1．了解不同微生物培養在斜麵上和液體、半固體培養基中的特征。

2．進一步熟練和掌握微生物的無菌操作接種技術。

二

、基本原理

微生物的培養特征是指微生物培養在培養基上所表現出的群體形態和生長情況。一般可用斜麵、液體和半固體培養基來檢驗不同微生物的培養特征。它們培養在斜麵培養基上
，可以呈絲線狀
、刺毛狀、串珠狀
、疏展狀、樹枝狀或假根狀。生長在液體培養基內，可以呈混濁
、絮狀、粘液狀、形成菌膜、上層清晰而底部顯沉澱狀。穿刺培養在半固體培養基中
，可以沿接種線向四周蔓延
；或僅沿線生長；也可上層生長得好，甚至連成一片
，底部很少生長；或底部長得好
，上層甚至不生長。利用微生物的培養特征，可以作為它們的種類鑒定和識別純培養是否汙染的參考。

jianyanweishengwudepeiyangtezheng，huojinxingqitaweishengwuxueshiyanshi，jiezhongguochengbixubaozhengbubeiqitaweishengwusuowuran

，weici，chugongzuohuanjingyaoqiujinkenengdibimianhuojianshaozajunwuranwai
，shuliandizhangwogezhongwujuncaozuojiezhongjishushihenzhongyaode。

三、器材

枯草芽孢杆菌
，大腸杆菌(Escherichia coli)
，金黃色葡萄球菌，白地黴（Geo-trichum candidum）

，蕈狀芽孢杆菌（Bacillusmycoides），粘質沙雷氏菌（粘質賽氏杆菌， Serratia marcescens）；

肉膏蛋白腖斜麵培養基，肉膏蛋白腖液體培養基

，半固體肉膏蛋白腖培養基，接種環
，接種針
，無菌吸管，酒精燈等。

四、操作步驟

1．斜麵接種

（1）在肉膏蛋白腖斜麵試管上，用記號筆寫上將接種的菌名、日期和接種者。

（2）點燃酒精燈或煤氣燈。

（3）將菌種試管和待接種的斜麵試管，用大拇指和食指、中指
、無名指握在左手中
，並將中指夾在兩試管之間
，使斜麵向上，成水平狀態。在火焰邊用右手鬆動試管塞
，以利於接種時拔出。

（4）右手拿接種環通過火焰燒灼滅菌，在火焰邊用右手的手掌邊緣和小指，小指和無名指分別夾持棉塞（或試管帽）
，將其取出，並迅速燒灼管口。

（5）將(jiang)滅(mie)菌(jun)的(de)接(jie)種(zhong)環(huan)伸(shen)入(ru)菌(jun)種(zhong)試(shi)管(guan)內(nei)，先(xian)將(jiang)環(huan)接(jie)觸(chu)試(shi)管(guan)內(nei)壁(bi)或(huo)未(wei)長(chang)菌(jun)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)，達(da)到(dao)冷(leng)卻(que)的(de)目(mu)的(de)，然(ran)後(hou)再(zai)挑(tiao)取(qu)少(shao)許(xu)菌(jun)苔(tai)。將(jiang)接(jie)種(zhong)環(huan)退(tui)出(chu)菌(jun)種(zhong)試(shi)管(guan)，迅(xun)速(su)伸(shen)入(ru)待(dai)接(jie)種(zhong)的(de)斜(xie)麵(mian)試(shi)管(guan)
，用(yong)環(huan)在(zai)斜(xie)麵(mian)上(shang)自(zi)試(shi)管(guan)底(di)部(bu)向(xiang)上(shang)端(duan)輕(qing)輕(qing)地(di)劃(hua)直(zhi)線(xian)，勿(wu)將(jiang)培(pei)養(yang)基(ji)劃(hua)破(po)，也(ye)不(bu)要(yao)使(shi)環(huan)接(jie)觸(chu)管(guan)壁(bi)或(huo)管(guan)口(kou)。

（6）接jie種zhong環huan退tui出chu斜xie麵mian試shi管guan，再zai用yong火huo焰yan燒shao管guan口kou，並bing在zai火huo焰yan邊bian將jiang試shi管guan塞sai塞sai上shang。將jiang接jie種zhong環huan逐zhu漸jian接jie近jin火huo焰yan，再zai燒shao灼zhuo。如ru果guo接jie種zhong環huan上shang沾zhan的de菌jun體ti較jiao多duo時shi

，應ying先xian將jiang環huan在zai火huo焰yan邊bian烤kao幹gan，然ran後hou燒shao灼zhuo
，以yi免mian未wei燒shao死si的de菌jun種zhong飛fei濺jian出chu汙wu染ran環huan境jing，接jie種zhong病bing原yuan菌jun時shi更geng要yao注zhu意yi此ci點dian。

2．液體培養基接種

向肉膏蛋白腖液體培養基中接種少量菌體時
，其操作步驟基本與斜麵接種時相同
，不同之(zhi)處(chu)是(shi)挑(tiao)取(qu)菌(jun)體(ti)的(de)接(jie)種(zhong)環(huan)放(fang)入(ru)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)，應(ying)在(zai)液(ye)體(ti)表(biao)麵(mian)處(chu)的(de)管(guan)內(nei)壁(bi)上(shang)輕(qing)輕(qing)磨(mo)擦(ca)，使(shi)菌(jun)體(ti)從(cong)環(huan)上(shang)脫(tuo)落(luo)，混(hun)進(jin)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，塞(sai)好(hao)試(shi)管(guan)塞(sai)後(hou)，搖(yao)動(dong)液(ye)體(ti)，使(shi)菌(jun)體(ti)在(zai)液(ye)體(ti)中(zhong)分(fen)布(bu)均(jun)勻(yun)
，或(huo)用(yong)試(shi)管(guan)振(zhen)蕩(dang)器(qi)混(hun)勻(yun)。

向液體培養基中接種量大或要求定量接種時
，可將無菌水或液體培養基注入菌種試管，用接種環將菌苔刮下，再將菌種xuanyeyiwujunxiguandingliangxichujiaru
，huozhijiedaoruyetipeiyangji。ruguojunzhongweiyetipeiyangwu
，zekeyongwujunxiguandingliangxichujiaruhuozhijiedaoruyetipeiyangji。zhenggejiezhongguochengdouyaoqiuwujuncaozuo。

3．穿刺接種

用接種針挑取菌種（針必須挺直），自培養基的中心垂直地刺入半固體培養基中，直至接近管底
，但不要穿透，然後沿原穿刺線將針拔出，塞上試管塞
，燒灼接種針。

上述幾種接種法的無菌操作
，凡未敘述的均按實驗一操作。試驗者應反複練習無菌操作接種技術，直至較熟練地掌握。

4．將已接種的斜麵、液體和半固體培養基放置28—30℃溫箱

，培養2—3天後取出觀察結果。