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fangbiankuaijiedefenxiguochengguranzhongyao，danshiweileduozuoyangpinerhulveleyixiebibukeshaodebuzhou，wangwangdebuchangshi，naxiecaozuobunengzuo？naxielanerbunengtou？na些小概率的故障師傅沒教怎麼辦？液相使用過程中有哪四大關鍵因素要注意？
01
【流動相不過濾】
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
02
【使用後沒有及時清洗泵】
liudongxiangbuyinghanyourenhefushixingwuzhi，hanyouhuanchongyedeliudongxiangbuyingbaoliuzaibengnei，youqishizaitingbengguoyehuogengchangshijiandeqingkuangxia。ruguojianghanhuanchongyedeliudongxiangliuzaibengnei，youyuzhengfahuoxielou，shenzhizhishiyouyurongyedejingzhi，jiukenengxichuyandeweixijingti，zhexiejingtijiangheshangshugutiweiliyiyangsunhuaimifenghuanhezhusaideng。yinci，bixubengruchunshuijiangbengchongfenqingxihou，zaihuanchengshiheyusepuzhubaocunheyouliyubengweihuderongji（對於反相鍵合矽膠固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。
03
【流動相走空】
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生漏液。
沒有流動相流出，又無壓力指示怎麼辦？
可能是泵內有大量氣體，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5ml/min）下運轉，將氣泡排盡，也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損，需更換。
04
【壓力和流量不穩】
原因可能是氣泡，需要排除；或huo者zhe是shi單dan向xiang閥fa內nei有you異yi物wu，可ke卸xie下xia單dan向xiang閥fa，浸jin入ru丙bing酮tong內nei超chao聲sheng清qing洗xi。有you時shi可ke能neng是shi砂sha濾lv棒bang內nei有you氣qi泡pao，或huo被bei鹽yan的de微wei細xi晶jing粒li或huo滋zi生sheng的de微wei生sheng物wu部bu分fen堵du塞sai，這zhe時shi，可ke卸xie下xia砂sha濾lv棒bang浸jin入ru流liu動dong相xiang內nei超chao聲sheng除chu氣qi泡pao，或huo將jiang砂sha濾lv棒bang浸jin入ru稀xi酸suan（如4mol/L硝酸）內迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。
壓力為啥過高或過低？
可能是是管路被堵塞，需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時應逐段進行。
在進行梯度洗脫時，由於多種溶劑混合，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題，必須充分重視。
PS：zaiyexiangsepuzhongduizufenfuzadeyangpincaiyongtiduxituodefangfa。zaitongyigefenxizhouqizhong，anyidingchengxubuduangaibianliudongxiangdenongdupeibi，chengweitiduxituo。congerkeyishiyigefuzayangpinzhongdexingzhichayijiaodadezufennengangezishiyiderongliangyinzik達到良好的分離目的。
梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。
05
【梯度洗脫的流動相選擇不當】
要yao注zhu意yi溶rong劑ji的de互hu溶rong性xing，不bu相xiang混hun溶rong的de溶rong劑ji不bu能neng用yong作zuo梯ti度du洗xi脫tuo的de流liu動dong相xiang。有you些xie溶rong劑ji在zai一yi定ding比bi例li內nei混hun溶rong，超chao出chu範fan圍wei後hou就jiu不bu互hu溶rong，使shi用yong時shi更geng要yao引yin起qi注zhu意yi。當dang有you機ji溶rong劑ji和he緩huan衝chong液ye混hun合he時shi，還hai可ke能neng析xi出chu鹽yan的de晶jing體ti，尤you其qi使shi用yong磷lin酸suan鹽yan時shi需xu特te別bie小xiao心xin。
06
【忽略的空白梯度洗脫】
