如果色譜圖上出現的是雙峰：

（1）首先就會推測樣品可能含有兩個或以上的化合物。

（2）如果確保進樣的是化學純的單一物質
，應當考慮是否是光學純的問題，即可能存在手性異構體，這就需采用手性色譜柱進行分析
；ciwai
，haixukaolvshibushiyangpinbuwendingdeyuanyin
，zaigaifenxitiaojianxiaxunsujiangjiechenglianggehuoyishangdehuahewu。qianmianliangzhongqingkuanghenhaojiejue，bijingshilianggebutongdehuahewu，genghuansepuzhu、調整分析條件就能將其分開。

（3）如(ru)果(guo)確(que)保(bao)進(jin)樣(yang)的(de)是(shi)光(guang)學(xue)純(chun)的(de)單(dan)一(yi)物(wu)質(zhi)
，且(qie)該(gai)結(jie)構(gou)在(zai)此(ci)色(se)譜(pu)條(tiao)件(jian)中(zhong)穩(wen)定(ding)，仍(reng)然(ran)出(chu)現(xian)了(le)雙(shuang)峰(feng)，通(tong)常(chang)被(bei)稱(cheng)為(wei)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)，也(ye)就(jiu)是(shi)單(dan)一(yi)物(wu)質(zhi)在(zai)色(se)譜(pu)圖(tu)中(zhong)出(chu)現(xian)雙(shuang)峰(feng)的(de)現(xian)象(xiang)。這(zhe)種(zhong)情(qing)況(kuang)非(fei)常(chang)容(rong)易(yi)誤(wu)導(dao)分(fen)析(xi)者(zhe)的(de)判(pan)斷(duan)
，那(na)麼(me)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)該(gai)如(ru)何(he)判(pan)別(bie)區(qu)分(fen)？是(shi)什(shen)麼(me)原(yuan)因(yin)產(chan)生(sheng)，又(you)該(gai)如(ru)何(he)解(jie)決(jue)呢(ne)
？可(ke)以(yi)從(cong)以(yi)下(xia)幾(ji)方(fang)麵(mian)思(si)考(kao)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)的(de)產(chan)生(sheng)的(de)原(yuan)因(yin)。

色譜柱或保護柱汙染或塌陷
01

這是遇到色譜雙峰首先考慮的方麵，如果你分析樣品時發現每個色譜峰都出現雙峰（出峰越快
，出現雙峰的可能性越少）

，尤其采用單一純物質時，可以判定色譜柱出問題（柱頭受損或柱頭固定相變髒或流失）。如(ru)果(guo)進(jin)樣(yang)量(liang)少(shao)，原(yuan)來(lai)色(se)譜(pu)柱(zhu)正(zheng)常(chang)
，色(se)譜(pu)峰(feng)的(de)形(xing)狀(zhuang)多(duo)為(wei)一(yi)大(da)峰(feng)帶(dai)一(yi)小(xiao)峰(feng)，不(bu)一(yi)定(ding)拖(tuo)尾(wei)，這(zhe)一(yi)般(ban)應(ying)是(shi)柱(zhu)頭(tou)端(duan)堵(du)塞(sai)
，將(jiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)反(fan)接(jie)衝(chong)洗(xi)維(wei)護(hu)，一(yi)般(ban)情(qing)況(kuang)下(xia)可(ke)以(yi)解(jie)決(jue)。如(ru)果(guo)峰(feng)拖(tuo)尾(wei)
，雙(shuang)峰(feng)強(qiang)弱(ruo)相(xiang)差(cha)不(bu)大(da)，柱(zhu)頭(tou)填(tian)料(liao)受(shou)汙(wu)染(ran)或(huo)鍵(jian)合(he)相(xiang)流(liu)失(shi)可(ke)能(neng)性(xing)更(geng)大(da)
，這(zhe)時(shi)可(ke)以(yi)對(dui)色(se)譜(pu)柱(zhu)維(wei)修(xiu)處(chu)理(li)或(huo)者(zhe)使(shi)用(yong)新(xin)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)，維(wei)修(xiu)建(jian)議(yi)交(jiao)由(you)廠(chang)家(jia)處(chu)理(li)。

解決方案：將保護柱拿掉，檢測色譜雙峰是否有改善。如果沒有使用保護柱，那就是色譜柱汙染或者堵塞（可以通過壓力判斷），最好的方法是將色譜柱反過來接，用流動相或其它溶劑衝洗、suanxi，jiangduzaizhutoudecanliuwuchongdiao
，yibanqingkuangxiakeyijiejuesepushuangfengwenti。ruguoyijiubuxing，najiushiqiangxifuwuzhiwuranlesepuzhu
，zeyoubiyaocaiqusepuzhuzaishengdefangfa。

溶劑效應
02

zheshishuangfengchanshengdeyigehenzhongyaodeyuanyin，jiyangpinrongjiyuliudongxiangdexiangrongxingbuhao，daozhidanyiwuzhichuxiansepushuangfeng。lirudangyizhongdengjixingderongjizuoweijinyangrongji

