guangxuexianweijingshiliyongguangxueyuanli,barenyansuobunengfenbiandeweixiaowutifangdachengxiang,yigongrenmentiquweixijiegouxinxideguangxueyiqi。guangxuexianweijingjiushiliyongbiaomianweiqumiandeguangxuetoujingshiwutifangdachengxiangzheyiyuanli,baweixiaowutifangdadaorenyanzuyiguanchadechicun。
光guang學xue顯xian微wei鏡jing通tong常chang采cai用yong兩liang級ji放fang大da,分fen別bie由you物wu鏡jing和he目mu鏡jing完wan成cheng。被bei觀guan察cha物wu體ti位wei於yu物wu鏡jing的de前qian方fang,被bei物wu鏡jing做zuo第di一yi級ji放fang大da後hou成cheng,倒dao立li的de實shi像xiang,然ran後hou此ci實shi像xiang再zai被bei目mu鏡jing做zuo第di二er級ji放fang大da成cheng虛xu像xiang,人ren眼yan看kan到dao的de就jiu是shi一yi虛xu像xiang,而er顯xian微wei鏡jing的de總zong放fang大da倍bei率lv就jiu是shi物鏡放大倍率和目鏡放大倍率的乘積。
fangdabeilvshizhizhixianchicundefangdabi,erbushimianjibi。xianweijingfangdabeilvdejixianjiyouxiaofangdabeilv,xianweijingdefenbianlvshizhinengbeixianweijingqingxiqufendelianggewudiandezuixiaojianju。fenbianlvhefangdabeilvshilianggebutongdedanyouxianghuyouguanliandegainian。
當選用的物鏡分辨率不夠高(數值孔徑不夠大)shi,xianweijingbunengfenqingwutideweixijiegou,cishijishiguodudizengdafangdabeilv,dedaodeyezhishiyigelunkuodadanxijiebuqingxidetuxiang,chengweiwuxiaofangdabeilv。fanzhiruguofenbianlvyijingmanzuyaoqiuerfangdabeilvbuzu,zexianweijingsuiyijubeifenbiannengli,danyintuxiangtaixiaoerrengranbunengbeirenyanqingxishijian。suoyiweilechongfenfahuixianweijingdefenbiannengli,yingshishuzhikongjingyuxianweijingzongfangdabeilvhelipipei。
一、顯微鏡的構造
(一)光學部分
1.物鏡
該鏡頭下端接近被檢物體,為顯微鏡上的主要光學裝置。由多塊透鏡組成。一般顯微鏡具有3個-4gewujing,fenchengganzaoxiheyoujingliangzu,ganzaoxiyouanfangdabeishufenweidibeijinghegaobeijing。gewujingfangdalvyouqiwaixingbianren,jingtouchangduyueda,jingpiankoujingyuexiao,fangdabeishuyuda;反之,放大倍數小。油鏡頭的下緣,一般刻有一圈黑線。此外,各物鏡上都刻有放大倍數、孔徑數等標誌
2.目鏡
目mu鏡jing重zhong要yao的de光guang學xue部bu分fen之zhi一yi,和he鏡jing檢jian者zhe的de眼yan睛jing接jie近jin。目mu鏡jing由you兩liang塊kuai透tou鏡jing組zu成cheng,其qi上shang刻ke有you倍bei數shu。為wei便bian於yu指zhi出chu物wu象xiang,常chang在zai鏡jing中zhong裝zhuang黑hei色se細xi絲si一yi條tiao,作zuo為wei指zhi針zhen。