梯ti度du洗xi脫tuo所suo用yong的de溶rong劑ji純chun度du要yao求qiu更geng高gao，以yi保bao證zheng良liang好hao的de重zhong現xian性xing。進jin行xing樣yang品pin分fen析xi前qian必bi須xu進jin行xing空kong白bai梯ti度du洗xi脫tuo，以yi辨bian認ren溶rong劑ji雜za質zhi峰feng，因yin為wei弱ruo溶rong劑ji中zhong的de雜za質zhi富fu集ji在zai色se譜pu柱zhu頭tou後hou會hui被bei強qiang溶rong劑ji洗xi脫tuo下xia來lai。用yong於yu梯ti度du洗xi脫tuo的de溶rong劑ji需xu徹che底di脫tuo氣qi，以yi防fang止zhi混hun合he時shi產chan生sheng氣qi泡pao。
07
【溶劑混合所帶來的粘度變化】
混(hun)合(he)溶(rong)劑(ji)的(de)粘(zhan)度(du)常(chang)隨(sui)組(zu)成(cheng)而(er)變(bian)化(hua)，因(yin)而(er)在(zai)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)時(shi)常(chang)出(chu)現(xian)壓(ya)力(li)的(de)變(bian)化(hua)。例(li)如(ru)甲(jia)醇(chun)和(he)水(shui)粘(zhan)度(du)都(dou)較(jiao)小(xiao)，當(dang)二(er)者(zhe)以(yi)相(xiang)近(jin)比(bi)例(li)混(hun)合(he)時(shi)粘(zhan)度(du)增(zeng)大(da)很(hen)多(duo)，此(ci)時(shi)的(de)柱(zhu)壓(ya)大(da)約(yue)是(shi)甲(jia)醇(chun)或(huo)水(shui)為(wei)流(liu)動(dong)相(xiang)時(shi)的(de)兩(liang)倍(bei)。因(yin)此(ci)要(yao)注(zhu)意(yi)防(fang)止(zhi)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)壓(ya)力(li)超(chao)過(guo)輸(shu)液(ye)泵(beng)或(huo)色(se)譜(pu)柱(zhu)能(neng)承(cheng)受(shou)的(de)最(zui)大(da)壓(ya)力(li)。
08
【六通閥的正確使用和維護】
①樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。
②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。
③為防止緩衝鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結束後應衝洗進樣閥。通常可用水衝洗，或先用能溶解樣品的溶劑衝洗，再用水衝洗。
09
【色譜柱的使用和維護】
色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。
10
【調節流速太快】
避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。
11
【反衝色譜柱】
一般說來色譜柱不能反衝，隻有生產者指明該柱可以反衝時，才可以反衝除去留在柱頭的雜質。否則反衝會迅速降低柱效。
12
【預柱和保護柱】
選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以(yi)避(bi)免(mian)固(gu)定(ding)相(xiang)被(bei)破(po)壞(huai)。有(you)時(shi)可(ke)以(yi)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)前(qian)麵(mian)連(lian)接(jie)一(yi)預(yu)柱(zhu)，分(fen)析(xi)柱(zhu)是(shi)鍵(jian)合(he)矽(gui)膠(jiao)時(shi)，預(yu)柱(zhu)為(wei)矽(gui)膠(jiao)，可(ke)使(shi)流(liu)動(dong)相(xiang)在(zai)進(jin)入(ru)分(fen)析(xi)柱(zhu)之(zhi)前(qian)預(yu)先(xian)被(bei)矽(gui)膠(jiao)“飽和”，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。
bimianjiangjizhifuzadeyangpinyouqishishengwuyangpinzhijiezhuruzhunei，xuyaoduiyangpinjinxingyuchulihuozhezaijinyangqihesepuzhuzhijianlianjieyibaohuzhu。baohuzhuyibanshitianyouxiangsigudingxiangdeduanzhu。baohuzhukeyierqieyinggaijingchanggenghuan。
四大關鍵因素需要注意
1、液相色譜儀本身
duiyuyiqibenshenyibanbuhuiyouwenti，tebieshigangmaihuilaidexinyiqi。duiyuyiqibenshenzuizhongyaodejiushiyiqidexiaoyan，gangmaihuilaideyiqiyibandoushiyoumaijiaxianduiyiqizuoxitongdequerengongzuo（包括IQ、PQ、OQ），確que認ren順shun利li通tong過guo後hou，再zai請qing國guo家jia或huo省sheng級ji儀yi器qi檢jian定ding局ju的de來lai校xiao驗yan，檢jian定ding合he格ge後hou就jiu可ke以yi放fang心xin使shi用yong了le，除chu此ci之zhi外wai，一yi些xie做zuo得de好hao的de公gong司si每mei半ban年nian會hui對dui儀yi器qi進jin行xing一yi次ci的de內nei部bu校xiao驗yan，目mu的de就jiu是shi為wei了le保bao證zheng儀yi器qi的de正zheng常chang可ke運yun行xing狀zhuang態tai。
