高壓蒸汽滅菌器滅菌效果驗證一般有化學指示劑法、留點溫度計法、自製測溫管法和生物指示劑法，每(mei)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)原(yuan)理(li)都(dou)是(shi)相(xiang)似(si)的(de)
，主(zhu)要(yao)是(shi)通(tong)過(guo)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)時(shi)滅(mie)菌(jun)器(qi)裏(li)的(de)溫(wen)度(du)能(neng)否(fou)達(da)到(dao)要(yao)求(qiu)。我(wo)們(men)可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)選(xuan)擇(ze)其(qi)中(zhong)一(yi)種(zhong)或(huo)多(duo)種(zhong)方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)驗(yan)證(zheng)。

一、化學指示劑法

原理：化學指示劑在一定溫度與作用時間下，會受熱變色或變形，根據這一特點來判斷是否達到需要的滅菌參數。

一般實驗室常用的是3M壓ya力li滅mie菌jun指zhi示shi膠jiao帶dai，這zhe種zhong指zhi示shi膠jiao帶dai是shi利li用yong滅mie菌jun前qian後hou膠jiao帶dai顏yan色se變bian化hua來lai判pan斷duan滅mie菌jun效xiao果guo。它ta是shi由you熱re敏min化hua學xue物wu質zhi與yu顯xian色se劑ji及ji漆qi輔fu料liao製zhi成cheng油you墨mo
，並bing將jiang油you墨mo以yi條tiao紋wen狀zhuang印yin製zhi在zai特te製zhi的de一yi麵mian膠jiao紙zhi帶dai製zhi成cheng。指zhi示shi膠jiao帶dai可ke以yi直zhi接jie粘zhan貼tie於yu包bao裹guo外wai，長chang度du不bu低di於yu5cm，並輕壓膠帶以增加粘性和封包效果；在121℃持續20min或130℃持續4min後，膠帶上印有的斜行的白色指示線條會完全變黑，成為黑色線條；如變色不均勻或不徹底，可認為該包裹不符合滅菌條件。

二、留點溫度計法

原理：留點溫度計法是利用水銀溫度計不回流的特性
，其原理跟傳統體溫計相似，可以指示滅菌器在滅菌過程中達到的最高溫度。

yanzhengshibashuiyinwendujifangzaishengshuidedasanjiaopingli，miejunshibasanjiaopingfangzaimiejunqideshangbuhexiabu
，miejunjieshuhoukanshuiyinwendujidewenduheyaoqiuwendushifouyizhi。此法隻能驗證溫度
，不能指示滅菌時間是否達到要求
，因此是滅菌器驗證的最低標準。

三、自製測溫管法

原理：利li用yong一yi些xie化hua學xue藥yao品pin受shou熱re熔rong化hua後hou再zai冷leng卻que
，晶jing體ti的de外wai形xing不bu同tong的de特te性xing

，把ba化hua學xue藥yao品pin密mi封feng在zai小xiao玻bo璃li管guan內nei，滅mie菌jun時shi放fang在zai滅mie菌jun器qi裏li，滅mie菌jun完wan後hou觀guan察cha晶jing體ti的de形xing狀zhuang
，就jiu可ke以yi判pan斷duan溫wen度du是shi否fou達da標biao。

常用的試劑是苯甲酸
，苯甲酸的熔點為121-123℃
，跟(gen)我(wo)們(men)要(yao)求(qiu)的(de)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)滅(mie)菌(jun)溫(wen)度(du)基(ji)本(ben)吻(wen)合(he)
，因(yin)此(ci)滅(mie)菌(jun)時(shi)把(ba)固(gu)體(ti)苯(ben)甲(jia)酸(suan)密(mi)封(feng)在(zai)小(xiao)玻(bo)璃(li)管(guan)內(nei)放(fang)進(jin)滅(mie)菌(jun)器(qi)，滅(mie)菌(jun)結(jie)束(shu)就(jiu)可(ke)以(yi)觀(guan)察(cha)苯(ben)甲(jia)酸(suan)的(de)狀(zhuang)態(tai)來(lai)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)器(qi)是(shi)否(fou)達(da)到(dao)了(le)要(yao)求(qiu)溫(wen)度(du)。這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)局(ju)限(xian)跟(gen)留(liu)點(dian)溫(wen)度(du)計(ji)法(fa)相(xiang)同(tong)，也(ye)隻能指示滅菌時的溫度，對滅菌時間是否達到要求無法判斷。