3.聚光器
聚光器位於載物台下方的次台上,由數個透鏡組成。能上下移動,調節並集聚由光源提供的光線,使集中於載物玻片上。
4.光源
光源提供觀察所需光線,裝在顯微鏡的最下方。
(二)機械部分
1.鏡臂
鏡臂在鏡筒後麵,便於顯微鏡搬移,並作為將鏡筒傾斜時的握持部。
2.底座
顯微鏡的底座用以支持全鏡,呈馬蹄形。
3.載物台
zaiwujingxiafang,chengfangxinghuoyuanxing,yongyizaifangbeijianwuti。zhongyangyoukong,keyitouguang。taishangzhuangyouyidanhuangjia,jingjianshikeyigudingbiaobenpian。youdezaiwutaishangzhuangyouzaiwutaitiaojiexuanniu,nianzhuanxuanniu,nengshibiaobenqianhouzuoyouyidong。
4.光圈
在聚光器下方,可以任意開閉,用以調節射入集光線的多寡。
5.電源和亮度調節旋鈕
用於開啟光源和調節光源的亮度。
6.粗準焦螺旋和細準焦螺旋
粗準焦螺旋可使載物台較大距離地升降。細準焦螺旋可以精確地調節距離。
二、顯微鏡的光路
目鏡是顯微鏡頂部一個非常複雜的部件,它由兩個或兩個以上的內部透鏡組成,通常擁有10倍的放大倍數。雖然圖2dexianweijingshiyitugeichudeshishuangmuxianweijing,danshiyeyoudantongmujingdexianweijing。lingyigezhongyaodebujianshiwujing,tongchangxianweijingdouyoukeyixuanzhuandejingliang,youliyuwujingduibopiandeguancha。dabufenshiyanshidexianweijingwujingdefangdabeishutongchangwei:10倍、45倍和100倍,鏡頭上長標記的英文:low power(低倍),high-dry(高倍)和oil immersion (油鏡).有的顯微鏡可能會有四個鏡頭,但是最小的放大倍數隻有4倍。
顯微鏡的第三個重要部件為聚光器,它位於載物台下方,收集由燈(光源)fachudeguang,shedaozaibopian。juguangqikeyiyouzaiwutaixiafangdeyigexuanniutiaojieshengjiang。juguangqizhongyouyigeguangquankeyitiaojietouguoguangdejiliang。ruguoxianweijingquefadianyalaitiaojieguangyuanjiuzhuyaoyikaoguangquanlaitiaojieguangyuandeqiangdu。tu1所示的Olympus顯微鏡的光圈是通過調節一個凸邊的圓圈來調節光的強度的。圖2顯示了顯微鏡的光路情況。
三、分辨率
顯微鏡透鏡係統的分辨率取決於光圈的數值孔徑、光的波長和聚光器的設計。最好的顯微鏡的油鏡的分辨率一般在0.2 um.這就意味著兩個相距0.2 um的物體用顯微鏡觀察就感覺是兩個獨立的個體。但是如果相距小於0.2 um,那麼兩個小物體就被認為是一個物體。想要使顯微鏡的分辨率得到最大的發揮,以下因素是必須考慮的:
(1)在光源的上方添加藍的濾光片,因為短的藍光波長可以提供更大的分辨率。
(2)聚光器需要放在最高的位置上,這樣可以使光最大限度的到達目標處。
(3)光圈不能停在靠下的位置。盡管光圈靠下可以提高對比度,但是它會使光圈的數值孔徑變小。
(4)油鏡需要在載玻片和100倍的目標之間使用。
必須注意的是放大率增大,分辨率必須增大。但是單純的增加放大率,比如使用20倍目鏡是不能增加分辨率的。
四、顯微鏡的使用方法
(一)對光
