液相檢測注意點多，基礎內容不能丟，看到最後再收藏
發布日期：2022-07-22
核心提示：液相色譜儀，於多數檢測人來說是很好上手的儀器，但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員也會習慣於一些錯誤的操作，導致挺貴的機器沒用幾次就壞了。
簡化分析過程固然重要，但是為了省時間而忽略了一些必不可少的步驟，損壞了儀器就得不償失了。
做分析試驗時哪些操作不能做？哪些懶不能偷！
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
流liu動dong相xiang不bu應ying含han有you任ren何he腐fu蝕shi性xing物wu質zhi，含han有you緩huan衝chong液ye的de流liu動dong相xiang不bu應ying保bao留liu在zai泵beng內nei，尤you其qi是shi在zai停ting泵beng過guo夜ye或huo更geng長chang時shi間jian的de情qing況kuang下xia。如ru果guo將jiang含han緩huan衝chong液ye的de流liu動dong相xiang留liu在zai泵beng內nei，由you於yu蒸zheng發fa或huo泄xie©，甚至隻是由於溶液的靜置，就可能析出鹽的微細晶體，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環和柱塞等。因此，必須泵入純水將泵充分清洗後，再換成適合於色譜柱保存和有利於泵維護的溶劑（對於反相鍵合矽膠固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生©液。
可能是泵內有大量氣體，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5ml/min）下運轉，將氣泡排盡，也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損，需更換。
原因可能是氣泡，需要排除；huozheshidanxiangfaneiyouyiwu，kexiexiadanxiangfa，jinrubingtongneichaoshengqingxi。youshikenengshishalvbangneiyouqipao，huobeiyandeweixijinglihuozishengdeweishengwubufendusai，zheshi，kexiexiashalvbangjinruliudongxiangneichaoshengchuqipao，huojiangshalvbangjinruxisuan（如4mol/L硝酸）內迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。
可能是是管·被堵塞，需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管·有泄©。檢查堵塞或泄©時應逐段進行。在進行梯度洗脫時，由於多種溶劑混合，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題，必須充分重視：PS：（在(zai)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)中(zhong)對(dui)組(zu)分(fen)複(fu)雜(za)的(de)樣(yang)品(pin)采(cai)用(yong)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)的(de)方(fang)法(fa)。在(zai)同(tong)一(yi)個(ge)分(fen)析(xi)周(zhou)期(qi)中(zhong)，按(an)一(yi)定(ding)程(cheng)序(xu)不(bu)斷(duan)改(gai)變(bian)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)濃(nong)度(du)配(pei)比(bi)，稱(cheng)為(wei)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)。從(cong)而(er)可(ke)以(yi)使(shi)一(yi)個(ge)複(fu)雜(za)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)性(xing)質(zhi)差(cha)異(yi)較(jiao)大(da)的(de)組(zu)分(fen)能(neng)按(an)各(ge)自(zi)適(shi)宜(yi)的(de)容(rong)量(liang)因(yin)子(zi)k達到良好的分離目的。梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖β；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。）
要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內混溶，超出範Χ後就不互溶，使用時更要引起注意。當有機溶劑和緩衝液混合時，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
梯ti度du洗xi脫tuo所suo用yong的de溶rong劑ji純chun度du要yao求qiu更geng高gao，以yi保bao證zheng良liang好hao的de重zhong現xian性xing。進jin行xing樣yang品pin分fen析xi前qian必bi須xu進jin行xing空kong白bai梯ti度du洗xi脫tuo，以yi辨bian認ren溶rong劑ji雜za質zhi峰feng，因yin為wei弱ruo溶rong劑ji中zhong的de雜za質zhi富fu集ji在zai色se譜pu柱zhu頭tou後hou會hui被bei強qiang溶rong劑ji洗xi脫tuo下xia來lai。用yong於yu梯ti度du洗xi脫tuo的de溶rong劑ji需xu徹che底di脫tuo氣qi，以yi防fang止zhi混hun合he時shi產chan生sheng氣qi泡pao。hunherongjidezhanduchangsuizuchengerbianhua，yinerzaitiduxituoshichangchuxianyalidebianhua。lirujiachunheshuizhandudoujiaoxiao，dangerzheyixiangjinbilihunheshizhanduzengdahenduo，cishidezhuyadayueshijiachunhuoshuiweiliudongxiangshideliangbei。yinciyaozhuyifangzhitiduxituoguochengzhongyalichaoguoshuyebenghuosepuzhunengchengshoudezuidayali。①樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間λ置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉到進樣λ時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩衝鹽和樣品殘留在進樣閥中，ÿ次分析結束後應衝洗進樣閥。通常可用水衝洗，或先用能溶解樣品的溶劑衝洗，再用水衝洗。
色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。
避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。一般說來色譜柱不能反衝，隻有生產者指明該柱可以反衝時，才可以反衝除去留在柱頭的雜質。否則反衝會迅速降低柱效。
