1.在開始工作以前
，要清除生物安全櫃內表麵的汙染。

2.將所有必需的物品置於安全櫃內，以盡可能減少雙臂進出前麵開口的次數。物品放置要注意以下幾點：

①II級生物安全櫃台麵前麵和後麵的進氣格柵不能被物品阻擋。

②所有物品應盡可能地放在工作台後部靠近工作台邊緣的位置

，並使其在操作中不會阻擋後部格柵。

③可產生氣溶膠的設備(如：混勻器
、離心機等)應靠近安全櫃的後部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品，應該放在安全櫃內的某一側。

④潔淨的物品應放置在距離產生氣溶膠器皿至少15 cm外，降低交叉汙染的可能性。

⑤容易受紫外線損傷的實驗樣本可以在紫外線殺菌後的實驗之前放入。

⑥不要在工作區內排放過多的物品。

3.關閉操作前窗
，打開生物安全櫃的紫外燈，對生物安全櫃工作台麵
，側壁表麵以及後壁內側進行殺菌處理。

4.稍微打開操作前窗，讓生物安全櫃工作區排氣幾分鍾之後再開始工作。

(二)操作注意事項

1.zaishiyongshengwuanquanguishiyingchuanzhegetifanghufubingdaishoutaofangzhibeiwuran。zaijinxingyijiheerjishengwuanquanshuipingdecaozuoshi，kechuanzheputongshiyanfu。shoutaoyingtaozaishiyanfuxiukouwaimian。youxiecaozuokenenghaixuyaodaikouzhaohehumujing。

2.在(zai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)內(nei)，避(bi)免(mian)使(shi)用(yong)酒(jiu)精(jing)燈(deng)等(deng)明(ming)火(huo)滅(mie)菌(jun)器(qi)。使(shi)用(yong)明(ming)火(huo)會(hui)對(dui)氣(qi)流(liu)產(chan)生(sheng)影(ying)響(xiang)，並(bing)且(qie)在(zai)處(chu)理(li)揮(hui)發(fa)性(xing)物(wu)品(pin)和(he)易(yi)燃(ran)物(wu)品(pin)時(shi)
，也(ye)易(yi)造(zao)成(cheng)危(wei)險(xian)。在(zai)對(dui)接(jie)種(zhong)環(huan)進(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun)時(shi)
，可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)紅(hong)外(wai)線(xian)電(dian)加(jia)熱(re)器(qi)(見圖1),或者幹脆使用一次性塑料接種環。

3.手和雙臂伸入到生物安全櫃中等待大約1min,以便安全櫃調整完畢並且讓裏麵的空氣“掃過”手和雙臂的表麵以後

，才可以開始對物品進行處理。

4.工gong作zuo時shi，盡jin量liang減jian少shao手shou臂bi的de移yi動dong，移yi動dong時shi要yao緩huan慢man
，防fang止zhi幹gan擾rao櫃gui內nei氣qi流liu。在zai移yi動dong雙shuang臂bi進jin出chu安an全quan櫃gui時shi，需xu要yao小xiao心xin維wei持chi前qian麵mian開kai口kou處chu氣qi流liu的de完wan整zheng性xing
，雙shuang臂bi應ying該gai與yu工gong作zuo區qu開kai口kou垂chui直zhi地di緩huan慢man進jin出chu前qian麵mian的de開kai口kou。

5.在工作台麵上的實驗操作應該按照從清潔區到汙染區的方向進行，所有操作在工作台麵的中後部進行。

6.工(gong)作(zuo)時(shi)

，耐(nai)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)的(de)生(sheng)物(wu)危(wei)害(hai)性(xing)廢(fei)棄(qi)物(wu)袋(dai)以(yi)及(ji)吸(xi)管(guan)盛(sheng)放(fang)盤(pan)放(fang)在(zai)安(an)全(quan)櫃(gui)內(nei)不(bu)能(neng)拿(na)出(chu)安(an)全(quan)櫃(gui)，否(fou)則(ze)在(zai)使(shi)用(yong)這(zhe)些(xie)物(wu)品(pin)時(shi)雙(shuang)臂(bi)就(jiu)必(bi)須(xu)頻(pin)繁(fan)進(jin)出(chu)安(an)全(quan)櫃(gui)，這(zhe)樣(yang)會(hui)幹(gan)擾(rao)安(an)全(quan)櫃(gui)空(kong)氣(qi)屏(ping)障(zhang)的(de)完(wan)整(zheng)性(xing)，從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)對(dui)人(ren)員(yuan)和(he)物(wu)品(pin)的(de)防(fang)護(hu)。

7.一旦實驗過程中產生溢灑物，用消毒紙巾置於其表麵吸附清理。

8.jinliangshianquanguichuyuchixugongzuozhuangtai
，bingduisuoyouwupinjinxingbiaomianxiaoduchuli
，tigongzuidachengduderenyuanbaohu。conganquanguineibunaqukenengchanshengwurandewupinshi，yidingyaojinxingbiaomianxiaoduchuli。

(三)使用完畢後的處理

1.係緊用過的生物廢物袋。

2.對安全櫃內壁、後壁、工作台麵和前窗內側進行清潔和消毒處理。

3.由於剩餘的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設備在內的所有物品都應清除表麵汙染，並移出安全櫃。