(1)鏡jing檢jian時shi身shen體ti要yao正zheng對dui實shi驗yan台tai,采cai取qu端duan正zheng的de姿zi態tai,調tiao整zheng兩liang個ge目mu鏡jing之zhi間jian的de距ju離li與yu觀guan測ce者zhe瞳tong距ju相xiang符fu,兩liang眼yan自zi然ran睜zheng開kai,同tong時shi左zuo手shou調tiao節jie焦jiao距ju,使shi物wu像xiang清qing晰xi並bing移yi動dong標biao本ben視shi野ye,右you手shou記ji錄lu、繪(hui)圖(tu)。將(jiang)低(di)倍(bei)物(wu)鏡(jing)轉(zhuan)至(zhi)鏡(jing)筒(tong)下(xia)方(fang)與(yu)鏡(jing)筒(tong)成(cheng)一(yi)直(zhi)線(xian)。鏡(jing)檢(jian)時(shi)載(zai)物(wu)台(tai)不(bu)可(ke)傾(qing)斜(xie),因(yin)為(wei)當(dang)載(zai)物(wu)台(tai)傾(qing)斜(xie)時(shi),液(ye)體(ti)或(huo)油(you)易(yi)流(liu)出(chu),既(ji)損(sun)壞(huai)了(le)標(biao)本(ben),又(you)汙(wu)染(ran)載(zai)物(wu)台(tai),也(ye)影(ying)響(xiang)檢(jian)查(zha)結(jie)果(guo)。
(2)利用自然光源鏡檢時,最好用朝北的光源,不宜采用直射陽光;利用人工光源時,用日光燈的光源。轉動底部光源或撥動反光鏡,調節視野亮度。反光鏡有平、凹兩麵,光源強時用平麵,較暗時用凹麵,需要強光時,將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時,將聚光器降低,或光圈適當縮小。
(3)將待觀察的標本置載物台上,載物台上有固定的裝置固定標本(見圖3)。通過載物台調節旋鈕將標本移至鏡筒下方。轉動粗準焦螺旋使鏡筒下降至物鏡 鏡接近標本。於轉動粗準焦螺旋的同時,需俯身在鏡旁仔細觀察物鏡與標本之間的距離。
(4)調節目鏡之間距離,雙眼分別於左、右目鏡中觀察,待雙眼視野重合,同時左手轉動粗準焦螺旋,使鏡筒徐徐上升以調節焦距,使視野內的物像看到時即停,再調細準焦螺旋,至標本清晰為止。
(二)物鏡的使用
顯微鏡一般具有三個物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定於物鏡轉換盤孔中。觀察標本時,使用低倍物鏡,此時,視野較大,標本較易查出,但放大倍數較小(一般放大100倍),較小的物體不易觀察其結構。高倍物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結構。油鏡放大倍數可達1000倍,用來觀察細菌。
(三)低倍、高倍、油鏡頭的識別
(1)標明放大倍數10×、40 ×、100 x,或10/0.25、40/0.65、 100/1.30。
(2)低倍鏡最短,高倍鏡較長,油鏡最長。
(3)鏡頭前麵的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。
(4)油鏡頭上常刻有黑色環圈,或“Oil"或“油”字
(四)低倍鏡換高倍鏡的使用方法
(1)光線對好後,撚轉載物台調節旋鈕尋找需要觀察的標本。
(2)如標本的體積較小,不能清楚查看其構造因而不能確認時,則將標本移至視野中央,再旋轉高倍物鏡於鏡筒下方。
(3)旋轉細準焦螺旋至物象清晰為止。
(4)調節聚光器及光圈,使視野內的物象達到最清晰的程度。
(五)油鏡的使用方法
(1)將光線調至最強程度(聚光器提高,光圈全部開放,亮度調節旋鈕或光源放至最大)。
(2)將標本固定在載物台上,先把低倍鏡調至視野最亮,並找到標本視野的適當位置,然後才能換用油鏡。
(3)轉動粗準焦螺旋使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過多,不要塗開)於物鏡正下方標本上。
(4)轉動物鏡轉換盤,使油鏡頭於鏡筒下方。
(5)俯fu身shen鏡jing旁pang側ce麵mian,在zai肉rou眼yan的de觀guan察cha下xia,轉zhuan動dong粗cu準zhun焦jiao螺luo旋xuan使shi油you鏡jing頭tou徐xu徐xu下xia降jiang浸jin入ru香xiang柏bai油you內nei,輕qing輕qing接jie觸chu玻bo片pian為wei止zhi。但dan勿wu使shi兩liang者zhe相xiang碰peng,防fang止zhi損sun傷shang鏡jing頭tou或huo玻bo片pian。
(6)慢慢轉動粗準焦螺旋,使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。