選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），yibimiangudingxiangbeipohuai。youshikeyizaijinyangqiqianmianlianjieyiyuzhu，fenxizhushijianheguijiaoshi，yuzhuweiguijiao，keshiliudongxiangzaijinrufenxizhuzhiqianyuxianbeiguijiao“飽和”，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。避bi免mian將jiang基ji質zhi複fu雜za的de樣yang品pin尤you其qi是shi生sheng物wu樣yang品pin直zhi接jie注zhu入ru柱zhu內nei，需xu要yao對dui樣yang品pin進jin行xing預yu處chu理li或huo者zhe在zai進jin樣yang器qi和he色se譜pu柱zhu之zhi間jian連lian接jie一yi保bao護hu柱zhu。保bao護hu柱zhu一yi般ban是shi填tian有you相xiang似si固gu定ding相xiang的de短duan柱zhu。保bao護hu柱zhu可ke以yi而er且qie應ying該gai經jing常chang更geng換huan。
對dui於yu儀yi器qi本ben身shen一yi般ban不bu會hui有you問wen題ti，特te別bie是shi剛gang買mai回hui來lai的de新xin儀yi器qi。對dui於yu儀yi器qi本ben身shen最zui重zhong要yao的de就jiu是shi儀yi器qi的de校xiao驗yan，剛gang買mai回hui來lai的de儀yi器qi一yi般ban都dou是shi由you賣mai家jia先xian對dui儀yi器qi做zuo係xi統tong的de確que認ren工gong作zuo（包括IQ、PQ、OQ），確認順利通過後，再請國家或省級儀器檢定局的來校驗，檢定合格後就可以放心使用了，除此之外，一些做得好的公司ÿ半年會對儀器進行一次的內部校驗，目的就是為了保證儀器的正常可運行狀態。
色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。 流動相就涉及到配製流動相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大於18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的幹擾。色譜柱會因不同的品種而有不同的要求，但ÿ根(gen)色(se)譜(pu)柱(zhu)都(dou)有(you)它(ta)的(de)清(qing)洗(xi)要(yao)求(qiu)，這(zhe)個(ge)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)說(shuo)明(ming)書(shu)上(shang)都(dou)可(ke)以(yi)找(zhao)到(dao)，一(yi)定(ding)要(yao)根(gen)據(ju)上(shang)麵(mian)的(de)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)，否(fou)則(ze)會(hui)造(zao)成(cheng)色(se)譜(pu)柱(zhu)效(xiao)下(xia)降(jiang)和(he)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)縮(suo)短(duan)，檢(jian)測(ce)波(bo)長(chang)也(ye)會(hui)因(yin)品(pin)種(zhong)的(de)不(bu)同(tong)有(you)不(bu)同(tong)的(de)要(yao)求(qiu)，這(zhe)裏(li)需(xu)要(yao)指(zhi)出(chu)的(de)是(shi)要(yao)注(zhu)意(yi)觀(guan)察(cha)檢(jian)測(ce)器(qi)氘(dao)燈(deng)能(neng)量(liang)的(de)變(bian)化(hua)，比(bi)如(ru)基(ji)線(xian)波(bo)動(dong)大(da)，活(huo)性(xing)成(cheng)分(fen)的(de)響(xiang)應(ying)值(zhi)突(tu)然(ran)變(bian)小(xiao)等(deng)，都(dou)有(you)可(ke)能(neng)是(shi)氘(dao)燈(deng)的(de)能(neng)量(liang)不(bu)足(zu)所(suo)引(yin)起(qi)的(de)，氘(dao)燈(deng)一(yi)般(ban)建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)800小時，但實際上使用時間不止，可根據實際情況更換。流速也因品種的不同而不同，一般為1.0ml/min，流速是不可隨意改動的，特別是作為QCrenyuan，danshizuoweiyanfarenyuan，youshiweilemosuotiaojianhuojinxingfangfanaiyongxingyanzheng，huiduiliusujinxinggaibianyipingjiafangfadeshiyongxing。duiyujinyangliangyinbutongdepinzhongyeyoubutongguiding，jinyangliangzhekuaixianzaidoushiyongzidongjinyang，suoyijinyangjingmidudouhenhao，buxuqiangtiaoshenô。
首shou先xian，作zuo為wei液ye相xiang操cao作zuo人ren員yuan，一yi定ding要yao認ren真zhen學xue習xi液ye相xiang的de說shuo明ming書shu，掌zhang握wo液ye相xiang硬ying件jian和he軟ruan件jian的de操cao作zuo，掌zhang握wo日ri常chang的de維wei護hu保bao養yang，掌zhang握wo最zui基ji礎chu故gu障zhang的de排pai除chu和he維wei修xiu。一(yi)般(ban)液(ye)相(xiang)的(de)操(cao)作(zuo)規(gui)程(cheng)也(ye)是(shi)有(you)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)起(qi)草(cao)的(de)，所(suo)以(yi)隻(zhi)要(yao)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)操(cao)作(zuo)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，一(yi)般(ban)不(bu)會(hui)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，當(dang)然(ran)啫(啫)喱(li)需(xu)要(yao)特(te)別(bie)指(zhi)出(chu)的(de)是(shi)對(dui)於(yu)液(ye)相(xiang)的(de)日(ri)常(chang)維(wei)護(hu)保(bao)養(yang)很(hen)重(zhong)要(yao)，比(bi)如(ru)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)過(guo)濾(lv)、脫氣、泵密封墊的清洗、係統管·的清洗、溶劑過濾頭的清洗等，倘若不堅持，很容易導致色譜柱堵塞、係統壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費時間。其次，操作人員在配製液相分析用樣品溶液時，最好由同一個人單獨完成，以免不必要的偶然誤差。液相色譜儀應盡量安裝於水平、遠離振動、電dian磁ci幹gan擾rao的de屋wu內nei的de台tai麵mian上shang，有you條tiao件jian的de話hua盡jin量liang將jiang液ye相xiang數shu據ju處chu理li係xi統tong分fen隔ge開kai，一yi個ge是shi防fang止zhi色se譜pu基ji線xian噪zao音yin偏pian大da，基ji線xian不bu穩wen等deng，一yi個ge是shi為wei減jian少shao對dui人ren體ti的deΣ害。 編輯：songjiajie2010
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