內標法:
1.定義:
內標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時,選一與欲測組分相近但能完全分離的組分做內標物(內標物是樣品中沒有的組分),然ran後hou配pei製zhi欲yu測ce組zu分fen和he內nei標biao物wu的de混hun合he標biao準zhun溶rong液ye,進jin樣yang得de相xiang對dui校xiao正zheng因yin子zi。再zai將jiang內nei標biao物wu加jia入ru欲yu測ce組zu分fen的de樣yang品pin中zhong,進jin樣yang後hou測ce得de欲yu測ce組zu分fen和he內nei標biao物wu的de定ding量liang參can數shu。
2.內標物:
內(nei)標(biao)法(fa)在(zai)氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)中(zhong)是(shi)一(yi)種(zhong)重(zhong)要(yao)的(de)技(ji)術(shu)。使(shi)用(yong)內(nei)標(biao)法(fa)時(shi),在(zai)樣(yang)品(pin)中(zhong)加(jia)入(ru)一(yi)定(ding)量(liang)的(de)標(biao)準(zhun)物(wu)質(zhi),它(ta)可(ke)被(bei)色(se)譜(pu)柱(zhu)所(suo)分(fen)離(li),又(you)不(bu)受(shou)試(shi)樣(yang)中(zhong)其(qi)它(ta)組(zu)分(fen)峰(feng)的(de)幹(gan)擾(rao),隻(zhi)要(yao)測(ce)定(ding)內(nei)標(biao)物(wu)和(he)待(dai)測(ce)組(zu)分(fen)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)與(yu)相(xiang)對(dui)響(xiang)應(ying)值(zhi),即(ji)可(ke)求(qiu)出(chu)待(dai)測(ce)組(zu)分(fen)在(zai)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)百(bai)分(fen)含(han)量(liang)。采(cai)用(yong)內(nei)標(biao)法(fa)定(ding)量(liang)時(shi),內(nei)標(biao)物(wu)的(de)選(xuan)擇(ze)是(shi)一(yi)項(xiang)十(shi)分(fen)重(zhong)要(yao)的(de)工(gong)作(zuo)。理(li)想(xiang)地(di)說(shuo),內(nei)標(biao)物(wu)應(ying)當(dang)是(shi)一(yi)個(ge)能(neng)得(de)到(dao)純(chun)樣(yang)的(de)己(ji)知(zhi)化(hua)合(he)物(wu),這(zhe)樣(yang)它(ta)能(neng)以(yi)準(zhun)確(que)、已知的量加到樣品中去,它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征,最好是被分析物質的一個同係物。當然,在色譜分析條什下,內標物必須能與樣品中各組分充分分離。
3.選擇內標物的四個要求
(1)內標物應是該試樣中不存在的純物質;
(2)它必須完全溶於試樣中,並與試樣中各組分的色譜峰能完全分離;
(3)加入內標物的量應接近於被測組分;
(4)色譜峰的位置應與被測組分的色譜峰的位置相近,或在幾個被測組分色譜峰中間。
4.影響因素
在使用內標法定量時,影響內標和被測組分峰高或峰麵積比值的因素主要有化學方麵的、色譜方麵的和儀器方麵的三類。由化學方麵的原因產生的麵積比的變化常常在分析重複樣品時出現。
化學方麵的因素
(1)內標物在樣品裏混合不好;
(2)內標物和樣品組分之間發生反應;
(3)內標物純度可變等。
對於一個比較成熟的方法來說,色譜方麵的問題發生的可能性更大一些,色譜上常見的一些問題(如滲漏)對絕對麵積的影響比較大,對麵積比的影響則要小一些。
但(dan)如(ru)果(guo)絕(jue)對(dui)麵(mian)積(ji)的(de)變(bian)化(hua)已(yi)大(da)到(dao)足(zu)以(yi)使(shi)麵(mian)積(ji)比(bi)發(fa)生(sheng)顯(xian)著(zhu)變(bian)化(hua)的(de)程(cheng)度(du),那(na)麼(me)一(yi)定(ding)有(you)某(mou)個(ge)重(zhong)要(yao)的(de)色(se)譜(pu)問(wen)題(ti)存(cun)在(zai),比(bi)如(ru)進(jin)樣(yang)量(liang)改(gai)變(bian)太(tai)大(da),樣(yang)品(pin)組(zu)分(fen)濃(nong)度(du)和(he)內(nei)標(biao)濃(nong)度(du)之(zhi)間(jian)有(you)很(hen)大(da)的(de)差(cha)別(bie),檢(jian)測(ce)器(qi)非(fei)線(xian)性(xing)等(deng)。進(jin)樣(yang)量(liang)應(ying)足(zu)夠(gou)小(xiao)並(bing)保(bao)持(chi)不(bu)變(bian),這(zhe)樣(yang)才(cai)不(bu)致(zhi)於(yu)造(zao)成(cheng)檢(jian)測(ce)器(qi)和(he)積(ji)分(fen)裝(zhuang)置(zhi)飽(bao)和(he)。
如果認為方法比較可靠,而色譜圖看來也是正常的話,應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發生懷疑的最有力的證據是:麵積比可變,而峰高比保持相對恒定。
5.優點
