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菌落總數在我國許多產品標準中有明確的限量規定，其中在GB 4789.2-2016《食品安全國家 標準食品微生物學檢驗菌落總數測定》（以下簡稱GB 4789.2）中就規定了食品中菌落總數的具體流程。
培養基溫度對菌落總數計數結果的影響
細菌培養用瓊脂的凝點通常為32~39℃。GB 4789.2中規定，平板技術瓊脂培養基需冷卻至46±1℃時才能用於傾注計數，該溫度與其他國家標準的規定存在細微的差異，就比如美國FDABAM規定傾注時PCA瓊脂溫度為45±1℃。
在實際工作中，由於實驗人員操作速度、培養基原料差異等因素影響，即使在水浴鍋中冷卻至46±1℃的培養基在具體實驗過程中時常會出現部分凝固現象。因此，在具體檢驗工作中培養基溫度的控製提供了較寬的安全範圍（2022版培養基溫度48±2℃）。
操作時間對菌落總數計數結果的影響
為了保證技術結果能準確反映樣品的汙染狀態，GB 4789.2中zhong指zhi定ding使shi用yong的de樣yang品pin稀xi釋shi液ye為wei不bu含han糖tang源yuan和he氮dan源yuan的de磷lin酸suan鹽yan緩huan衝chong液ye或huo生sheng理li鹽yan水shui，通tong常chang認ren為wei細xi菌jun在zai這zhe兩liang種zhong溶rong液ye中zhong的de數shu量liang短duan時shi間jian內nei不bu會hui發fa生sheng顯xian著zhu性xing變bian化hua，而er且qie在zaiGB 4789.2未對從樣品前處理到瓊脂傾注完成的時間給出明確規定。
但dan是shi在zai食shi品pin樣yang品pin中zhong時shi常chang含han有you豐feng富fu的de營ying養yang物wu質zhi，當dang與yu磷lin酸suan鹽yan緩huan衝chong液ye或huo生sheng理li鹽yan水shui混hun合he後hou會hui給gei微wei生sheng物wu提ti供gong良liang好hao的de生sheng長chang環huan境jing。為wei防fang止zhi菌jun落luo數shu在zai檢jian驗yan過guo程cheng中zhong發fa生sheng顯xian著zhu性xing變bian化hua，美mei國guoFDABAM中規定從樣品原始稀釋到傾注過程應在15min內完成。
因此，也在提示GB 4789.2方法中應對從樣品前處理到瓊脂傾注成的時間給出明確規定，以防止因檢驗過程造成的菌落計數結果顯著性差異。
傾注體積對菌落總數計數結果的影響
PCA培養基是菌落總數計數方法的關鍵要素，在不同標準中的使用體積存在明顯差異。GB 4789.2中規定PCA培養基在每個直徑為90mm的平皿中傾注體積為15～20mL，而美國FDABAM中規定PCA培養基的傾注體積為12～15mL/平皿。理論上，雖然PCA培養基使用量的增加會增加單位麵積培養基的厚度，可對在培養過程中出現的蒸發現象起到良好的緩衝作用。
據實驗研究顯示12~20mL/平皿的培養基使用體積變化不會對測試菌種的計數結果產生顯著性影響，這一結果為實驗室培養基耗材的節省提供了良好的數據支持。
培養基品牌對菌落總數計數結果的影響
目前，我國GB 4789.28中針對PCA培養基評價用的參考物質為TSA培養基，與其相比，隻要3個標準菌種的生長率大於70％即為符合要求，但是通過實驗選用不同品牌的培養基計數結果間也出現了顯著性差異。
但是在GB 4789係列標準中缺乏明確的質量要求，致使不同生產企業根據各自能力來選擇、使用該類原料，導致培養基質量出現了一定差異。因此，我國急需研製規範的培養基參考物質和評價方法，對PCA培養基的質量進行規範。
