xijunpeiyangshiyizhongyongrengongfangfashixijunshengchangfanzhidejishu。xijunzaiziranjiezhongfenbujiguang，shuliangda
，zhongleiduo
，takeyizaofurenlei
，yekeyichengweizhibingdeyuanyin。daduoshuxijunkeyongrengongfangfapeiyang，jijiangqijiezhongyupeiyangjishang，shiqishengchangfanzhi。peiyangchulaidexijunyongyuyanjiu

、鑒定和應用。細菌培養是一個複雜的技術。

一
、培養條件編輯培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法、培養基，製定培養條件（溫度、pH值、時間
，對氧的需求與否等）。一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態
、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉
、葡萄糖
、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。

二、注意點

由於細菌無處不在
，因此從製備培養基時開始，整個培養過程必須按無菌操作要求進行，否則外界細菌汙染標本
，會導致錯誤結果
；而培養的致病菌一旦汙染環境，就會引起交叉感染。

以疾病診斷為目的進行的培養
，要選擇合適的標本（血、尿、便、膿液
、分泌物等）
，並應結合臨床情況解釋所得結果。

三
、具體培養步驟

以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養基的製備，接種和培養管理四個步驟。

（一）容器、工具的消毒。

（二）培養基的製備

1．培養用水

如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水
，生產培養可用消毒的自來水（或井水）配pei製zhi。如ru果guo培pei養yang的de光guang合he細xi菌jun是shi海hai水shui種zhong
，則ze用yong天tian然ran海hai水shui配pei製zhi培pei養yang基ji，注zhu意yi在zai海hai水shui中zhong加jia入ru磷lin元yuan素su時shi

，不bu能neng用yong磷lin酸suan氫qing二er鉀jia，應ying用yong磷lin酸suan二er氫qing鉀jia
，不bu然ran會hui產chan生sheng大da量liang沉chen澱dian。

2．滅(mie)菌(jun)和(he)消(xiao)毒(du)菌(jun)種(zhong)培(pei)養(yang)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)應(ying)連(lian)同(tong)培(pei)養(yang)容(rong)器(qi)用(yong)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)氣(qi)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)滅(mie)菌(jun)。小(xiao)型(xing)生(sheng)產(chan)性(xing)培(pei)養(yang)可(ke)把(ba)配(pei)好(hao)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)用(yong)普(pu)通(tong)鋁(lv)鍋(guo)或(huo)大(da)型(xing)三(san)角(jiao)燒(shao)瓶(ping)煮(zhu)沸(fei)消(xiao)毒(du)。大(da)型(xing)生(sheng)產(chan)性(xing)培(pei)養(yang)則(ze)把(ba)經(jing)沉(chen)澱(dian)砂(sha)濾(lv)後(hou)的(de)水(shui)用(yong)漂(piao)白(bai)粉(fen)（或漂白液）消毒後使用。

3．培(pei)養(yang)基(ji)配(pei)製(zhi)根(gen)據(ju)所(suo)培(pei)養(yang)種(zhong)類(lei)的(de)營(ying)養(yang)需(xu)要(yao)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)配(pei)方(fang)。按(an)培(pei)養(yang)基(ji)配(pei)方(fang)把(ba)所(suo)需(xu)物(wu)質(zhi)稱(cheng)量(liang)，逐(zhu)一(yi)溶(rong)解(jie)，混(hun)合(he)
，配(pei)成(cheng)培(pei)養(yang)基(ji)。也(ye)可(ke)先(xian)配(pei)成(cheng)母(mu)液(ye)，使(shi)用(yong)時(shi)按(an)比(bi)例(li)加(jia)入(ru)一(yi)定(ding)的(de)量(liang)即(ji)可(ke)。