4.從安全櫃內移出手臂之前，一定要進行表麵消毒處理，然後垂直於工作區開口緩慢地移出。

6.在zai每mei次ci使shi用yong後hou
，要yao清qing除chu生sheng物wu安an全quan櫃gui內nei表biao麵mian的de汙wu染ran。工gong作zuo台tai麵mian和he內nei壁bi要yao用yong消xiao毒du劑ji進jin行xing擦ca拭shi，所suo用yong的de消xiao毒du劑ji要yao能neng夠gou殺sha死si安an全quan櫃gui裏li的de任ren何he微wei生sheng物wu。在zai每mei天tian實shi驗yan結jie束shu時shi

，應ying擦ca拭shi生sheng物wu安an全quan櫃gui的de工gong作zuo台tai麵mian、四周以及玻璃的內外側等部位來清除表麵的汙染。在對目標生物體有效時
，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑後，還必須用無菌水再次進行擦拭。

7.關閉前操作窗口並開啟紫外燈。

(四)生物安全櫃內溢灑的處理

處chu理li溢yi灑sa物wu時shi不bu要yao將jiang頭tou伸shen入ru安an全quan櫃gui內nei，也ye不bu要yao將jiang臉lian直zhi接jie麵mian對dui前qian操cao作zuo口kou，而er應ying處chu於yu前qian視shi麵mian板ban的de後hou方fang。選xuan擇ze消xiao毒du滅mie菌jun劑ji時shi需xu要yao考kao慮lv其qi對dui生sheng物wu安an全quan櫃gui的de腐fu蝕shi性xing。

如果溢灑的量不足1 ml時，可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭。

如果溢灑量大或容器破損
，建議按如下操作：使生物安全櫃保持開啟狀態；在zai溢yi灑sa物wu上shang覆fu蓋gai浸jin有you消xiao毒du滅mie菌jun劑ji的de吸xi收shou材cai料liao，作zuo用yong一yi定ding時shi間jian以yi發fa揮hui消xiao毒du滅mie菌jun作zuo用yong，必bi要yao時shi
，用yong消xiao毒du滅mie菌jun劑ji浸jin泡pao工gong作zuo表biao麵mian以yi及ji排pai水shui溝gou和he接jie液ye槽cao；在安全櫃內對所戴手套消毒滅菌後
，脫下手套；如果防護服已被汙染
，脫掉所汙染的防護服後
，用適當的消毒滅菌劑清洗暴露部位
；穿好適當的個體防護裝備，如雙層手套

、防護服、護目鏡和呼吸保護裝置等；小心將吸收了溢灑物的紙巾(或其他吸收材料)連同溢灑物收集到專用的收集袋或容器中，並反複用新的紙巾(或其他吸收材料)將剩餘物質吸淨；破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理
；用消毒滅菌劑擦拭或噴灑安全櫃內壁
、工作表麵以及前視窗的內側；作用一定時間後，用潔淨水擦幹淨消毒滅菌劑
；如果需要浸泡接液槽，在清理接液槽前要先報告主管人員；可能需要用其他方式消毒滅菌後再進行清理。如果溢灑物流入生物安全櫃內部，需要評估後采取適用的措施。

(五)定期維護

1.每三個月更換一次預過濾器。

2.每年更換一次紫外燈。

3.有下列情況之一時，應對生物安全櫃進行現場檢測：生物安全實驗室竣工後，投入使用前，生物安全櫃已安裝完畢；生物安全櫃被移動位置後；對生物安全櫃進行檢修後；生物安全櫃更換高效過濾器後
；生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)一(yi)年(nian)一(yi)度(du)的(de)常(chang)規(gui)檢(jian)測(ce)。現(xian)場(chang)檢(jian)測(ce)應(ying)由(you)有(you)資(zi)質(zhi)的(de)專(zhuan)業(ye)人(ren)員(yuan)按(an)照(zhao)生(sheng)產(chan)商(shang)的(de)說(shuo)明(ming)對(dui)每(mei)一(yi)台(tai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)的(de)運(yun)行(xing)性(xing)能(neng)以(yi)及(ji)完(wan)整(zheng)性(xing)進(jin)行(xing)評(ping)估(gu)，以(yi)檢(jian)查(zha)其(qi)是(shi)否(fou)符(fu)合(he)國(guo)家(jia)標(biao)準(zhun)要(yao)求(qiu)。安(an)全(quan)櫃(gui)防(fang)護(hu)效(xiao)果(guo)的(de)評(ping)估(gu)應(ying)該(gai)包(bao)括(kuo)對(dui)安(an)全(quan)櫃(gui)的(de)完(wan)整(zheng)性(xing)、HEPA過濾器的泄漏、垂直氣流的速度、工作窗口氣流流向和平均風速、負壓/換氣次數、氣流的煙霧模式以及警報和互鎖係統進行測試。還可以選擇進行漏電、光照度
、紫外強度、zaoyinshuipingyijizhendongxingceshi。zaijinxingzhexieceshishi
，jiancerenyuanyaojingguozhuanmendepeixun，caiyongzhuanmendejishuheyiqishebei。qiangliejianyiyouyouzizhidezhuanyerenyuanlaijinxingceshi。

每周采用空氣落菌數相似的方法進行無菌檢查。

生物安全櫃在移動以及更換過濾器之前，必須清除汙染。最常用的方法是采用甲醛熏蒸,應該由有資質的專業人員來清除汙染。