內標法

1.定義：

      內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，選一與欲測組分相近但能完全分離的組分做內標物（內標物是樣品中沒有的組分），然(ran)後(hou)配(pei)製(zhi)欲(yu)測(ce)組(zu)分(fen)和(he)內(nei)標(biao)物(wu)的(de)混(hun)合(he)標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)
，進(jin)樣(yang)得(de)相(xiang)對(dui)校(xiao)正(zheng)因(yin)子(zi)。再(zai)將(jiang)內(nei)標(biao)物(wu)加(jia)入(ru)欲(yu)測(ce)組(zu)分(fen)的(de)樣(yang)品(pin)中(zhong)，進(jin)樣(yang)後(hou)測(ce)得(de)欲(yu)測(ce)組(zu)分(fen)和(he)內(nei)標(biao)物(wu)的(de)定(ding)量(liang)參(can)數(shu)。

2.內標物：

     內nei標biao法fa在zai氣qi相xiang色se譜pu定ding量liang分fen析xi中zhong是shi一yi種zhong重zhong要yao的de技ji術shu。使shi用yong內nei標biao法fa時shi

，在zai樣yang品pin中zhong加jia入ru一yi定ding量liang的de標biao準zhun物wu質zhi
，它ta可ke被bei色se譜pu柱zhu所suo分fen離li
，又you不bu受shou試shi樣yang中zhong其qi它ta組zu分fen峰feng的de幹gan擾rao，隻zhi要yao測ce定ding內nei標biao物wu和he待dai測ce組zu分fen的de峰feng麵mian積ji與yu相xiang對dui響xiang應ying值zhi
，即ji可ke求qiu出chu待dai測ce組zu分fen在zai樣yang品pin中zhong的de百bai分fen含han量liang。采cai用yong內nei標biao法fa定ding量liang時shi，內nei標biao物wu的de選xuan擇ze是shi一yi項xiang十shi分fen重zhong要yao的de工gong作zuo。理li想xiang地di說shuo

，內nei標biao物wu應ying當dang是shi一yi個ge能neng得de到dao純chun樣yang的de已yi知zhi化hua合he物wu，這zhe樣yang它ta能neng以yi準zhun確que、已知的量加到樣品中去，它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質（如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等）、色譜行為和響應特征
，最好是被分析物質的一個同係物。當然
，在色譜分析條什下，內標物必須能與樣品中各組分充分分離。

3.選擇內標物的四個要求

（1）內標物應是該試樣中不存在的純物質

；

（2）它必須完全溶於試樣中，並與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；

（3）加入內標物的量應接近於被測組分
；

（4）色譜峰的位置應與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。

4.影響因素

在使用內標法定量時
，影響內標和被測組分峰高或峰麵積比值的因素主要有化學方麵的、色譜方麵的和儀器方麵的三類。由化學方麵的原因產生的麵積比的變化常常在分析重複樣品時出現。

化學方麵的因素

（1）內標物在樣品裏混合不好；

（2）內標物和樣品組分之間發生反應；

（3）內標物純度可變等。

對於一個比較成熟的方法來說，色譜方麵的問題發生的可能性更大一些，色譜上常見的一些問題（如滲漏）對絕對麵積的影響比較大，對麵積比的影響則要小一些。

但(dan)如(ru)果(guo)絕(jue)對(dui)麵(mian)積(ji)的(de)變(bian)化(hua)已(yi)大(da)到(dao)足(zu)以(yi)使(shi)麵(mian)積(ji)比(bi)發(fa)生(sheng)顯(xian)著(zhu)變(bian)化(hua)的(de)程(cheng)度(du)
，那(na)麼(me)一(yi)定(ding)有(you)某(mou)個(ge)重(zhong)要(yao)的(de)色(se)譜(pu)問(wen)題(ti)存(cun)在(zai)，比(bi)如(ru)進(jin)樣(yang)量(liang)改(gai)變(bian)太(tai)大(da)，樣(yang)品(pin)組(zu)分(fen)濃(nong)度(du)和(he)內(nei)標(biao)濃(nong)度(du)之(zhi)間(jian)有(you)很(hen)大(da)的(de)差(cha)別(bie)，檢(jian)測(ce)器(qi)非(fei)線(xian)性(xing)等(deng)。進(jin)樣(yang)量(liang)應(ying)足(zu)夠(gou)小(xiao)並(bing)保(bao)持(chi)不(bu)變(bian)，這(zhe)樣(yang)才(cai)不(bu)致(zhi)於(yu)造(zao)成(cheng)檢(jian)測(ce)器(qi)和(he)積(ji)分(fen)裝(zhuang)置(zhi)飽(bao)和(he)。

如果認為方法比較可靠，而色譜圖看來也是正常的話
，應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發生懷疑的最有力的證據是：麵積比可變
，而峰高比保持相對恒定。