內nei標biao法fa是shi結jie合he了le峰feng麵mian積ji歸gui一yi法fa和he外wai標biao法fa的de優you點dian的de一yi種zhong方fang法fa,它ta在zai加jia入ru內nei標biao物wu後hou,按an峰feng麵mian積ji歸gui一yi法fa的de分fen析xi方fang法fa進jin行xing分fen析xi,這zhe就jiu避bi免mian了le由you於yu進jin樣yang的de一yi致zhi性xing及ji樣yang品pin基ji質zhi效xiao應ying導dao致zhi的de偶ou然ran誤wu差cha。因yin而er,它ta的de分fen析xi精jing密mi度du也ye是shi比bi較jiao高gao的de,是shi一yi種zhong比bi較jiao理li想xiang的de定ding量liang分fen析xi方fang法fa。進jin樣yang量liang的de變bian化hua、色譜操作條件的微小變化對定量結果的影響不大,特別是在樣品前處理(如濃縮、萃取、衍生化等)前qian加jia入ru內nei標biao物wu,可ke部bu分fen補bu償chang欲yu測ce組zu分fen在zai樣yang品pin前qian處chu理li時shi的de損sun失shi。若ruo要yao獲huo得de很hen高gao的de精jing密mi度du的de結jie果guo時shi,可ke以yi加jia入ru樹shu種zhong內nei標biao物wu,以yi提ti高gao定ding量liang分fen析xi的de精jing度du。缺que點dian:每次測定都需要用分析天平準確稱取內標物和樣品的質量,故費時麻煩。同時必須要有合適的標樣及內標物才能進行內標法定量分析。
外標法:
1.定義
yuneibiaofaxiangbi,waibiaofabushibabiaozhunwuzhijiarudaobeiceyangpinzhong,ershizaiyubeiceyangpinxiangtongdeseputiaojianxiadanduceding,badedaodesepufengmianjiyubeicezufendesepufengmianjijinxingbijiaoqiudebeicezufendehanliang。waibiaowuyubeicezufentongweiyizhongwuzhidanyaoqiutayouyidingdechundu,fenxishiwaibiaowudenongduyingyubeicewunongduxiangjiejin,yiliyudingliangfenxidezhunquexing。
2.種類
外標法分為工作曲線法、外標一點法。工作曲線法是用對照物質配製一係列濃度的對照品溶液確定工作曲線,求出斜率、截jie距ju。在zai完wan全quan相xiang同tong的de條tiao件jian下xia,準zhun確que進jin樣yang與yu對dui照zhao品pin溶rong液ye相xiang同tong體ti積ji的de樣yang品pin溶rong液ye,根gen據ju待dai測ce組zu分fen的de信xin號hao,從cong標biao準zhun曲qu線xian上shang查zha出chu其qi濃nong度du,或huo用yong回hui歸gui方fang程cheng計ji算suan。
3.適用範圍
外wai標biao法fa適shi用yong於yu常chang規gui分fen析xi,它ta用yong於yu衡heng量liang組zu分fen的de分fen析xi也ye能neng得de到dao滿man意yi的de結jie果guo。這zhe個ge方fang法fa的de精jing確que度du,在zai很hen大da程cheng度du上shang取qu決jue於yu操cao作zuo條tiao件jian的de控kong製zhi。樣yang品pin分fen析xi的de操cao作zuo條tiao件jian,必bi須xu嚴yan格ge控kong製zhi於yu繪hui製zhi校xiao正zheng曲qu線xian時shi的de條tiao件jian。當dang峰feng高gao對dui操cao作zuo條tiao件jian的de敏min感gan性xing以yi及ji對dui拖tuo尾wei峰feng、zhuzichaofuhehejianceqiyoudadexiangyingshi,geichufeixianxingdexiaozhengquxian,cishifengmianjijisuanchangchangkeyidedaogenghaodejieguo。buguo,duizhongdiefeng,nanyizhunquedeceliangfengmianji,bixutigaofenliducainengdadaoyuqidexiaoguo。
4.特點
外標法誤差的來源,除了分離條件的變化之外,就是進樣的重複性。使用注射器進樣,外標法的誤差大約在0.5%以內。但是,使用定量進樣閥可獲得1%的精密度;若同時小心控製分離參數,分析精密度可達±0.25%。
waibiaoyaoqiuyiqizhongfuxinghenyange,shiyudaliangdefenxiyangpin,yinweiyiqisuizheshiyonghuiyousuobianhua,yincixuyaodingqijinxingquxianxiaozheng。cifadetedianshicaozuojiandan,jisuanfangbian,buxuceliangxiaozhengyinzi,shiyuzidongfenxi。danyiqidezhongxianxinghecaozuotiaojiandewendingxingbixubaozheng,fouze,huiyingxiangshiyanjieguo。
