下麵我們介紹一下環境中無菌或殺菌效果應如何檢查。

紫外燈在使用過程中輻射強度會逐漸降低，影響其殺菌效果
，故應該定期檢查。紫外燈的殺菌有效波長是253.7nm
，其強度可以用中心波長254nm的紫外線強度計測定。在沒有紫外線強度計的情況下可以采用生物學替代。

生物學測試簡要步驟如下：選用枯草芽孢杆菌ATCC 9372，製成106CFU/mL~108CFU/mL濃度的菌懸液
；選用經脫脂處理的0.5cm×1.0cm大小的布片或鋁片，高壓滅菌後用作載體
；每個載體上滴一滴製備好的菌懸液，幹燥後備用；將8個染菌載體放於無菌器皿中，置於紫外燈下1m~1.5m處，開啟紫外燈照射


，於0.5h

、1h、1.5h和2h各取出2個染菌載體
，分別投入盛有5mL緩衝蛋白腖水的洗脫液；係列稀釋後進行平板計數
；同法取8個染菌載體用做陽性對照
，操作除不經紫外此昂照射外與試驗組相同。

殺滅率=（陽性對照回收菌數-試驗組回收菌數）/陽性對照回收菌數×100%

殺滅率大於99.9%時
，認為紫外燈殺菌效果合格。

無菌室空氣質量檢查應按照采樣計劃
，根據情況對處於空態、靜(jing)態(tai)和(he)正(zheng)常(chang)運(yun)行(xing)的(de)風(feng)險(xian)區(qu)，使(shi)用(yong)適(shi)當(dang)的(de)儀(yi)器(qi)采(cai)集(ji)空(kong)氣(qi)中(zhong)微(wei)生(sheng)物(wu)
，測(ce)定(ding)並(bing)監(jian)控(kong)風(feng)險(xian)區(qu)空(kong)氣(qi)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)汙(wu)染(ran)。空(kong)氣(qi)懸(xuan)浮(fu)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)采(cai)樣(yang)和(he)計(ji)數(shu)方(fang)法(fa)多(duo)種(zhong)多(duo)樣(yang)，根(gen)據(ju)不(bu)同(tong)采(cai)樣(yang)目(mu)的(de)決(jue)定(ding)具(ju)體(ti)的(de)采(cai)樣(yang)方(fang)法(fa)和(he)采(cai)樣(yang)器(qi)。因(yin)采(cai)樣(yang)器(qi)的(de)采(cai)集(ji)效(xiao)率(lv)不(bu)同(tong)，應(ying)慎(shen)重(zhong)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)方(fang)法(fa)和(he)設(she)備(bei)。采(cai)樣(yang)器(qi)分(fen)為(wei)兩(liang)類(lei)：被動式采樣器，如落菌盤；主動式采樣器
，如過濾采樣器、撞擊采樣器、衝擊采樣器等。

落luo菌jun盤pan等deng被bei動dong式shi空kong氣qi微wei生sheng物wu采cai樣yang器qi不bu能neng測ce量liang空kong氣qi中zhong的de微wei生sheng物wu的de總zong數shu，而er是shi測ce量liang空kong氣qi中zhong微wei生sheng物wu在zai表biao麵mian的de沉chen降jiang率lv。隻zhi要yao確que定ding單dan位wei時shi間jian落luo菌jun盤pan上shang微wei生sheng物wu的de數shu量liang
，再zai根gen據ju落luo菌jun盤pan的de暴bao露lu麵mian積ji與yu暴bao露lu時shi間jian之zhi間jian的de關guan係xi
，即ji可ke大da致zhi計ji算suan出chu空kong氣qi中zhong微wei生sheng物wu的de數shu量liang。

麵積小於30m²的室內設一條對角線取3點，在其中心以及兩端距牆1m處各取1點
；麵積大於30m²的室內房間四麵距牆1m和中央各放置一個平皿，高度為實驗台高度。培養基平皿開蓋暴露10min，然後蓋上蓋子倒放
，培養48h，計數每個平皿上的菌落數。

日常監控時，可以設定可接受的菌落數限值。一般無菌室所有的取樣平皿上的細菌總數應小於15個。空氣質量良好的無菌室，通常每個平皿上生長的細菌不超過2個菌落數。

空(kong)氣(qi)采(cai)樣(yang)除(chu)了(le)自(zi)然(ran)沉(chen)降(jiang)法(fa)外(wai)
，還(hai)可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)專(zhuan)門(men)的(de)主(zhu)動(dong)式(shi)采(cai)樣(yang)器(qi)。主(zhu)動(dong)式(shi)采(cai)樣(yang)器(qi)可(ke)以(yi)評(ping)估(gu)風(feng)險(xian)區(qu)空(kong)氣(qi)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)特(te)征(zheng)。主(zhu)動(dong)式(shi)采(cai)樣(yang)器(qi)主(zhu)要(yao)包(bao)括(kuo)過(guo)濾(lv)采(cai)樣(yang)器(qi)、撞擊采樣器、衝擊采樣器等。