5.優點

內(nei)標(biao)法(fa)是(shi)結(jie)合(he)了(le)峰(feng)麵(mian)積(ji)歸(gui)一(yi)法(fa)和(he)外(wai)標(biao)法(fa)的(de)優(you)點(dian)的(de)一(yi)種(zhong)方(fang)法(fa)，它(ta)在(zai)加(jia)入(ru)內(nei)標(biao)物(wu)後(hou)
，按(an)峰(feng)麵(mian)積(ji)歸(gui)一(yi)法(fa)的(de)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)，這(zhe)就(jiu)避(bi)免(mian)了(le)由(you)於(yu)進(jin)樣(yang)的(de)一(yi)致(zhi)性(xing)及(ji)樣(yang)品(pin)基(ji)質(zhi)效(xiao)應(ying)導(dao)致(zhi)的(de)偶(ou)然(ran)誤(wu)差(cha)。因(yin)而(er)，它(ta)的(de)分(fen)析(xi)精(jing)密(mi)度(du)也(ye)是(shi)比(bi)較(jiao)高(gao)的(de)，是(shi)一(yi)種(zhong)比(bi)較(jiao)理(li)想(xiang)的(de)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)。進(jin)樣(yang)量(liang)的(de)變(bian)化(hua)、色譜操作條件的微小變化對定量結果的影響不大
，特別是在樣品前處理（如濃縮
、萃取
、衍生化等）前qian加jia入ru內nei標biao物wu
，可ke部bu分fen補bu償chang欲yu測ce組zu分fen在zai樣yang品pin前qian處chu理li時shi的de損sun失shi。若ruo要yao獲huo得de很hen高gao的de精jing密mi度du的de結jie果guo時shi，可ke以yi加jia入ru樹shu種zhong內nei標biao物wu，以yi提ti高gao定ding量liang分fen析xi的de精jing度du。缺que點dian是shi每mei次ci測ce定ding都dou需xu要yao用yong分fen析xi天tian平ping準zhun確que稱cheng取qu內nei標biao物wu和he樣yang品pin的de質zhi量liang，故gu費fei時shi麻ma煩fan。同tong時shi必bi須xu要yao有you合he適shi的de標biao樣yang及ji內nei標biao物wu才cai能neng進jin行xing內nei標biao法fa定ding量liang分fen析xi。

外標法

1.定義

與(yu)內(nei)標(biao)法(fa)相(xiang)比(bi)，外(wai)標(biao)法(fa)不(bu)是(shi)把(ba)標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi)加(jia)入(ru)到(dao)被(bei)測(ce)樣(yang)品(pin)中(zhong)
，而(er)是(shi)在(zai)與(yu)被(bei)測(ce)樣(yang)品(pin)相(xiang)同(tong)的(de)色(se)譜(pu)條(tiao)件(jian)下(xia)單(dan)獨(du)測(ce)定(ding)，把(ba)得(de)到(dao)的(de)色(se)譜(pu)峰(feng)麵(mian)積(ji)與(yu)被(bei)測(ce)組(zu)分(fen)的(de)色(se)譜(pu)峰(feng)麵(mian)積(ji)進(jin)行(xing)比(bi)較(jiao)求(qiu)得(de)被(bei)測(ce)組(zu)分(fen)的(de)含(han)量(liang)。外(wai)標(biao)物(wu)與(yu)被(bei)測(ce)組(zu)分(fen)同(tong)為(wei)一(yi)種(zhong)物(wu)質(zhi)但(dan)要(yao)求(qiu)它(ta)有(you)一(yi)定(ding)的(de)純(chun)度(du)，分(fen)析(xi)時(shi)外(wai)標(biao)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)應(ying)與(yu)被(bei)測(ce)物(wu)濃(nong)度(du)相(xiang)接(jie)近(jin)，以(yi)利(li)於(yu)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)的(de)準(zhun)確(que)性(xing)。

2.種類

外標法分為工作曲線法、外標一點法。工作曲線法是用對照物質配製一係列濃度的對照品溶液確定工作曲線
，求出斜率、截(jie)距(ju)。在(zai)完(wan)全(quan)相(xiang)同(tong)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)，準(zhun)確(que)進(jin)樣(yang)與(yu)對(dui)照(zhao)品(pin)溶(rong)液(ye)相(xiang)同(tong)體(ti)積(ji)的(de)樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)，根(gen)據(ju)待(dai)測(ce)組(zu)分(fen)的(de)信(xin)號(hao)，從(cong)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)上(shang)查(zha)出(chu)其(qi)濃(nong)度(du)
，或(huo)用(yong)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)計(ji)算(suan)。

3.適用範圍

waibiaofashiyongyuchangguifenxi，tayongyuhengliangzufendefenxiyenengdedaomanyidejieguo。zhegefangfadejingquedu，zaihendachengdushangqujueyucaozuotiaojiandekongzhi。yangpinfenxidecaozuotiaojian，bixuyangekongzhiyuhuizhixiaozhengquxianshidetiaojian。dangfenggaoduicaozuotiaojiandeminganxingyijiduituoweifeng
、柱zhu子zi超chao負fu荷he和he檢jian測ce器qi有you大da的de響xiang應ying時shi
，給gei出chu非fei線xian性xing的de校xiao正zheng曲qu線xian
，此ci時shi峰feng麵mian積ji計ji算suan常chang常chang可ke以yi得de到dao更geng好hao的de結jie果guo。不bu過guo
，對dui重zhong疊die峰feng，難nan以yi準zhun確que的de測ce量liang峰feng麵mian積ji