，ruchunjiachun、純(chun)乙(yi)腈(jing)，純(chun)乙(yi)醇(chun)
，而(er)流(liu)動(dong)相(xiang)體(ti)係(xi)中(zhong)以(yi)強(qiang)極(ji)性(xing)水(shui)為(wei)主(zhu)，樣(yang)品(pin)進(jin)樣(yang)體(ti)積(ji)較(jiao)大(da)時(shi)，很(hen)可(ke)能(neng)出(chu)現(xian)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)現(xian)象(xiang)。主(zhu)要(yao)是(shi)由(you)於(yu)樣(yang)品(pin)溶(rong)劑(ji)與(yu)流(liu)動(dong)相(xiang)極(ji)性(xing)相(xiang)差(cha)太(tai)大(da)，流(liu)動(dong)相(xiang)來(lai)不(bu)及(ji)將(jiang)進(jin)樣(yang)溶(rong)劑(ji)稀(xi)釋(shi)，從(cong)而(er)引(yin)起(qi)色(se)譜(pu)柱(zhu)內(nei)的(de)環(huan)境(jing)突(tu)然(ran)發(fa)生(sheng)較(jiao)大(da)的(de)變(bian)化(hua)（即極性不均勻），造zao成cheng組zu分fen洗xi脫tuo不bu均jun勻yun
，導dao致zhi色se譜pu峰feng裂lie分fen或huo分fen叉cha。對dui極ji性xing比bi較jiao敏min感gan的de化hua合he物wu容rong易yi產chan生sheng此ci種zhong情qing況kuang，通tong常chang表biao現xian在zai出chu峰feng時shi間jian較jiao早zao的de色se譜pu峰feng裂lie分fen，對dui較jiao晚wan的de色se譜pu峰feng影ying響xiang較jiao小xiao
，且qie第di二er峰feng比bi第di一yi峰feng小xiao

，常chang伴ban有you拖tuo尾wei。

解決方案：調整樣品的進樣溶劑，盡可能與流動相溶劑保持一致；此外
，減小樣品的進樣體積，亦可以減少色譜雙峰的發生。

進樣量過載
03

tongchangbiaoxianweishuangfengjinkaozaiyiqi
，jibenshangqigaobutuowei。zhuyaoshiyouyuyangpinjinyangnongduhengaohuojinyangtijihenda，sepuzhuguozai，congerchuxiansepushuangfeng。ruguojiangdijinyangliangjiangyangpinxishihouzaijinyang，sepushuangfengjibenjiukeyigaishan。

解決方案：將樣品稀釋，同時減少進樣體積。

流動相的酸堿度
04

這種情況主要針對弱酸堿性化合物而言。流動相中酸堿pH值zhi不bu僅jin與yu峰feng拖tuo尾wei相xiang關guan
，同tong時shi也ye可ke能neng出chu現xian色se譜pu雙shuang峰feng。通tong常chang是shi第di二er峰feng比bi第di一yi峰feng小xiao，當dang出chu峰feng時shi間jian較jiao早zao時shi，兩liang峰feng高gao差cha距ju較jiao大da，第di二er峰feng較jiao小xiao，甚shen至zhi消xiao失shi
；dangchufengshijianjiaochangshi
，fenggaoquyuxiangdeng。zhuyaokenengshiyangpinzailiudongxiangzhongcunzaisuanjianjielipingheng，huahewutongshicunzaiyijieliheweijieliliangzhongfenzizhuangtai。womenzengcaiyongHPLC製備分離過一類膽汁酸類成分
，流動相中加入0.01%甲酸，雖色譜峰不拖尾
，但幾乎每個膽汁酸類色譜峰裂分成雙峰。當提高流動相中甲酸的濃度至0.05%和0.1%，可以明顯看到膽汁酸色譜峰的裂分距離縮小
，明顯的由色譜雙峰向單峰融合。

解決方案：改變流動相中酸堿的pH值，提高酸堿的濃度，在更強的酸堿性條件進行分析。

樣品的互變異構
05

如果某一物質出現雙峰，兩峰緊靠且不拖尾
，條件稍加變化
，如pH、溫度改變，雙峰消失或減小
，例如紅黴素等。有的樣品采用LC/MS分(fen)析(xi)時(shi)，紫(zi)外(wai)色(se)譜(pu)圖(tu)雖(sui)不(bu)易(yi)觀(guan)察(cha)到(dao)雙(shuang)峰(feng)，但(dan)質(zhi)譜(pu)總(zong)離(li)子(zi)流(liu)圖(tu)出(chu)現(xian)較(jiao)為(wei)明(ming)顯(xian)的(de)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)。這(zhe)可(ke)能(neng)與(yu)特(te)定(ding)的(de)物(wu)質(zhi)有(you)關(guan)，由(you)於(yu)其(qi)化(hua)學(xue)結(jie)構(gou)的(de)特(te)點(dian)，存(cun)在(zai)互(hu)變(bian)異(yi)構(gou)現(xian)象(xiang)，這(zhe)種(zhong)互(hu)變(bian)異(yi)構(gou)體(ti)無(wu)法(fa)分(fen)開(kai)
，而(er)是(shi)以(yi)一(yi)個(ge)動(dong)態(tai)平(ping)衡(heng)存(cun)在(zai)

，如(ru)酮(tong)式(shi)和(he)烯(xi)醇(chun)式(shi)互(hu)變(bian)。

解決方案：了解樣品性質
，調整色譜方法，如改變流動相或進樣溶劑中pH值
、緩衝鹽，降低或升高柱溫箱的溫度等
，以減少互變異構的發生
，促使樣品在分析條件中主要以單一構型為主。

儀器參數設置不合理
06

參比波長設置錯誤，例如設置分析波長254nm，參比波長400nm，這個對於大多數化合物可能沒影響。但是如果被測化合物，在400nm處也有強的紫外吸收，比254nm更強。這樣其出峰時，由於背景的抵扣作用，本來一個峰會變成對稱的二個峰
，而且如果將二峰之間的峰穀反轉180度，恰好是一個完整的峰。這時要將參比波長設置更大，或者取消。