撞擊采樣器可以分為狹縫式采樣器、離li心xin式shi采cai樣yang器qi和he針zhen孔kong式shi采cai樣yang器qi。狹xia縫feng式shi采cai樣yang器qi由you附fu加jia的de真zhen空kong抽chou氣qi泵beng抽chou氣qi，通tong過guo采cai樣yang器qi的de縫feng隙xi式shi平ping板ban，將jiang采cai集ji的de空kong氣qi噴pen射she並bing撞zhuang擊ji到dao緩huan慢man旋xuan轉zhuan的de平ping板ban培pei養yang基ji表biao麵mian上shang
，附fu著zhe的de活huo微wei生sheng物wu粒li子zi經jing過guo培pei養yang後hou形xing成cheng菌jun落luo
，予yu以yi計ji數shu。離li心xin式shi采cai樣yang器qi由you於yu內nei部bu風feng機ji的de高gao速su旋xuan轉zhuan，氣qi流liu從cong采cai樣yang器qi前qian部bu吸xi入ru從cong後hou部bu流liu出chu，在zai離li心xin機ji的de作zuo用yong下xia
，空kong氣qi中zhong的de活huo微wei生sheng物wu粒li子zi有you足zu夠gou的de時shi間jian撞zhuang擊ji到dao專zhuan用yong的de固gu形xing培pei養yang條tiao上shang，經jing培pei養yang後hou形xing成cheng菌jun落luo
，予yu以yi計ji數shu。

過濾式空氣采樣器是最常用、最簡單的空氣采樣器。過濾式采樣器有采樣頭、濾器、流量計和抽氣泵組成。過濾式采樣器的結構如圖：

開(kai)動(dong)電(dian)機(ji)後(hou)
，抽(chou)氣(qi)泵(beng)工(gong)作(zuo)，帶(dai)動(dong)空(kong)氣(qi)吸(xi)入(ru)采(cai)樣(yang)頭(tou)，空(kong)氣(qi)通(tong)過(guo)濾(lv)器(qi)的(de)時(shi)候(hou)
，大(da)於(yu)濾(lv)膜(mo)孔(kong)徑(jing)的(de)顆(ke)粒(li)被(bei)阻(zu)留(liu)，當(dang)達(da)到(dao)預(yu)先(xian)設(she)定(ding)吸(xi)氣(qi)體(ti)積(ji)後(hou)抽(chou)氣(qi)泵(beng)停(ting)止(zhi)工(gong)作(zuo)
，將(jiang)濾(lv)膜(mo)取(qu)出(chu)轉(zhuan)貼(tie)到(dao)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)，培(pei)養(yang)後(hou)計(ji)算(suan)空(kong)氣(qi)中(zhong)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)。過(guo)濾(lv)式(shi)采(cai)樣(yang)器(qi)捕(bu)獲(huo)效(xiao)率(lv)高(gao)，但(dan)是(shi)濾(lv)膜(mo)材(cai)料(liao)可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)存(cun)活(huo)率(lv)
，還(hai)有(you)采(cai)樣(yang)阻(zu)力(li)大(da)

、流量易變的缺陷。

在沒有空氣采樣器的情況下
，可以自己組裝如下圖的空氣錯率采樣裝置，注意組裝連接處必須密不透風。

打開圖中大瓶的龍頭，空氣就被抽入無菌水中。待4L水流完
，就有4L空氣通過小瓶中的無菌水，也就是4L空氣中的微生物被留存在50mL無菌水中。無菌吸取1mL過濾的水樣進行平板計數，做2個平行。37℃培養48h計數。

每升空氣中的細菌數為：2個平皿上細菌數量的平均值×50/4。

表麵微生物汙染的檢查需要使用接觸器或拭子，獲得某表麵某時間點的微生物數量。

接觸器以容器內已知麵積的固態培養介質與表麵接觸
，接觸麵積應大於20cm²，junyunyonglijiangzhenggeyingyangjiezhiyazhubiaomianjimiaozhong
，budeyidong。ranhoujiangzhuangzhifanghuirongqinei
，zaiqingjiecaiyangbiaomian
，qingchucanliuyingyangwu。jiechuqipeiyanghouxianxiandejunluokeyigeichuyuanbiaomianweishengwudecunhuozhuangkuangdejingxiang“圖”。

使用拭子更為簡單和靈活，用拭子擦拭某個表麵
，它抹去的微生物數量就可以計算出了。對接觸裝置觸及不到的

、不平或有凹陷的非吸收性大表麵，用拭子采樣特別方便。棉拭子的操作方法如下：

準備材料：自製無菌棉拭子或購買商品化的無菌棉拭子、內徑10cm×10cm無菌規格板、無菌生理鹽水
、培養基平皿。

ruguoquyangwutishipingmiande，jiangwujunguigebanfangzaiwutibiaomian
，yongjinshidewujunmianshizizaiwujunguigebankongxinchuhengshutumojunyun
，tumoshisuizhizhuandongmianshizi，jianqumianshiziyushoujiechubufen，jiangmianshizifangruzhuangyouyidingtijidewujunshengliyanshuizhongdaijian。

將采樣管敲打80次以上是棉拭子上的細菌充分擴散
，做適當稀釋
，進行平板計數

，37℃培養48h計數。

細菌總數（CFU/cm²）=（平皿上菌落平均數×稀釋倍數）/采樣麵積（cm²）

人員與檢測對象的接觸麵主要是手。

beijianrenyuanxishouxiaoduhou，wuzhibinglong。jiangjinpaoguodemianshiziyanshuangshouzhiqucongzhigendaozhiduanwangfantucaliangci，tucadetongshizhuandongmianshizi。jianqucaozuozheshoujiechubuwei，jiangmianshizifangruzhuangyouyidingtijidewujunshishengliyanshuizhongdaijian。

按“無菌室物體表麵細菌汙染檢查”的方法進行樣品處理、接種、培養
、計數和報告結果。