液相色譜總有氣泡怎麼辦?總結起來可以分類7種原因,這裏整理了7種故障原因及解決方法,一旦遇到這些故障可以對照進行解決。
情況一:
溶劑混合時,由於兩種液體熱力學體積的變化,會產生氣泡;混合時放熱或者吸熱易產生氣泡,比如:甲jia醇chun和he水shui混hun合he屬shu於yu放fang熱re,乙yi腈jing和he水shui混hun合he屬shu於yu吸xi熱re。通tong常chang用yong量liang筒tong混hun合he後hou明ming顯xian看kan到dao體ti積ji的de增zeng減jian,而er且qie有you許xu多duo小xiao氣qi泡pao產chan生sheng,掛gua在zai瓶ping壁bi上shang,或huo者zhe晃huang一yi下xia可ke以yi看kan到dao許xu多duo小xiao氣qi泡pao存cun在zai液ye體ti中zhong。
解決辦法:對溶劑過濾,超聲脫氣(常用),尤(you)其(qi)是(shi)乙(yi)腈(jing)和(he)水(shui)混(hun)合(he)後(hou),超(chao)聲(sheng)脫(tuo)氣(qi)時(shi)間(jian)要(yao)長(chang)一(yi)些(xie),也(ye)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)其(qi)他(ta)方(fang)法(fa)脫(tuo)氣(qi),例(li)如(ru)安(an)裝(zhuang)在(zai)線(xian)脫(tuo)氣(qi)機(ji),充(chong)氮(dan)脫(tuo)氣(qi)等(deng)。處(chu)理(li)好(hao)的(de)液(ye)體(ti)在(zai)使(shi)用(yong)過(guo)程(cheng)中(zhong)應(ying)該(gai)保(bao)持(chi)室(shi)內(nei)溫(wen)度(du)恒(heng)定(ding)。
情況二:
溶(rong)劑(ji)濾(lv)頭(tou)汙(wu)染(ran),導(dao)致(zhi)泵(beng)在(zai)吸(xi)液(ye)過(guo)程(cheng)中(zhong)吸(xi)力(li)不(bu)均(jun)勻(yun)而(er)強(qiang)製(zhi)吸(xi)液(ye)從(cong)而(er)產(chan)生(sheng)微(wei)小(xiao)的(de)真(zhen)空(kong)氣(qi)泡(pao)。此(ci)時(shi)會(hui)觀(guan)察(cha)到(dao)進(jin)液(ye)管(guan)壁(bi)上(shang)分(fen)布(bu)許(xu)多(duo)很(hen)小(xiao)的(de)氣(qi)泡(pao),有(you)的(de)在(zai)動(dong)有(you)的(de)停(ting)留(liu)在(zai)管(guan)壁(bi)上(shang),或(huo)者(zhe)感(gan)覺(jiao)流(liu)速(su)比(bi)設(she)定(ding)值(zhi)小(xiao),壓(ya)力(li)也(ye)不(bu)穩(wen)。
解決辦法:先觀察現象確認,再排除。用5%-10%的稀硝酸浸泡過夜(怕超聲的濾頭)或者超聲處理數小時(可以超聲的濾頭),然(ran)後(hou)用(yong)純(chun)水(shui)浸(jin)泡(pao)過(guo)夜(ye)或(huo)者(zhe)超(chao)聲(sheng)處(chu)理(li),注(zhu)意(yi)換(huan)水(shui)多(duo)處(chu)理(li)幾(ji)次(ci),洗(xi)掉(diao)酸(suan)的(de)殘(can)留(liu),最(zui)後(hou)用(yong)有(you)機(ji)相(xiang)甲(jia)醇(chun)浸(jin)泡(pao)處(chu)理(li)或(huo)者(zhe)超(chao)聲(sheng)即(ji)可(ke)。若(ruo)上(shang)述(shu)處(chu)理(li)未(wei)果(guo),需(xu)更(geng)換(huan)新(xin)的(de)溶(rong)劑(ji)濾(lv)頭(tou)。
情況三:
流動相放好後,沒有排氣,就開始運行泵,易產生氣泡。
解決辦法:放好流動相後,打開旁通閥,用注射器慢慢吸液,觀察進液管無氣泡後再吸10ml將流路中的空氣驅趕幹淨,旋緊旁通閥後再運行泵,或者是打開旁通閥大流速排液,觀察進液管無氣泡後,再排氣2min將流路中的空氣驅趕幹淨,旋緊旁通閥後再運行泵。
情況四:
單向閥或者泵頭內部汙染。(泵的壓力波動一般在100psi以上就要考慮了)泵(beng)頭(tou)是(shi)壓(ya)力(li)變(bian)化(hua)最(zui)劇(ju)烈(lie)的(de)地(di)方(fang),也(ye)是(shi)最(zui)易(yi)產(chan)生(sheng)氣(qi)泡(pao)的(de)地(di)方(fang),泵(beng)頭(tou)靠(kao)負(fu)壓(ya)而(er)吸(xi)液(ye),而(er)負(fu)壓(ya)必(bi)然(ran)使(shi)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)的(de)小(xiao)氣(qi)泡(pao)長(chang)大(da),當(dang)泵(beng)腔(qiang)變(bian)正(zheng)壓(ya)時(shi),已(yi)長(chang)大(da)的(de)氣(qi)泡(pao)未(wei)必(bi)能(neng)全(quan)部(bu)變(bian)小(xiao)流(liu)入(ru)後(hou)續(xu)液(ye)路(lu),則(ze)泵(beng)腔(qiang)內(nei)將(jiang)積(ji)存(cun)氣(qi)泡(pao),從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)吸(xi)液(ye)精(jing)度(du)。
解決辦法:小(xiao)心(xin)拆(chai)下(xia)泵(beng)頭(tou),用(yong)甲(jia)醇(chun)超(chao)聲(sheng)清(qing)洗(xi)單(dan)向(xiang)閥(fa)以(yi)及(ji)內(nei)部(bu)密(mi)封(feng)圈(quan)和(he)泵(beng)頭(tou)整(zheng)體(ti),用(yong)棉(mian)花(hua)沾(zhan)甲(jia)醇(chun)擦(ca)拭(shi)柱(zhu)塞(sai)杆(gan)。必(bi)要(yao)時(shi)更(geng)換(huan)單(dan)向(xiang)閥(fa),密(mi)封(feng)圈(quan),柱(zhu)塞(sai)杆(gan)等(deng)。
情況五:
進樣時帶入氣泡,吸樣時帶到進樣針中氣泡。
解決辦法:在進樣前,注意排出進樣針裏的空氣,將進樣針頭垂直向上,用手指墊上濾紙摁住針頭處,往上推,氣泡很容易就上去了,排出即可。
情況六:
色譜柱進氣泡。
解決辦法:用純甲醇低流速(0.2-0.3ml/min)長時間衝洗反相色譜柱,隨後可逐步加大流速,最大加到1ml/min,直至色譜柱壓力穩定。或者更換色譜柱。
情況七:
流(liu)通(tong)池(chi)是(shi)易(yi)積(ji)存(cun)氣(qi)泡(pao)的(de)地(di)方(fang),其(qi)對(dui)基(ji)線(xian)影(ying)響(xiang)較(jiao)大(da),流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)入(ru)色(se)譜(pu)柱(zhu)後(hou),壓(ya)力(li)越(yue)來(lai)越(yue)小(xiao),微(wei)小(xiao)氣(qi)泡(pao)將(jiang)逐(zhu)漸(jian)長(chang)大(da),而(er)流(liu)通(tong)池(chi)截(jie)麵(mian)積(ji)相(xiang)對(dui)較(jiao)大(da),則(ze)氣(qi)泡(pao)在(zai)池(chi)內(nei)易(yi)長(chang)大(da),在(zai)無(wu)外(wai)壓(ya)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia),很(hen)難(nan)縮(suo)小(xiao)到(dao)管(guan)路(lu)內(nei)徑(jing)以(yi)下(xia)流(liu)出(chu)流(liu)通(tong)池(chi),從(cong)而(er)存(cun)在(zai)了(le)池(chi)內(nei),導(dao)致(zhi)基(ji)線(xian)很(hen)亂(luan)。
解決辦法:在廢液出口處加反壓調節器(壓力一般在150psi左右),為流通池提供一個背壓;其次是用手指堵廢液管出液端,眼看泵柱壓上升(約2-3s),鬆song開kai,且qie同tong時shi看kan檢jian測ce器qi顯xian示shi屏ping上shang吸xi光guang度du值zhi的de變bian化hua。如ru果guo池chi內nei有you氣qi泡pao,則ze手shou指zhi堵du廢fei液ye管guan,吸xi光guang度du值zhi將jiang劇ju烈lie變bian化hua,當dang手shou鬆song開kai後hou吸xi光guang度du值zhi再zai次ci大da步bu上shang升sheng,證zheng明ming池chi內nei有you氣qi泡pao但dan沒mei有you排pai掉diao,當dang手shou指zhi堵du住zhu和he鬆song開kai廢fei液ye管guan時shi,吸xi光guang度du值zhi基ji本ben不bu變bian時shi,證zheng明ming排pai汽qi泡pao成cheng功gong,再zai觀guan察cha基ji線xian將jiang穩wen定ding(此過程需要重複10-20次)。
液相色譜係統存有氣泡的原因不止7種,如果發生存在氣泡的情況,不妨先分析這7種原因,如還是不能解決可以聯係儀器設備的售後工程師協助解決。
文章(文字)來源:網絡。
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