細菌的接種方法有很多種,如劃線法、塗布法、傾注法、斜麵接種法、液體培養基接種法、螺旋接種法等,其方法和應用各有不同,下麵就這幾種方法進行解釋以幫助實驗人員選擇操作。
劃線法
此法主要用於菌種分純,獲得單菌落.
由接種環沾取少許待分離的材料,在無菌平板表麵進行平行劃線、扇(shan)形(xing)劃(hua)線(xian)或(huo)其(qi)他(ta)形(xing)式(shi)的(de)連(lian)續(xu)劃(hua)線(xian),微(wei)生(sheng)物(wu)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)將(jiang)隨(sui)著(zhe)劃(hua)線(xian)次(ci)數(shu)的(de)增(zeng)加(jia)而(er)減(jian)少(shao),並(bing)逐(zhu)步(bu)分(fen)散(san)開(kai)來(lai),如(ru)果(guo)劃(hua)線(xian)適(shi)宜(yi)的(de)話(hua),微(wei)生(sheng)物(wu)能(neng)一(yi)一(yi)分(fen)散(san),經(jing)培(pei)養(yang)後(hou),可(ke)在(zai)平(ping)板(ban)表(biao)麵(mian)得(de)到(dao)單(dan)菌(jun)落(luo)。
優點:可以觀察菌落特征,對混合菌進行分離。
缺點:不能用於菌落計數。
塗布法
此法主要用於菌落總數計數.
先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中,然後用無菌吸管吸取0.1ml 菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L 型玻璃棒將菌液在平板上塗抹均勻,將塗抹好的平板平放於桌上20~30min,使菌液滲透入培養基內,然後將平板倒轉,保溫培養,至長出菌落後即可計數。
優點:可以計數,可以觀察菌落特征。
缺點:接種前需梯度稀釋,吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。
傾注法
此法主要用於菌落總數的計數.
吸取1ml 菌液加入平板中,倒入已融化並冷卻至45~50℃的細菌培養基,輕輕轉動平板,使菌液與培養基混合均勻,冷疑後倒置,適溫培養。至長出菌落後即可計數。
優點:可以計數,較方便。
缺點:接種前需梯度稀釋,不能觀察菌落特征,不適用於嚴格好氧菌和熱敏感菌。
斜麵接種法
此法主要用於保存菌種,或觀察細菌的某些生化特性和動力.
用(yong)接(jie)種(zhong)環(huan)或(huo)接(jie)種(zhong)針(zhen)伸(shen)入(ru)菌(jun)種(zhong)管(guan)內(nei),挑(tiao)取(qu)用(yong)來(lai)移(yi)種(zhong)的(de)菌(jun)落(luo)。伸(shen)入(ru)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)管(guan)內(nei),先(xian)從(cong)斜(xie)麵(mian)底(di)部(bu)到(dao)頂(ding)端(duan)拖(tuo)一(yi)條(tiao)接(jie)種(zhong)線(xian),再(zai)自(zi)下(xia)而(er)上(shang)蜿(wan)蜒(yan)劃(hua)線(xian),或(huo)直(zhi)接(jie)自(zi)下(xia)而(er)上(shang)地(di)蜿(wan)蜒(yan)劃(hua)線(xian)。接(jie)種(zhong)完(wan)成(cheng)之(zhi)後(hou),用(yong)火(huo)焰(yan)滅(mie)菌(jun)培(pei)養(yang)管(guan)口(kou),並(bing)塞(sai)上(shang)棉(mian)塞(sai),置(zhi)於(yu)37℃培養。
液體培養基接種法
此法主要用於菌液比濁實驗
用滅菌接種環挑取菌落或標本,在試管內壁與液麵交界處輕輕研磨,使細菌均勻得散落在液體培養基中。
螺旋接種法
此法主要用於菌落總數計數
可(ke)以(yi)在(zai)無(wu)任(ren)何(he)全(quan)部(bu)或(huo)中(zhong)間(jian)稀(xi)釋(shi)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)快(kuai)速(su)細(xi)菌(jun)接(jie)種(zhong)。對(dui)數(shu)減(jian)少(shao)的(de)樣(yang)品(pin)容(rong)量(liang)以(yi)阿(e)基(ji)米(mi)德(de)螺(luo)旋(xuan)線(xian)的(de)形(xing)式(shi)被(bei)自(zi)動(dong)分(fen)注(zhu)在(zai)旋(xuan)轉(zhuan)式(shi)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian)。培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)每(mei)一(yi)點(dian)的(de)容(rong)量(liang)可(ke)以(yi)被(bei)知(zhi)曉(xiao)和(he)校(xiao)準(zhun)。菌(jun)液(ye)的(de)濃(nong)度(du)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)培(pei)養(yang)皿(min)上(shang)一(yi)定(ding)區(qu)域(yu)的(de)菌(jun)落(luo)數(shu)量(liang)除(chu)以(yi)同(tong)區(qu)域(yu)樣(yang)品(pin)分(fen)注(zhu)量(liang)來(lai)計(ji)算(suan)。
優點:螺旋接種法菌液無需稀釋(其他接種方法均需經過梯度稀釋才能計菌落數),自動化接種,效率高,可節省3/4 的耗材和時間。
缺點:產品成本高,適用於樣品量比較大的實驗。
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