色譜柱在色譜儀分析係統中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護色譜柱尤為重要,使用不當就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從七個方麵簡單介紹液相色譜柱在使用過程中應當著重注意的問題。
1避免壓力和溫度的急劇變化
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,以保持色譜柱內填料的穩定性。
2避免直接改變溶劑的組成
zaixuyaogaibianjianceyangpinrongyezuchengshi,yingzhujiangaibianrongjidezucheng,tebieshifanxiangsepuzhong,buyingzhijiecongyoujirongjigaibianweiquanbushishui,fanzhiyiran。qiezaishiyongcixituonengliqiangde 洗脫液衝洗色譜柱時,對流路係統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ML。
3避免色譜柱反衝
一(yi)般(ban)來(lai)說(shuo)色(se)譜(pu)柱(zhu)不(bu)能(neng)反(fan)衝(chong),隻(zhi)有(you)色(se)譜(pu)柱(zhu)使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu)上(shang)標(biao)明(ming)該(gai)柱(zhu)可(ke)反(fan)衝(chong)才(cai)可(ke)以(yi)反(fan)衝(chong)除(chu)去(qu)留(liu)在(zai)柱(zhu)頭(tou)上(shang)的(de)雜(za)質(zhi)。否(fou)則(ze),反(fan)衝(chong)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)影(ying)響(xiang)是(shi)迅(xun)速(su)降(jiang)低(di)柱(zhu)效(xiao)。
4避免流動相使用不當而破壞固定相
選擇使用適宜的流動相(尤其是PH),以yi避bi免mian固gu定ding相xiang被bei破po壞huai。有you時shi可ke以yi在zai進jin樣yang器qi前qian麵mian連lian接jie一yi段duan預yu柱zhu,分fen析xi柱zhu是shi鍵jian合he矽gui膠jiao時shi,預yu柱zhu為wei矽gui膠jiao,可ke使shi流liu動dong相xiang在zai進jin入ru分fen析xi柱zhu之zhi前qian預yu先xian被bei矽gui膠jiao"飽和",避免分析柱中的矽膠基質被溶解。
5禁止樣品未經處理直接進入色譜柱
避bi免mian將jiang基ji質zhi複fu雜za的de樣yang品pin尤you其qi是shi生sheng物wu樣yang品pin直zhi接jie注zhu入ru柱zhu內nei,需xu要yao對dui樣yang品pin進jin行xing預yu處chu理li或huo者zhe在zai進jin樣yang器qi和he色se譜pu柱zhu之zhi間jian連lian接jie一yi保bao護hu柱zhu。保bao護hu柱zhu一yi般ban是shi填tian有you相xiang似si固gu定ding相xiang的de短duan柱zhu。保bao護hu柱zhu可ke以yi而er且qie應ying該gai經jing常chang更geng換huan。
6禁止將緩衝溶液長時間存放在色譜柱內
保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發幹燥。絕對禁止將緩衝溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。
7禁止色譜柱未經處理直接封存
色譜柱使用完成之後須使用相宜溶劑進行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇衝洗至基線平衡;當采用鹽緩衝溶液作流動相時,使用完後應用無鹽流動相衝洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道,不宜長期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經常使用,應每隔4-5天開機衝洗15分鍾。
文章(文字)來源:分析與GMP
手機版