（三）接種培養基配好後，應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高，一般為20%～50%

，即菌種母液量和新配培養液雖之比為1∶4～1∶1

，不應低於20%，尤其是微氣培養，接種量更應高些，否則光合細菌在培養液中很難占絕對優勢，影響培養的最終產量和質量。

（四）培養管理光合細菌的培養過程中
，管理工作包括日常管理操作和測試
，生長情況的觀察、檢查以及出現問題的分析處理等三個方麵。

4
、日常管理和測試

（1）攪拌和充氣：guanghexijunpeiyangguochengzhongbixuchongqihuojiaoban

，zuoyongshibangzhuchendiandeguanghexijunshangfuhuodeguangzhao
，baochijunxibaodelianghaoshengchang。xiaoxingyanqipeiyangchangyongrengongyaodongpeiyangrongqidefangfashijunxibaoshangfu，meitianzhishaoyaodongsanci，dingshijinxing。daxingyanqipeiyangzeyongjixiejiaobanqihuoshiyongxiaoshuibengshishuihuanmanxunhuanyunzhuan，baochijuntixuanfu。weiqipeiyangshitongguochongqibangzhujuntishangfu，yinweipeiyangyezhongrongjieyanghanliangzengjia，guanghexijunfanzhishoudaoyizhi，chanliangxiajiang，suoyibixuyangekongzhichongqiliang。yibancaiyongdingshiduanxuchongqi，chongqiliangkongzhizai1～1.5升/（升·h）之間
，溶解氧量保持在1×10-6以下。

（2）調節光照度：培(pei)養(yang)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)需(xu)要(yao)連(lian)續(xu)進(jin)行(xing)照(zhao)明(ming)。在(zai)日(ri)常(chang)管(guan)理(li)工(gong)作(zuo)中(zhong)
，應(ying)根(gen)據(ju)需(xu)要(yao)經(jing)常(chang)調(tiao)整(zheng)光(guang)照(zhao)度(du)。白(bai)天(tian)可(ke)利(li)用(yong)太(tai)陽(yang)光(guang)培(pei)養(yang)
，晚(wan)上(shang)則(ze)需(xu)要(yao)人(ren)工(gong)光(guang)源(yuan)照(zhao)明(ming)，或(huo)完(wan)全(quan)利(li)用(yong)人(ren)工(gong)光(guang)源(yuan)培(pei)養(yang)。人(ren)工(gong)光(guang)源(yuan)一(yi)般(ban)使(shi)用(yong)碘(dian)鎢(wu)燈(deng)或(huo)白(bai)熾(chi)燈(deng)泡(pao)。不(bu)同(tong)的(de)培(pei)養(yang)方(fang)式(shi)所(suo)要(yao)求(qiu)的(de)光(guang)照(zhao)強(qiang)度(du)有(you)所(suo)不(bu)同(tong)。一(yi)般(ban)培(pei)養(yang)光(guang)照(zhao)強(qiang)度(du)應(ying)控(kong)製(zhi)在(zai)2000～5000lx之間。如果光合細菌生長繁殖快

，細胞密度高
，則光照強度應提高到5000～10000lx。光照強度可通過調整培養容器與光源的距離或使用可控電源箱調節。

（3）調節溫度：光合細菌對溫度的適應範圍很廣
，一船在23～39℃的(de)範(fan)圍(wei)內(nei)均(jun)能(neng)正(zheng)常(chang)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)
，可(ke)不(bu)必(bi)調(tiao)整(zheng)溫(wen)度(du)。在(zai)常(chang)溫(wen)下(xia)培(pei)養(yang)也(ye)可(ke)通(tong)過(guo)調(tiao)整(zheng)，將(jiang)溫(wen)度(du)控(kong)製(zhi)在(zai)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)最(zui)適(shi)宜(yi)的(de)範(fan)圍(wei)內(nei)
，使(shi)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)更(geng)好(hao)地(di)生(sheng)長(chang)。