2、色譜條件
色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。流動相就涉及到配製流動相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大於18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的幹擾。
色se譜pu柱zhu會hui因yin不bu同tong的de品pin種zhong而er有you不bu同tong的de要yao求qiu，但dan每mei根gen色se譜pu柱zhu都dou有you它ta的de清qing洗xi要yao求qiu，這zhe個ge在zai色se譜pu柱zhu說shuo明ming書shu上shang都dou可ke以yi找zhao到dao，一yi定ding要yao根gen據ju上shang麵mian的de要yao求qiu進jin行xing，否fou則ze會hui造zao成cheng色se譜pu柱zhu效xiao下xia降jiang和he色se譜pu柱zhu的de使shi用yong壽shou命ming縮suo短duan，檢jian測ce波bo長chang也ye會hui因yin品pin種zhong的de不bu同tong有you不bu同tong的de要yao求qiu。這zhe裏li需xu要yao指zhi出chu的de是shi要yao注zhu意yi觀guan察cha檢jian測ce器qi氘dao燈deng能neng量liang的de變bian化hua，比bi如ru基ji線xian波bo動dong大da，活huo性xing成cheng分fen的de響xiang應ying值zhi突tu然ran變bian小xiao等deng，都dou有you可ke能neng是shi氘dao燈deng的de能neng量liang不bu足zu所suo引yin起qi的de，氘dao燈deng一yi般ban建jian議yi使shi用yong800小時，但實際上使用時間不止，可根據實際情況更換。
流速也因品種的不同而不同，一般為1.0ml/min，流速是不可隨意改動的，特別是作為QC人(ren)員(yuan)，但(dan)是(shi)作(zuo)為(wei)研(yan)發(fa)人(ren)員(yuan)，有(you)時(shi)為(wei)了(le)摸(mo)索(suo)條(tiao)件(jian)或(huo)進(jin)行(xing)方(fang)法(fa)耐(nai)用(yong)性(xing)驗(yan)證(zheng)，會(hui)對(dui)流(liu)速(su)進(jin)行(xing)改(gai)變(bian)以(yi)評(ping)價(jia)方(fang)法(fa)的(de)適(shi)用(yong)性(xing)。對(dui)於(yu)進(jin)樣(yang)量(liang)因(yin)不(bu)同(tong)的(de)品(pin)種(zhong)也(ye)有(you)不(bu)同(tong)規(gui)定(ding)，進(jin)樣(yang)量(liang)這(zhe)塊(kuai)現(xian)在(zai)都(dou)使(shi)用(yong)自(zi)動(dong)進(jin)樣(yang)，所(suo)以(yi)進(jin)樣(yang)精(jing)密(mi)度(du)都(dou)很(hen)好(hao)，不(bu)需(xu)強(qiang)調(tiao)什(shen)麼(me)。
3、操作人員
首(shou)先(xian)，作(zuo)為(wei)液(ye)相(xiang)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)，一(yi)定(ding)要(yao)認(ren)真(zhen)學(xue)習(xi)液(ye)相(xiang)的(de)說(shuo)明(ming)書(shu)，掌(zhang)握(wo)液(ye)相(xiang)硬(ying)件(jian)和(he)軟(ruan)件(jian)的(de)操(cao)作(zuo)，掌(zhang)握(wo)日(ri)常(chang)的(de)維(wei)護(hu)保(bao)養(yang)，掌(zhang)握(wo)最(zui)基(ji)礎(chu)故(gu)障(zhang)的(de)排(pai)除(chu)和(he)維(wei)修(xiu)。
yibanyexiangdecaozuoguichengyeshiyoucaozuorenyuanqicaode，suoyizhiyaoyangeanzhaocaozuoyaoqiujinxingcaozuo，yibanbuhuichuxianwenti。dangran啫lixuyaotebiezhichudeshiduiyuyexiangderichangweihubaoyanghenzhongyao，biruliudongxiangdeguolv、脫氣、泵密封墊的清洗、係統管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等，倘若不堅持，很容易導致色譜柱堵塞、係統壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費時間。
其次，操作人員在配製液相分析用樣品溶液時，最好由同一個人單獨完成，以免不必要的偶然誤差。
4、液相安裝環境
液相色譜儀應盡量安裝於水平、遠離振動、dianciganraodewuneidetaimianshang，youtiaojiandehuajinliangjiangyexiangshujuchulixitongfengekai，yigeshifangzhisepujixianzaoyinpianda，jixianbuwendeng，yigeshiweijianshaoduirentideweihai。
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