neibiaofadeyoudianshicedingdejieguojiaoweizhunque,youyutongguoceliangneibiaowujibeicezufendefengmianjidexiangduizhilaijinxingjisuande,yinerzaiyidingchengdushangxiaochulecaozuotiaojiandengdebianhuasuoyinqidewucha。neibiaofadequedianshicaozuochengxujiaoweimafan,meicifenxishineibiaowuheshiyangdouyaozhunquechengliang,youshixunzhaoheshideneibiaowuyeyoukunnan。
外(wai)標(biao)法(fa)就(jiu)是(shi)用(yong)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)或(huo)峰(feng)高(gao)與(yu)其(qi)對(dui)應(ying)的(de)濃(nong)度(du)做(zuo)一(yi)條(tiao)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian),測(ce)出(chu)樣(yang)品(pin)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)或(huo)峰(feng)高(gao),在(zai)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)上(shang)查(zha)出(chu)其(qi)對(dui)應(ying)的(de)濃(nong)度(du),這(zhe)是(shi)最(zui)常(chang)用(yong)的(de)一(yi)種(zhong)定(ding)量(liang)方(fang)法(fa),外(wai)標(biao)法(fa)簡(jian)便(bian),但(dan)進(jin)樣(yang)量(liang)要(yao)求(qiu)十(shi)分(fen)準(zhun)確(que),要(yao)嚴(yan)格(ge)控(kong)製(zhi)在(zai)與(yu)標(biao)準(zhun)物(wu)相(xiang)同(tong)的(de)操(cao)作(zuo)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing),否(fou)則(ze)造(zao)成(cheng)分(fen)析(xi)誤(wu)差(cha),得(de)不(bu)到(dao)準(zhun)確(que)的(de)測(ce)量(liang)結(jie)果(guo)。
內(nei)標(biao)法(fa)是(shi)對(dui)應(ying)外(wai)表(biao)法(fa)說(shuo)的(de),外(wai)標(biao)法(fa)需(xu)要(yao)用(yong)樣(yang)品(pin)和(he)標(biao)準(zhun)品(pin)對(dui)比(bi),但(dan)是(shi)有(you)時(shi)我(wo)們(men)很(hen)難(nan)保(bao)證(zheng)樣(yang)品(pin)和(he)標(biao)準(zhun)品(pin)進(jin)的(de)體(ti)積(ji)是(shi)一(yi)樣(yang)的(de),畢(bi)竟(jing)要(yao)有(you)誤(wu)差(cha),這(zhe)時(shi)候(hou)就(jiu)用(yong)內(nei)標(biao)法(fa),就(jiu)是(shi)在(zai)外(wai)標(biao)法(fa)的(de)基(ji)礎(chu)上(shang),在(zai)樣(yang)品(pin)和(he)標(biao)準(zhun)品(pin)裏(li)在(zai)加(jia)入(ru)一(yi)種(zhong)物(wu)質(zhi),通(tong)過(guo)加(jia)入(ru)物(wu)質(zhi)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)或(huo)峰(feng)高(gao)的(de)變(bian)化(hua),就(jiu)可(ke)以(yi)看(kan)出(chu)我(wo)們(men)標(biao)準(zhun)品(pin)和(he)樣(yang)品(pin)進(jin)樣(yang)體(ti)積(ji)的(de)差(cha)別(bie),但(dan)同(tong)時(shi)會(hui)引(yin)進(jin)加(jia)入(ru)物(wu)質(zhi)的(de)秤(cheng)量(liang)誤(wu)差(cha).所以一般用外標法來定量,如果進樣體積很難掌握,就用內標法,可以消除進樣體積的誤差。
小結
neibiaoyuwaibiaodoushidingliangdeyizhongfangfaeryi,zhiyunayizhongfangfahaoyubuhaobunengyigaierlun,zuobutongdefenxi,mianduizhebutongdeyaoqiu,zaijiashangfenxichengbenfenxixiaolvdengdengwenti,jiandaneryouxiaojinxingdingliangfenxilaimanzuyaoqiucaishizuizhongyaode。
應用外標法能夠滿足要求,首選還是外標法了,畢竟簡單而省事。對於精密度要求比較高、結果準確度會產生重大影響、實shi驗yan室shi條tiao件jian不bu是shi很hen理li想xiang的de等deng等deng條tiao件jian下xia,用yong內nei標biao法fa還hai是shi必bi要yao的de。無wu論lun應ying用yong那na種zhong方fang法fa,方fang法fa的de驗yan證zheng和he確que認ren都dou是shi很hen重zhong要yao的de,隻zhi要yao是shi按an照zhao程cheng序xu經jing過guo驗yan證zheng和he確que認ren的de方fang法fa,都dou有you其qi應ying用yong的de空kong間jian的de。
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