四、生物指示劑法

原理：利(li)用(yong)非(fei)致(zhi)病(bing)性(xing)的(de)嗜(shi)熱(re)脂(zhi)肪(fang)杆(gan)菌(jun)的(de)芽(ya)孢(bao)作(zuo)為(wei)指(zhi)示(shi)菌(jun)，來(lai)測(ce)定(ding)熱(re)力(li)滅(mie)菌(jun)的(de)效(xiao)果(guo)。嗜(shi)熱(re)脂(zhi)肪(fang)杆(gan)菌(jun)的(de)芽(ya)孢(bao)對(dui)熱(re)的(de)抗(kang)性(xing)較(jiao)強(qiang)
，其(qi)耐(nai)熱(re)能(neng)力(li)與(yu)病(bing)原(yuan)微(wei)生(sheng)物(wu)肉(rou)毒(du)梭(suo)菌(jun)芽(ya)孢(bao)相(xiang)似(si)，以(yi)此(ci)為(wei)指(zhi)示(shi)菌(jun)
，驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)器(qi)能(neng)否(fou)達(da)到(dao)滅(mie)菌(jun)要(yao)求(qiu)。

生物指示劑分為三種：芽孢懸液
、芽胞菌片、菌片和培養基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點：下層的前、中、後和上層
、中層的中央點。滅菌後取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白腖水中，55-60℃培養2-7天
，若培養基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好
；如果培養基黃色渾濁

，說明芽孢未被殺滅

，滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。

目(mu)前(qian)實(shi)驗(yan)室(shi)還(hai)常(chang)用(yong)商(shang)品(pin)化(hua)的(de)生(sheng)物(wu)指(zhi)示(shi)管(guan)，其(qi)原(yuan)理(li)與(yu)芽(ya)孢(bao)懸(xuan)液(ye)和(he)芽(ya)胞(bao)菌(jun)片(pian)相(xiang)同(tong)，指(zhi)示(shi)管(guan)中(zhong)有(you)嗜(shi)熱(re)脂(zhi)肪(fang)芽(ya)孢(bao)杆(gan)菌(jun)芽(ya)孢(bao)和(he)培(pei)養(yang)液(ye)玻(bo)璃(li)小(xiao)管(guan)，將(jiang)指(zhi)示(shi)管(guan)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)容(rong)器(qi)內(nei)的(de)各(ge)個(ge)點(dian)上(shang)，高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)後(hou)
，將(jiang)管(guan)中(zhong)盛(sheng)培(pei)養(yang)液(ye)的(de)玻(bo)璃(li)管(guan)擠(ji)碎(sui)

，培(pei)養(yang)液(ye)從(cong)內(nei)部(bu)的(de)小(xiao)管(guan)中(zhong)被(bei)放(fang)出(chu)，放(fang)入(ru)56℃培養箱中培養
，同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格，指示管內的芽孢複活後生長會改變肉湯的顏色是肉湯變為黃色；若是滅菌器滅菌效果良好則管內芽孢被滅活不再生長，肉湯仍舊是原來的紫色。

對dui於yu滅mie菌jun器qi的de效xiao果guo驗yan證zheng
，目mu前qian並bing沒mei有you相xiang關guan標biao準zhun嚴yan格ge的de要yao求qiu驗yan證zheng的de頻pin次ci
，但dan是shi實shi驗yan室shi應ying當dang自zi行xing製zhi定ding驗yan證zheng頻pin次ci規gui定ding，並bing嚴yan格ge按an照zhao要yao求qiu進jin行xing。從cong操cao作zuo性xing和he驗yan證zheng結jie論lun兩liang個ge方fang麵mian出chu發fa，小xiao編bian推tui薦jian使shi用yong指zhi示shi膠jiao帶dai和he生sheng物wu指zhi示shi管guan，因yin為wei這zhe兩liang種zhong方fang法fa操cao作zuo簡jian單dan
，可ke以yi對dui滅mie菌jun效xiao果guo進jin行xing全quan麵mian的de驗yan證zheng。