(7)轉動細準焦螺旋,使視野物象達到最清晰的程度。
(8)左手徐徐移動載物台調節旋鈕,並轉動細準焦螺旋以觀察標本。
(9)標biao本ben觀guan察cha完wan畢bi後hou,轉zhuan動dong粗cu準zhun焦jiao螺luo旋xuan將jiang鏡jing筒tong升sheng起qi,取qu下xia標biao本ben玻bo片pian。立li即ji用yong擦ca鏡jing紙zhi將jiang鏡jing頭tou上shang的de香xiang柏bai油you擦ca淨jing,再zai用yong幹gan淨jing的de擦ca鏡jing紙zhi蘸zhan少shao許xu二er甲jia苯ben擦ca拭shi鏡jing頭tou,最zui後hou用yong幹gan淨jing的de擦ca鏡jing紙zhi將jiang鏡jing頭tou上shang的de二er甲jia苯ben擦ca去qu。注zhu意yi在zai擦ca鏡jing紙zhi擦ca拭shi時shi,要yao求qiu順shun著zhe一yi個ge方fang向xiang旋xuan轉zhuan擦ca拭shi,不bu能neng兩liang個ge方fang向xiang來lai回hui擦ca。
(六)觀察
初學者應先用低倍鏡觀察,這是因為低倍鏡視野的實際範圍最大,易於發現目的物,將標本玻片放在載物台上(注意標本朝上),並使標本位於物鏡的正下方,轉動粗準焦螺旋,同時從側麵觀察,待物鏡下降到標本約0.5cmshi,kaishiyoumujingguancha,tongshiyongcuzhunjiaoluoxuanshengqijingtong,zhidaochuxianwuxianghou,gaiyongxizhunjiaoluoxuan,shangxiaweiweizhuandong,zaixitiaojiejiaoju,zhizhizuihouhuodeqingxidewuxiangweizhi。rucishishiyelisuoguanchadaodebuweibulixiangshi,keliyongzaiwutaitiaojiexuanniujiangzuishihedebuweiyidongdaoshiyezhongyang。
youdibeijingzhuanhuandaogaobeijingshi,yidingyaocongcemianzhushi,yifangdibeijingweiduihaojiaojuerzaochengjingtouyubopianxiangzhuang,lingwaiyaoyongshouzhiniezhuzhuanhuanqixiamiandejinshupanshizhixuanzhuan,erbudeyongshouzhiniezhuwujinglaizhuandong,fouzechangqishiyonghou,huishiguangzhouwaixie。tiaojieguangquanhejuguangjing,shiliangdushizhong,zaizaixizhuandongxizhunjiaoluoxuan,tiaojiejiaoju,huodeqingxiwuxiang。
細菌或其他標本的細微結構,都需要用油鏡觀察,由於油鏡的工作距離很短(0. 19mm左右),故gu使shi用yong時shi必bi須xu特te別bie小xiao心xin。在zai低di倍bei鏡jing找zhao到dao要yao觀guan察cha的de部bu位wei以yi後hou,將jiang鏡jing筒tong升sheng高gao,在zai標biao本ben上shang加jia一yi滴di香xiang柏bai油you,轉zhuan換huan鏡jing頭tou,從cong側ce麵mian注zhu視shi,用yong粗cu準zhun焦jiao螺luo旋xuan將jiang鏡jing筒tong小xiao心xin下xia降jiang,使shi油you鏡jing浸jin入ru油you滴di,直zhi到dao幾ji乎hu與yu標biao本ben接jie觸chu為wei止zhi(注意切勿壓在標本上,以免壓碎玻片,甚至損壞油鏡鏡頭)。