1.配製溶液

向容器內加入所需水量的一部分
，按照培養基的配方

，稱取各種原料，依次加入使其溶解，最後補足所需水分
，對蛋白腖、肉膏等物質，需加熱溶解，加熱過程所蒸發的水分
，應在全部原料溶解後加水補足。

配製固體培養基時，先將上述已配好的液體培養基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續加熱至完全融化
，.並不斷攪拌
，以免瓊脂糊底燒焦。

2.調節pH值

用pH試紙(或pH電位計、氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進行調節
，直到調節到配方要求的pH值為止。

3.過濾

用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養基過濾。用紗布過濾時，最好折疊成六層
，用濾紙過濾時
，可將濾紙折疊成瓦棱形
，鋪在漏鬥上過濾。

4.分裝

已過濾的培養基應進行分裝。如果要製作斜麵培養基，須將培養基分裝於試管中。如果要製作平板培養基或液體、半(ban)固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，則(ze)須(xu)將(jiang)培(pei)養(yang)基(ji)分(fen)裝(zhuang)於(yu)錐(zhui)形(xing)瓶(ping)內(nei)。分(fen)裝(zhuang)時(shi)，一(yi)手(shou)捏(nie)鬆(song)彈(dan)簧(huang)夾(jia)

，使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)流(liu)出(chu)，另(ling)一(yi)隻(zhi)手(shou)握(wo)住(zhu)幾(ji)支(zhi)試(shi)管(guan)或(huo)錐(zhui)形(xing)瓶(ping)，依(yi)次(ci)接(jie)取(qu)培(pei)養(yang)基(ji)。分(fen)裝(zhuang)時(shi)
，注(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)粘(zhan)附(fu)管(guan)口(kou)或(huo)瓶(ping)口(kou)，以(yi)免(mian)浸(jin)濕(shi)棉(mian)塞(sai)引(yin)起(qi)雜(za)菌(jun)汙(wu)染(ran)。裝(zhuang)入(ru)試(shi)管(guan)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)量(liang)，視(shi)試(shi)管(guan)和(he)錐(zhui)形(xing)瓶(ping)的(de)大(da)小(xiao)及(ji)需(xu)要(yao)而(er)定(ding)。一(yi)般(ban)製(zhi)作(zuo)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)基(ji)時(shi)，每(mei)隻(zhi)15×150毫米的試管
，約裝3-4毫升(1/4-1/3試管高度)
，如製作深層培養基，每隻20×220毫米的試管約裝12-15毫升。每隻錐形瓶裝入的培養基
，一般以其容積的一半為宜。

5.加棉塞

分裝完畢後


，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免汙染。棉塞應采用普通新鮮、幹(gan)燥(zao)的(de)棉(mian)花(hua)製(zhi)作(zuo)，不(bu)要(yao)用(yong)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)

，以(yi)免(mian)因(yin)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)吸(xi)水(shui)使(shi)棉(mian)塞(sai)無(wu)法(fa)使(shi)用(yong)。製(zhi)作(zuo)棉(mian)塞(sai)時(shi)，要(yao)根(gen)據(ju)棉(mian)塞(sai)大(da)小(xiao)將(jiang)棉(mian)花(hua)鋪(pu)展(zhan)成(cheng)適(shi)當(dang)厚(hou)度(du)
，揪(jiu)取(qu)手(shou)掌(zhang)心(xin)大(da)小(xiao)一(yi)塊(kuai)
，鋪(pu)在(zai)左(zuo)手(shou)拇(mu)指(zhi)與(yu)食(shi)指(zhi)圈(quan)成(cheng)的(de)圓(yuan)孔(kong)中(zhong)，用(yong)右(you)手(shou)食(shi)指(zhi)插(cha)入(ru)棉(mian)花(hua)中(zhong)部(bu)
，同(tong)時(shi)左(zuo)手(shou)食(shi)指(zhi)與(yu)姆(mu)指(zhi)稍(shao)稍(shao)緊(jin)握(wo)
，就(jiu)會(hui)形(xing)成(cheng)1gechangbangxingdemiansai。miansaizuochenghou，yingxunsusairuguankouhuopingkouzhong，miansaiyingjintieneibibuliufengxi
，yifangkongqizhongweishengwuyanzhouzheqinru。miansaibuyaoguojinguosong
，saihaohou,

，以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內，上端露出少許棉花便於拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆劄，準備滅菌。

6.製作斜麵培養基和平板培養基

培養基滅菌後
，如製作斜麵培養基和平板培養基，須趁培養基未凝固時進行。

(1)製作斜麵培養基。在實驗台上放1支長0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右
，將試管頭部枕在木條上，使管內培養基自然傾斜，凝固後即成斜麵培養基。

(2)製zhi作zuo平ping板ban培pei養yang基ji。將jiang剛gang剛gang滅mie過guo菌jun的de盛sheng有you培pei養yang基ji的de錐zhui形xing瓶ping和he培pei養yang皿min放fang在zai實shi驗yan台tai上shang，點dian燃ran酒jiu精jing燈deng
，右you手shou托tuo起qi錐zhui形xing瓶ping瓶ping底di
，左zuo手shou拔ba下xia棉mian塞sai，將jiang瓶ping口kou在zai酒jiu精jing燈deng上shang稍shao加jia灼zhuo燒shao，左zuo手shou打da開kai培pei養yang皿min蓋gai，右you手shou迅xun速su將jiang培pei養yang基ji倒dao入ru培pei養yang皿min中zhong，每mei皿min約yue倒dao入ru10毫升
，以鋪滿皿底為度。鋪放培養基後放置15分鍾左右，待培養基凝固後，再5個培養皿一疊
，倒置過來，平放在恒溫箱裏
，24小時後檢查，如培養基末長雜菌，即可用來培養微生物。