01
菌株保存的是第三代,-80℃保存, 再取出來活化的話屬於第幾代?
答:保bao存cun的de是shi第di三san代dai複fu活huo出chu來lai後hou,如ru果guo采cai用yong平ping板ban或huo肉rou湯tang活huo化hua相xiang當dang於yu轉zhuan接jie了le一yi代dai,就jiu是shi第di四si代dai,如ru果guo還hai在zai瓷ci珠zhu裏li的de話hua就jiu還hai是shi原yuan來lai的de代dai數shu。如ru果guo是shi保bao存cun在zai斜xie麵mian上shang,這zhe一yi支zhi斜xie麵mian一yi直zhi就jiu是shi第di三san代dai,如ru果guo轉zhuan接jie到dao另ling一yi支zhi斜xie麵mian就jiu是shi第di四si代dai。傳chuan代dai原yuan則ze,菌jun株zhu活huo化hua複fu蘇su不bu論lun以yi任ren何he形xing式shi繁fan殖zhi了le一yi次ci就jiu算suan是shi傳chuan了le一yi代dai。但dan如ru果guo僅jin是shi物wu理li位wei置zhi的de轉zhuan移yi沒mei有you繁fan殖zhi就jiu不bu是shi傳chuan代dai。
02
菌株傳代保存到瓷珠裏一定要挑單菌落嗎?
答:buyidingfeitiaodanjunluo,danshiyidingyaotiaoxiangtongtezhengdejunluo,jiushishuocongtongyigejunluochunhuachulaide,yibaozhengtamendetexingwanquanyizhi。yuanzeshijinliangduotiao,ningduowushao。
03
菌株冷凍保存是-70℃還是-80℃有具體標準規定麼?
答:有標準。《SN/T 2632-2010 微生物菌株常規保藏技術規程》是關於菌株保藏的一個標準,大家可以學習一下,各個保存方式都有介紹,但是瓷珠是比較新興的保存方式暫時裏麵還沒有收錄。GB4789.28-2013建議長期冷凍儲存是在不高於-70℃條件下。
04
怎樣延長菌株的保存時間呢?
答:大量的實驗證明菌株在低溫、幹燥、缺氧、缺營養的條件下保存效果是最好的,越接近這種保存條件,菌株的保存時間越長。例如甘油凍存管,在-80℃保存時間大於在-20℃。凍幹菌粉在-20℃保存時間會比2~8℃長。
05
怎樣純化菌株?
答:純化就是從可疑菌落平板上挑取單菌落再劃線到合適的非選擇性平板(如TSA、NA等)上,分離出單菌落的過程。
06
我們隻保存第一代菌株是不是要重新傳代保存呢,認證老師會不會認為這是個錯誤?
答:yibanqingkuangxiarenzhenglaoshibuhuitichuzhezhongwenti。zuijiachucunfangshiyinggaishi,zhibeidiyidaijunzhudeganyoudongcunguan,zhiyuchaodiwenbingxiangjinxingchangqibaocun。dierdaijunzhuzuoweigongzuochubeijunzhu,jinxingxiemianbaocun。shiyongdierdaigongzuochubeijunzhujinxingzhuanjiehouweidisandaigongzuojunzhu。
為何要將第三代作為工作菌株?
答:junzhuzaiduocichuandaihou,junzhudebianyigailvhuidadazengjia,yincijunzhuchuandaixukongzhizaiwudaiyinei,erdiyidaijunzhutongchangxiangduibuwending,xuchuanzhidisandaishijunzhuwending。yincishijigongzuozhongtongchangxuanzedisandaijunzhuzuoweigongzuojunzhu。
質控菌株是不是傳代超過五代就必須銷毀處理?
答:不一定。傳代超過五代隻是存在菌種變異可能,但如果傳代到第六代、第七代……經過形態、生化特性、DNA特征等驗證,性狀保持穩定,那麼這些五代後的菌還是可以正常使用。
09
菌種編號意義?
答:以金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003為例,CMCC為中國醫學菌種保藏中心縮寫,其它常見菌種保藏中心還包括ATCC(美國標準菌種收藏所)、CICC(工業微生物菌種保藏中心)、FSCC(食品安全菌種保藏中心);B的意思是細菌,對應還有F(真菌);26003為CMCC的保藏編號。
10
同樣是金黃色葡萄球菌ATCC6538與ATCC25923有什麼不同?
答:ATCC6538與ATCC25923均為來自美國標準菌種收藏所(ATCC)dejunzhu,butongdebianhaobiaomingzheliangzhuzuichushidefenlilaiyuanbutong。danbutongdebianhaodeshenghuatexingshifouyiyang,xuyaojinxingjutifenxi。biruzaishijishengwuxuejianyanzhongfaxianjinhuangseputaoqiujunATCC6538溶血能力較ATCC25923要強。
11
使用瓷珠保藏管保存菌株,加入菌液搖勻後為什麼要吸幹菌液?
答:瓷ci珠zhu保bao存cun的de原yuan理li為wei瓷ci珠zhu為wei多duo孔kong結jie構gou,細xi菌jun吸xi附fu在zai瓷ci珠zhu上shang,除chu去qu液ye體ti,則ze避bi免mian反fan複fu凍dong融rong時shi,液ye體ti冷leng凍dong過guo程cheng中zhong形xing成cheng的de冰bing晶jing損sun傷shang細xi菌jun,從cong而er達da到dao保bao護hu細xi菌jun的de作zuo用yong。如ru果guo不bu吸xi幹gan菌jun液ye的de話hua,那na麼me瓷ci珠zhu保bao存cun就jiu達da不bu到dao可ke以yi進jin行xing反fan複fu凍dong融rong的de效xiao果guo。
12
TSA斜麵一般多少度保存,可以放在冷藏裏嗎?
答:一般細菌的TSA斜麵,2-8℃保存,即冷藏,但弧菌、綠膿杆菌、嗜水氣單胞菌等對低溫較敏感菌株,短期置於室溫20-25℃保存,長期保存需使用甘油管或者瓷珠凍存。
複蘇凍幹菌株是否可以采用液體培養基?
答:keyi,danshiyongyetifusudehuazhinengguanchadaopeiyangjihunzhuo,wufaquedingshifouyouwuran。jianyishiyongpingbanpeiyangjifusudongganjunzhu,youzhuyujiandantongguorouyanguanchajunluoxingtaiyifenbianfusuchulaijunzhushifoucunzaiwuran,chubujiandingjunzhuchundu。
14
複蘇凍幹菌株是否可以采用顯色培養基?
答:bujianyicaiyongxiansepeiyangjifusudongganjunzhu。dongganjunzhuzaidongganguochengzhonghuishoudaoyidingdesunshang,fusuxuyaoyigezuishishengchanghuanjing,gufusupeiyangjibunengxuanyonghanyouyijunchengfenbuliyujunzhufusudezheleixuanzexingpeiyangji(顯色培養基屬於選擇性培養基)。
15
產氣莢膜梭菌做凍存時是否需要保持厭氧狀態?
答:不bu需xu要yao。產chan氣qi莢jia膜mo梭suo菌jun雖sui屬shu厭yan氧yang性xing細xi菌jun,但dan對dui厭yan氧yang程cheng度du要yao求qiu並bing不bu太tai嚴yan格ge,按an照zhao一yi般ban菌jun株zhu凍dong存cun方fang法fa進jin行xing凍dong存cun即ji可ke。如ru果guo是shi凍dong存cun嚴yan格ge厭yan氧yang菌jun,則ze需xu特te殊shu的de凍dong存cun方fang法fa。
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