光學顯微鏡有多種分類方法:按使用目鏡的數目可分為雙目和單目顯微鏡;按圖像是否有立體感可分為立體視覺和非立體視覺顯微鏡;按觀察對像可分為生物和金相顯微鏡等;按光學原理可分為偏光、相襯和微差幹涉對比顯微鏡等;按光源類型可分為普通光、熒光、紫外光、紅外光和激光顯微鏡等;按接收器類型可分為目視、數碼(攝像)顯微鏡等。常用的顯微鏡有雙目體視顯微鏡、金相顯微鏡、偏光顯微鏡、熒光顯微鏡等。
1.雙目體視顯微鏡
雙目體視顯微鏡又稱"實體顯微鏡"或"解剖鏡",是一種具有正象立體感地目視儀器。在生物、醫學領域廣泛用於切片操作和顯微外科手術;在工業中用於微小零件和集成電路的觀測、裝配、檢查等工作。它利用雙通道光路,雙目鏡筒中的左右兩光束不是平行,而是具有一定的夾角--體視角(一般為12度--15度),為(wei)左(zuo)右(you)兩(liang)眼(yan)提(ti)供(gong)一(yi)個(ge)具(ju)有(you)立(li)體(ti)感(gan)的(de)圖(tu)像(xiang)。它(ta)實(shi)質(zhi)上(shang)是(shi)兩(liang)個(ge)單(dan)鏡(jing)筒(tong)顯(xian)微(wei)鏡(jing)並(bing)列(lie)放(fang)置(zhi),兩(liang)個(ge)鏡(jing)筒(tong)的(de)光(guang)軸(zhou)構(gou)成(cheng)相(xiang)當(dang)於(yu)人(ren)們(men)用(yong)雙(shuang)目(mu)觀(guan)察(cha)一(yi)個(ge)物(wu)體(ti)時(shi)所(suo)形(xing)成(cheng)的(de)視(shi)角(jiao),以(yi)此(ci)形(xing)成(cheng)三(san)維(wei)空(kong)間(jian)的(de)立(li)體(ti)視(shi)覺(jiao)圖(tu)像(xiang)。
目前體視鏡的光學結構是:由一個共用的初級物鏡,對物體成象後的兩光束被兩組中間物鏡----變焦鏡分開,並成一體視角再經各自的目鏡成象,它的倍率變化是由改變中間鏡組之間的距離而獲得的,因此又稱為"連續變倍體視顯微鏡"(Zoom-stereomicroscope)。隨著應用的要求,目前體視鏡可選配豐富的選購附件,如熒光,照相,攝象,冷光源等等。
2.金相顯微鏡
jinxiangxianweijingshizhuanmenyongyuguanchajinshuhekuangwudengbutoumingwutijinxiangzuzhidexianweijing。zhexiebutoumingwutiwufazaiputongdetousheguangxianweijingzhongguancha,gujinxiangheputongxianweijingdezhuyaochabiezaiyuqianzheyifansheguang,erhouzheyitousheguangzhaoming。zaijinxiangxianweijingzhongzhaomingguangshucongwujingfangxiangshedaobeiguanchawutibiaomian,beiwumianfanshehouzaifanhuiwujingchengxiang。zhezhongfanshezhaomingfangshiyeguangfanyongyujichengdianluguipiandejiancegongzuo。
3.偏光顯微鏡(Polarizingmicroscope)
pianguangxianweijingshiyongyuyanjiusuoweitoumingyubutouminggexiangyixingcailiaodeyizhongxianweijing。fanjuyoushuangzheshedewuzhi,zaipianguangxianweijingxiajiunengfenbiandeqingchu,dangranzhexiewuzhiyekeyongransefalaijinxingguancha,danyouxiezebukeneng,erbixuliyongpianguangxianweijing。jiangputongguanggaibianweipianzhenguangjinxingjingjiandefangfa,yijianbiemouyiwuzhishidanzheshe(各向同行)或雙折射性(各向異性)。雙折射性是晶體的基本特性。因此,偏光顯微鏡被廣泛地應用在礦物、化學等領域,在生物學和植物學也有應用。
4.熒光顯微鏡
熒(ying)光(guang)顯(xian)微(wei)鏡(jing)是(shi)用(yong)短(duan)波(bo)長(chang)的(de)光(guang)線(xian)照(zhao)射(she)用(yong)熒(ying)光(guang)素(su)染(ran)色(se)過(guo)的(de)被(bei)檢(jian)物(wu)體(ti),使(shi)之(zhi)受(shou)激(ji)發(fa)後(hou)而(er)產(chan)生(sheng)長(chang)波(bo)長(chang)的(de)熒(ying)光(guang),然(ran)後(hou)觀(guan)察(cha)。熒(ying)光(guang)顯(xian)微(wei)鏡(jing)廣(guang)泛(fan)應(ying)用(yong)於(yu)生(sheng)物(wu),醫(yi)學(xue)等(deng)領(ling)域(yu)。
熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型。透射式:激ji發fa光guang來lai自zi被bei檢jian物wu體ti的de下xia方fang,聚ju光guang鏡jing為wei暗an視shi野ye聚ju光guang鏡jing,使shi激ji發fa光guang不bu進jin入ru物wu鏡jing,而er使shi熒ying光guang進jin入ru物wu鏡jing。它ta在zai低di倍bei情qing況kuang下xia明ming亮liang,而er高gao倍bei則ze暗an,在zai油you浸jin和he調tiao中zhong時shi,較jiao難nan操cao作zuo,尤you以yi低di倍bei的de照zhao明ming範fan圍wei難nan於yu確que定ding,但dan能neng得de到dao很hen暗an的de視shi野ye背bei景jing。透tou射she式shi不bu使shi用yong於yu非fei透tou明ming的de被bei檢jian物wu體ti。落luo射she式shi:透tou射she式shi目mu前qian幾ji乎hu被bei淘tao汰tai,新xin型xing的de熒ying光guang顯xian微wei鏡jing多duo為wei落luo射she式shi,光guang源yuan來lai自zi被bei檢jian物wu體ti的de上shang方fang,在zai光guang路lu中zhong具ju有you分fen光guang鏡jing,所suo以yi對dui透tou明ming和he不bu透tou明ming的de被bei檢jian物wu體ti都dou適shi用yong。由you於yu物wu鏡jing起qi了le聚ju光guang鏡jing的de作zuo用yong,不bu僅jin便bian於yu操cao作zuo,而er且qie從cong低di倍bei到dao高gao倍bei,可ke以yi實shi現xian整zheng個ge視shi場chang的de均jun勻yun照zhao明ming。
目前許多新興生物研究領域應用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(FISH)等等。
5.相襯顯微鏡(Phasecontrastmicroscope)
在光學顯微鏡的發展過程中,相襯鏡檢術的發明成功,是近代顯微鏡技術中的重要成就。我們知道,人眼隻能區分光波的波長(顏色)和振幅(亮度),對於無色通明的生物標本,當光線通過時,波長和振幅變化不大,在明場觀察時很難觀察到標本。 xiangchenxianweijingliyongbeijianwutideguangchengzhichajinxingjingjian,yejiushiyouxiaodiliyongguangdeganshexianxiang,jiangrenyanbukefenbiandexiangweichabianweikefenbiandezhenfucha,jishishiwusetoumingdewuzhiyekechengweiqingxikejian。zhedadabianlilehuotixibaodeguancha,yincixiangchenjingjianfaguangfanyingyongyudaozhixianweijingzhong。
6.微分幹涉對比顯微鏡(DifferentialinterferencecontrastDIC)
微分幹涉對比鏡檢術出現於60年nian代dai,它ta不bu僅jin能neng觀guan察cha無wu色se透tou明ming的de物wu體ti,而er且qie圖tu象xiang呈cheng現xian出chu浮fu雕diao壯zhuang的de立li體ti感gan,並bing具ju有you相xiang襯chen鏡jing檢jian術shu所suo不bu能neng達da到dao的de某mou些xie優you點dian,觀guan察cha效xiao果guo更geng為wei逼bi真zhen。微wei分fen幹gan涉she對dui比bi鏡jing檢jian術shu是shi利li用yong特te製zhi的de渥wo拉la斯si頓dun棱leng鏡jing來lai分fen解jie光guang束shu。分fen裂lie出chu來lai的de光guang束shu的de振zhen動dong方fang向xiang相xiang互hu垂chui直zhi且qie強qiang度du相xiang等deng,光guang束shu分fen別bie在zai距ju離li很hen近jin的de兩liang點dian上shang通tong過guo被bei檢jian物wu體ti,在zai相xiang位wei上shang略lve有you差cha別bie。由you於yu兩liang光guang束shu的de裂lie距ju極ji小xiao,而er不bu出chu現xian重zhong影ying現xian象xiang,使shi圖tu象xiang呈cheng現xian出chu立li體ti的de三san維wei感gan覺jiao。
7.倒置顯微鏡(Invertedmicroscope)
倒置顯微鏡是為了適應生物學、醫學等領域中的組織培養、細胞離體培養、浮遊生物、環境保護、食品檢驗等顯微觀察。
由於上述樣品特點的限製,被檢物體均放置在培養皿(或培養瓶)中,這樣就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離很長,能直接對培養皿中的被檢物體進行顯微觀察和研究。因此,物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,故稱為"倒置顯微鏡"。
由於工作距離的限製,倒置顯微鏡物鏡的最大放大率為60X。一般研究用倒置顯微鏡都配置有4X、10X、20X、及40X相差物鏡,因為倒置顯微鏡多用於無色透明的活體觀察。如果用戶有特殊需要,也可以選配其它附件,用來完成微分幹涉、熒光及簡易偏光等觀察。
目見倒置顯微鏡廣泛應用於patch-clamp,transgeneICSI等領域。
8.數碼顯微鏡
數碼顯微鏡是以攝像頭(即電視攝像靶或電荷耦合器)zuoweijieshouyuanjiandexianweijing。zaixianweijingdeshixiangmianchuzhuangrushexiangtouqudairenyanzuoweijieshouqi,tongguozhezhongguangdianqijianbaguangxuetuxiangzhuanhuanchengdianxinhaodetuxiang,ranhouduizhijinxingchicunjiance、顆粒計數等工作。這類顯微鏡可以與計算機聯用,這便於實現檢測和信息處理的自動化,多應用於需要進行大量繁瑣檢測工作的場合。
目前出現一種便攜式數碼顯微鏡照相機,簡稱數微相機。它將顯微鏡和數碼相機相結合,以同時達到顯微鏡觀察(Micro preview)和顯微攝影(Micro photography)的要求。最高物鏡顯微倍率可達150X,機身小巧,便於攜帶,自備光源,可運用於多種場合。可直接與計算機、打印機(不需要電腦)、電視(不需要電腦)聯用。
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