從目鏡觀察,先用粗準焦螺旋徐徐升起(隻準上升鏡筒,不能向下調節),當(dang)視(shi)野(ye)中(zhong)有(you)模(mo)糊(hu)的(de)標(biao)本(ben)物(wu)象(xiang)時(shi),改(gai)用(yong)細(xi)準(zhun)焦(jiao)螺(luo)旋(xuan)調(tiao)節(jie),直(zhi)到(dao)標(biao)本(ben)物(wu)象(xiang)清(qing)晰(xi)為(wei)止(zhi),如(ru)轉(zhuan)動(dong)粗(cu)準(zhun)焦(jiao)螺(luo)旋(xuan)已(yi)使(shi)鏡(jing)頭(tou)離(li)開(kai)油(you)鏡(jing),應(ying)重(zhong)新(xin)調(tiao)節(jie),直(zhi)至(zhi)調(tiao)到(dao)看(kan)清(qing)物(wu)象(xiang)為(wei)止(zhi)。
(七)顯微鏡的保養
(1)移yi動dong顯xian微wei鏡jing時shi,右you手shou緊jin握wo鏡jing臂bi,左zuo手shou穩wen托tuo鏡jing座zuo,勿wu傾qing斜xie,輕qing輕qing取qu出chu。不bu要yao隻zhi用yong一yi隻zhi手shou提ti取qu,以yi防fang顯xian微wei鏡jing墜zhui落luo。然ran後hou輕qing輕qing放fang在zai實shi驗yan台tai上shang。注zhu意yi在zai任ren何he情qing況kuang下xia都dou不bu要yao嚐chang試shi同tong時shi拿na起qi兩liang台tai顯xian微wei鏡jing。
(2)顯(xian)微(wei)鏡(jing)放(fang)到(dao)實(shi)驗(yan)台(tai)上(shang)時(shi),先(xian)放(fang)鏡(jing)座(zuo)的(de)一(yi)端(duan),再(zai)將(jiang)鏡(jing)座(zuo)全(quan)部(bu)放(fang)穩(wen),切(qie)不(bu)可(ke)使(shi)鏡(jing)座(zuo)全(quan)麵(mian)同(tong)時(shi)與(yu)台(tai)麵(mian)接(jie)觸(chu),這(zhe)樣(yang)會(hui)導(dao)致(zhi)震(zhen)動(dong)過(guo)大(da),透(tou)鏡(jing)和(he)細(xi)準(zhun)焦(jiao)螺(luo)旋(xuan)的(de)裝(zhuang)置(zhi)易(yi)損(sun)壞(huai)。
(3)xianweijingxujingchangbaochiqingjie,wushiyouwuhehuichenfuzhe。rutoujingbufenbujieshi,yongcajingzhiqingca,ruyouyouwu,jiangcajingzhizhanshaoxuerjiabenshiqu。youqizaishiyongyoujinghou。jianyanmujingshifouganjingdezuihaofangfashizaishiyongxianweijingguanchashi,yongmuzhiheshouzhixuanzhuanmujing,tongguojingtoushangdehuichenshifouyundonglaipanduan。ruguotongguoqinglimujingshangfangqibudaoqingchuhuichendexiaoguo,jiuyinggaiqinglimujingdexiafang,bingyongteshudekongqiguangongjuchuizouduoyudecajingzhimianrong。rutu4當目鏡被拿下清理的時候,應該用擦鏡紙遮蓋目鏡敞開的部分,用特殊的空氣噴射裝置吹去灰塵和多餘的棉絨。
(4)強酸、強堿、酒精、乙醚等都能去漆或損壞機件,需注意不使接觸機件。
(5)顯微鏡不能在陽光下暴曬和使用。
(6)目鏡和物鏡不要隨便抽出和卸下。必須抽取接目鏡時,須將鏡筒上口用布遮蓋,避免灰塵落入鏡筒內。
(7)顯微鏡用完後,取下標本片,經聚光器降下,再將物鏡轉成“八”字形,轉動粗準焦螺旋使鏡筒下降,以免物鏡與聚光器相碰。然後放入鏡箱,或鏡外加蓋塑料防塵罩。
(8)顯微鏡應放在幹燥的地方,以防生黴。
(9)顯微鏡是貴重的精密儀器,使用時要加以愛惜,切勿隨意拆散玩弄。
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