一、 測量原理
分光光度法測量的理論依據是伯郎—比耳定律：dangrongyezhongdewuzhizaiguangdezhaoshehejifaxia，chanshengleduiguangxishoudexiaoying。danwuzhiduiguangdexishoushiyouxuanzexingde
，gezhongbutongdewuzhidouyouqigezidexishouguangpu。suoyigenjudinglvdangyishudanseguangtongguoyidingnongdufanweidexiyouserongyeshi，rongyeduiguangdexishouchengduA與溶液的濃度c（g/l）或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達式A=abc
（a是比例係數）。當c的單位為mol/l時，比例係數用ε表示，則A=εbc稱為摩爾吸光係數。其單位為L•mol-1•cm-1它是有色物質在一定波長下的特征常數。
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K•C•L(比色皿的厚度)
測定時，入射光I,
吸光係數和溶液的光徑長度不變時
，透過光是根據溶液的濃度而變化的，即“K”為常數。比色皿厚度一定
，“L”、“I0”也一定。隻要測出A即可算出“C”。 
二、 722型分光光度計的使用
1、將靈敏度旋鈕調至“1”檔（信號放大倍率最小）。
2、開啟電源，指示燈亮
，選擇開關置於“T”
，波長調至到測試用波長。儀器預熱20分鍾。
3、打開試樣室（光門自動關閉），調節透光率零點旋鈕，使數字顯示為000.0。（調節100%T旋鈕）
，蓋上試樣室蓋，將比色皿
架處於蒸餾水校正位置
，使光電管受光，調節透光率100%旋鈕使數字顯示100.0。如顯示不到100.0，則可適當增加微電流放大的倍數。（增加靈敏度
的檔數同時應重複（3）調節儀器透光率的“0”位）但盡量使倍率置於低檔使用。這樣儀器會有更高的穩定性。
4、預熱後
，按（3）連續幾次調整透光率的“0”位和“100%”的位置，待穩定後儀器可進行測定工作。
三、 吸光度“A”的測量
將選擇開關置於A 。調節吸光度調零旋鈕，使得數字顯示為零
，然後將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。
四
、 濃度c的測量
將選擇開關由“A”旋至“C”將已標定濃度的樣品放入光路，調節濃度旋鈕
，使得數字顯示為標定值，將被測樣品放入光路即可讀出被測樣品的濃度值。
注意事項：
1、測ce量liang完wan畢bi


，速su將jiang暗an盒he蓋gai打da開kai
，關guan閉bi電dian源yuan開kai關guan，將jiang靈ling敏min度du旋xuan鈕niu調tiao至zhi最zui低di檔dang，取qu出chu比bi色se皿min
，將jiang裝zhuang有you矽gui膠jiao的de幹gan燥zao劑ji袋dai放fang入ru暗an盒he內nei
，關guan上shang蓋gai子zi，將jiang比bi色se皿min中zhong的de溶rong液ye倒dao入ru燒shao杯bei中zhong，用yong蒸zheng餾liu水shui洗xi淨jing後hou放fang回hui比bi色se皿min盒he內nei。
2
、每台儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表麵皿單個調換。
使用方法
（1）預熱儀器 將選擇開關置於“T”
，打開電源開關，使儀器預熱20分鍾。為了防止光電管疲勞，不要連續光照
，預熱儀器時和不測定時應將試樣室蓋打開

，使光路切斷。
（2）選定波長 根據實驗要求
，轉動波長手輪，調至所需要的單色波長。
（3）固定靈敏度檔 在能使空白溶液很好地調到“100%”的情況下，盡可能采用靈敏度較低的擋
，使用時，首先調到“1”擋，靈敏度不夠時再逐漸升高。但換擋改變靈敏度後，須重新校正“0%”和“100%”。選好的靈敏度
，實驗過程中不要再變動。
（4）調節T=0% 輕輕旋動“0%”旋鈕，使數字顯示為“00.0”，（此時試樣室是打開的）。
（5）調節T=100% 將盛蒸餾水（或空白溶液，或純溶劑）的比色皿放入比色皿座架中的第一格內，並對準光路
，把試樣室蓋子輕輕蓋上，調節透過率“100%”旋鈕，使數字顯示正好為“100.0”。
（6）吸光度的測定 將選擇開關置於“A”
，蓋上試樣室蓋子，將空白液置於光路中，調節吸光度調節旋鈕
，使數字顯示為“.000”。jiangshengyoudaicerongyedebiseminfangrubiseminzuojiazhongdeqitagenei，gaishangshiyangshigai，qingqingladongshiyangjialashou，shidaicerongyejinruguanglu
，cishishuzixianshizhijiweigaidaicerongyedexiguangduzhi。dushuhou
，dakaishiyangshigai
，qieduanguanglu。
重複上述測定操作1-2次，讀取相應的吸光度值，取平均值。
（7）濃度的測定 選擇開關由“A”旋置“C”，將(jiang)已(yi)標(biao)定(ding)濃(nong)度(du)的(de)樣(yang)品(pin)放(fang)入(ru)光(guang)路(lu)，調(tiao)節(jie)濃(nong)度(du)旋(xuan)鈕(niu)，使(shi)得(de)數(shu)字(zi)顯(xian)示(shi)為(wei)標(biao)定(ding)值(zhi)，將(jiang)被(bei)測(ce)樣(yang)品(pin)放(fang)入(ru)光(guang)路(lu)，此(ci)時(shi)數(shu)字(zi)顯(xian)示(shi)值(zhi)即(ji)為(wei)該(gai)待(dai)測(ce)溶(rong)液(ye)的(de)濃(nong)度(du)值(zhi)。
（8）關機 實驗完畢
，切斷電源
，將比色皿取出洗淨，並將比色皿座架用軟紙擦淨。