，必bi須xu提ti高gao分fen離li度du才cai能neng達da到dao預yu期qi的de效xiao果guo。

4.特點

外標法誤差的來源

，除了分離條件的變化之外，就是進樣的重複性。使用注射器進樣，外標法的誤差大約在0.5%以內。但是，使用定量進樣閥可獲得1%的精密度；若同時小心控製分離參數
，分析精密度可達±0.25%。

外(wai)標(biao)要(yao)求(qiu)儀(yi)器(qi)重(zhong)複(fu)性(xing)很(hen)嚴(yan)格(ge)，適(shi)於(yu)大(da)量(liang)的(de)分(fen)析(xi)樣(yang)品(pin)，因(yin)為(wei)儀(yi)器(qi)隨(sui)著(zhe)使(shi)用(yong)會(hui)有(you)所(suo)變(bian)化(hua)
，因(yin)此(ci)需(xu)要(yao)定(ding)期(qi)進(jin)行(xing)曲(qu)線(xian)校(xiao)正(zheng)。此(ci)法(fa)的(de)特(te)點(dian)是(shi)操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)，計(ji)算(suan)方(fang)便(bian)
，不(bu)需(xu)測(ce)量(liang)校(xiao)正(zheng)因(yin)子(zi)，適(shi)於(yu)自(zi)動(dong)分(fen)析(xi)。但(dan)儀(yi)器(qi)的(de)重(zhong)現(xian)性(xing)和(he)操(cao)作(zuo)條(tiao)件(jian)的(de)穩(wen)定(ding)性(xing)必(bi)須(xu)保(bao)證(zheng)，否(fou)則(ze)，會(hui)影(ying)響(xiang)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)。

內nei標biao法fa的de優you點dian是shi測ce定ding的de結jie果guo較jiao為wei準zhun確que
，由you於yu通tong過guo測ce量liang內nei標biao物wu及ji被bei測ce組zu分fen的de峰feng麵mian積ji的de相xiang對dui值zhi來lai進jin行xing計ji算suan的de
，因yin而er在zai一yi定ding程cheng度du上shang消xiao除chu了le操cao作zuo條tiao件jian等deng的de變bian化hua所suo引yin起qi的de誤wu差cha。內nei標biao法fa的de缺que點dian是shi操cao作zuo程cheng序xu較jiao為wei麻ma煩fan
，每mei次ci分fen析xi時shi內nei標biao物wu和he試shi樣yang都dou要yao準zhun確que稱cheng量liang
，有you時shi尋xun找zhao合he適shi的de內nei標biao物wu也ye有you困kun難nan。

waibiaofajiushiyongbiaozhunpindefengmianjihuofenggaoyuqiduiyingdenongduzuoyitiaobiaozhunquxian
，cechuyangpindefengmianjihuofenggao，zaibiaozhunquxianshangzhachuqiduiyingdenongdu，zheshizuichangyongdeyizhongdingliangfangfa，waibiaofajianbian，danjinyangliangyaoqiushifenzhunque，yaoyangekongzhizaiyubiaozhunwuxiangtongdecaozuotiaojianxiajinxing
，fouzezaochengfenxiwucha
，debudaozhunquedeceliangjieguo。

neibiaofashiduiyingwaibiaofashuode

，waibiaofaxuyaoyongyangpinhebiaozhunpinduibi，danshiyoushiwomenhennanbaozhengyangpinhebiaozhunpinjindetijishiyiyangde


，bijingyaoyouwucha，zheshihoujiuyongneibiaofa，jiushizaiwaibiaofadejichushang，zaiyangpinhebiaozhunpinlizaijiaruyizhongwuzhi，tongguojiaruwuzhidefengmianjihuofenggaodebianhua
，jiukeyikanchuwomenbiaozhunpinheyangpinjinyangtijidechabie
，dantongshihuiyinjinjiaruwuzhidechengliangwucha。suoyiyibanyongwaibiaofalaidingliang，ruguojinyangtijihennanzhangwo，jiuyongneibiaofa

，keyixiaochujinyangtijidewucha。

內nei標biao與yu外wai標biao都dou是shi定ding量liang的de一yi種zhong方fang法fa而er已yi，至zhi於yu哪na一yi種zhong方fang法fa好hao與yu不bu好hao不bu能neng一yi概gai而er論lun，做zuo不bu同tong的de分fen析xi
，麵mian對dui著zhe不bu同tong的de要yao求qiu，再zai加jia上shang分fen析xi成cheng本ben分fen析xi效xiao率lv等deng等deng問wen題ti，簡jian單dan而er有you效xiao進jin行xing定ding量liang分fen析xi來lai滿man足zu要yao求qiu才cai是shi最zui重zhong要yao的de。