峰feng，但dan質zhi譜pu總zong離li子zi流liu圖tu出chu現xian較jiao為wei明ming顯xian的de色se譜pu雙shuang峰feng。這zhe可ke能neng與yu特te定ding的de物wu質zhi有you關guan，由you於yu其qi化hua學xue結jie構gou的de特te點dian，存cun在zai互hu變bian異yi構gou現xian象xiang，這zhe種zhong互hu變bian異yi構gou體ti無wu法fa分fen開kai，而er是shi以yi一yi個ge動dong態tai平ping衡heng存cun在zai，如ru酮tong式shi和he烯xi醇chun式shi互hu變bian。
解決方案：了解樣品性質，調整色譜方法，如改變流動相或進樣溶劑中pH值、緩衝鹽，降低或升高柱溫箱的溫度等，以減少互變異構的發生，促使樣品在分析條件中主要以單一構型為主。
6.儀器參數設置不合理
參比波長設置錯誤，例如設置分析波長254nm，參比波長400nm，這個對於大多數化合物可能沒影響。但是如果被測化合物，在400nm處也有強的紫外吸收，比254nm更強。這樣其出峰時，由於背景的抵扣作用，本來一個峰會變成對稱的二個峰，而且如果將二峰之間的峰穀反轉180度，恰好是一個完整的峰。這時要將參比波長設置更大，或者取消。
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