（4）酸堿度的測定和調整：在培養光合細菌的過程中，必須注意酸堿度的變化。由於光合細菌的大量繁殖，菌液的pH值上升
，這意味著光合細菌正處於指數生長期。但當pH值超過最適範圍甚至生長的適應範圍時，光合細菌的生長達到頂點
，隨後生長下降。如果能及時調整菌液的酸堿度，使pH值zhi保bao持chi在zai最zui適shi範fan圍wei，則ze光guang合he細xi菌jun能neng繼ji續xu生sheng長chang繁fan殖zhi。為wei了le延yan長chang光guang合he細xi菌jun的de指zhi數shu生sheng長chang期qi，提ti高gao培pei養yang基ji的de利li用yong率lv和he單dan位wei水shui體ti的de產chan量liang
，測ce定ding和he調tiao整zhengPH值是非常重要的。一船采用加酸的辦法來降低菌液的酸堿度
，醋酸、乳酸和鹽酸部可使用，最常用的是醋酸。在日常的管理工作中，必須每天或隔天測定菌液的pH值，當pH值上升超出最適範圍，即加酸調整。如果在培養過程中不測定、調整酸堿度，當光合細菌的生長達到一定密度後pH值也上升到9以上
，細菌生長受阻，此時應采收或再擴大培養。在培養過程中不調整PH值，獲得的最終產量低。

5
、培(pei)養(yang)成(cheng)敗(bai)的(de)標(biao)準(zhun)編(bian)輯(ji)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)的(de)觀(guan)察(cha)和(he)檢(jian)查(zha)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)的(de)好(hao)壞(huai)是(shi)培(pei)養(yang)成(cheng)敗(bai)的(de)標(biao)準(zhun)。在(zai)培(pei)養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong)，可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)觀(guan)察(cha)菌(jun)液(ye)的(de)顏(yan)色(se)及(ji)其(qi)變(bian)化(hua)來(lai)了(le)解(jie)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)的(de)大(da)體(ti)情(qing)況(kuang)，菌(jun)液(ye)的(de)顏(yan)色(se)是(shi)否(fou)正(zheng)常(chang)，接(jie)種(zhong)後(hou)顏(yan)色(se)是(shi)否(fou)由(you)淺(qian)變(bian)深(shen)，均(jun)反(fan)映(ying)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)是(shi)否(fou)正(zheng)常(chang)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)以(yi)及(ji)繁(fan)殖(zhi)速(su)度(du)的(de)快(kuai)慢(man)。必(bi)要(yao)時(shi)可(ke)通(tong)過(guo)顯(xian)微(wei)鏡(jing)檢(jian)查(zha)，了(le)解(jie)情(qing)況(kuang)。

6、問題的分析和處理編輯通過日常管理、檢測、檢(jian)查(zha)
，了(le)解(jie)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)的(de)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)
，就(jiu)可(ke)以(yi)結(jie)合(he)當(dang)時(shi)環(huan)境(jing)條(tiao)件(jian)的(de)變(bian)化(hua)進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)，找(zhao)出(chu)影(ying)響(xiang)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)的(de)原(yuan)因(yin)，采(cai)取(qu)相(xiang)應(ying)的(de)措(cuo)施(shi)。影(ying)響(xiang)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)的(de)原(yuan)因(yin)很(hen)多(duo)
，內(nei)因(yin)是(shi)菌(jun)種(zhong)是(shi)否(fou)優(you)良(liang)，外(wai)因(yin)是(shi)光(guang)照(zhao)、溫度
、營養
、敵害和厭氣程度等。溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長，而且溫度、光照和pH值之間是互相製約的
，溫度與光照的強弱是對立統一的，所以光合細菌生長的最適條件應是互應的，即溫度高
，光照應弱
；溫度低

，光照應強。如果是溫度高，光照強，pH值就會迅速升高
，培養基產生沉澱
，抑製光台細菌的生長

；如果溫度低
，光照弱
，光合細菌得不到最佳能源，生長速度也慢。

經試驗得出光合細菌生長的最適條件是：
①溫度15～20℃時，光照30000～50000lx
，培養基pH值為7.0
；
②溫度25～30℃時，光照為3000～5000lx
，培養基的pH值為7.0。