1.1菌株的采集
實(shi)驗(yan)室(shi)用(yong)菌(jun)種(zhong)一(yi)是(shi)到(dao)國(guo)家(jia)法(fa)定(ding)機(ji)構(gou)采(cai)購(gou),二(er)是(shi)購(gou)買(mai)商(shang)業(ye)派(pai)生(sheng)菌(jun)種(zhong),三(san)是(shi)科(ke)研(yan)中(zhong)菌(jun)種(zhong)交(jiao)流(liu)。不(bu)管(guan)是(shi)哪(na)種(zhong)來(lai)源(yuan),均(jun)統(tong)一(yi)采(cai)集(ji)。采(cai)集(ji)中(zhong)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)規(gui)範(fan)執(zhi)行(xing)。要(yao)求(qiu)包(bao)裝(zhuang)可(ke)靠(kao),采(cai)集(ji)迅(xun)速(su),不(bu)泄(xie)漏(lou)不(bu)汙(wu)染(ran)。保(bao)證(zheng)菌(jun)種(zhong)合(he)格(ge)和(he)環(huan)境(jing)安(an)全(quan)。采(cai)集(ji)中(zhong)要(yao)有(you)菌(jun)種(zhong)傳(chuan)代(dai)標(biao)識(shi)。選(xuan)擇(ze)有(you)資(zi)質(zhi)的(de)標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)的(de)合(he)格(ge)供(gong)應(ying)商(shang),每(mei)批(pi)標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)必(bi)須(xu)附(fu)帶(dai)有(you)供(gong)應(ying)商(shang)的(de)合(he)格(ge)證(zheng)或(huo)檢(jian)測(ce)報(bao)告(gao)或(huo)說(shuo)明(ming)書(shu),來(lai)證(zheng)明(ming)所(suo)采(cai)購(gou)的(de)標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)是(shi)合(he)格(ge)的(de)。
1.2標準菌株和驗收
實shi驗yan室shi收shou到dao標biao準zhun菌jun株zhu,首shou先xian應ying進jin行xing符fu合he性xing感gan官guan檢jian查zha,記ji錄lu菌jun株zhu號hao和he標biao準zhun菌jun株zhu來lai源yuan途tu徑jing信xin息xi,確que保bao溯su源yuan性xing清qing楚chu。同tong時shi還hai應ying記ji錄lu標biao準zhun菌jun株zhu名ming稱cheng和he數shu量liang、生產日期、接收日期和有無破損等情況。
1.3凍幹標準菌株的複活
1.3.1開啟產品包裝:先用70%酒精棉擦拭外包裝,再打開使用。
1.3.2複活:選擇合適的培養基和培養條件(根據菌種使用說明書,見附錄)jinxingfuhuo。junzhongdeshoucihuohuazuihaoshizaifeixuanzexingqiongzhipeiyangjishang,chufeiteshuqingkuanghuotebietuijian,yibanbuyongyetipeiyangji。dongganjunzhudechuandaicishubudechaoguo5代,從標準菌株保藏中心購買的凍幹標準菌株為第0代。
1.4工作菌株確認方法及依據
用無菌接種環取上述培養物,在相應的培養基平板(營養瓊脂、大豆胰蛋白腖瓊脂)上或相應的細菌鑒別平板(如伊紅美藍、麥康凱、BP等上劃線分離單個菌落,置適宜條件下培養(若該類微生物為厭氧菌,則培養條件應為厭氧條件)。以同樣方法取真菌和酵母菌至SDA(薩布羅培養基)平板上或玫瑰紅鈉培養基平板上,23~28℃下培養7d;培養後觀察是否具有典型的菌落狀態,然後挑取單一純菌落,進行革蘭染色、鏡檢,觀察其染色特征及菌體形態以確定菌種。
1.5 汙染處理
假(jia)如(ru)在(zai)該(gai)平(ping)板(ban)上(shang)發(fa)現(xian)有(you)其(qi)他(ta)菌(jun)落(luo)生(sheng)長(chang),則(ze)說(shuo)明(ming)操(cao)作(zuo)有(you)汙(wu)染(ran)或(huo)菌(jun)種(zhong)不(bu)純(chun)。要(yao)將(jiang)該(gai)汙(wu)染(ran)培(pei)養(yang)物(wu)做(zuo)滅(mie)菌(jun)處(chu)理(li),尋(xun)找(zhao)原(yuan)因(yin),重(zhong)新(xin)分(fen)離(li)挑(tiao)選(xuan)純(chun)菌(jun)落(luo)。
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