菌株管理及相關概念

1.幾個概念

標準菌株：即0代菌種，是指從官方菌種保藏機構獲得並至少定義到屬或種的水平的菌株。實驗室的標準菌株應有明確來源。

標準儲備菌株：從國內或國外菌種保藏機構獲得的標準菌株經過複活並在適宜的培養基中生長後，即為標準貯備菌株。

儲存菌株：儲存菌株通常從凍幹或超低溫保存的標準儲存菌株進行製備。

工作菌株：標準儲備菌株或儲存菌株經繼代培養後得到的菌株。工作菌株不可替代標準菌株。

標準培養物：標準菌株、標準儲備菌株、工作菌株的統稱。

商業派生菌株：即用型與標準菌株所有相關特性等效的可以溯源的商業衍生物。常見的有定量工作菌株。

   2.標準菌株的獲取

藥品微生物檢驗用的試驗菌應為有明確來源的標準菌株，或使用與標準菌株所有相關特性等效的可以溯源的商業派生菌株。

標準菌株應來自認可的國內或國外菌種保藏機構。中國藥典2020版以及國標中涉及的菌株主要來自於兩大菌種保藏中心：中國醫學細菌保藏管理中心（CMCC）
、美國標準菌種保藏中心（ATCC）。

菌(jun)株(zhu)購(gou)買(mai)前(qian)需(xu)根(gen)據(ju)實(shi)驗(yan)室(shi)檢(jian)測(ce)需(xu)求(qiu)製(zhi)定(ding)采(cai)購(gou)計(ji)劃(hua)

，經(jing)審(shen)批(pi)後(hou)，向(xiang)認(ren)可(ke)的(de)國(guo)內(nei)或(huo)國(guo)外(wai)的(de)菌(jun)種(zhong)保(bao)藏(zang)機(ji)構(gou)購(gou)買(mai)標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)。標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)到(dao)達(da)實(shi)驗(yan)室(shi)後(hou)，菌(jun)種(zhong)管(guan)理(li)人(ren)應(ying)檢(jian)查(zha)其(qi)名(ming)稱(cheng)、數量以及每一支的完整性
，同時將菌種的所有信息填寫記錄（包括菌種名稱、編號、數量、代數
、來源、接收日期
、接收人等），並將其貯存在規定溫度的冰箱裏。

3.標準菌株的複蘇
、複壯和保存

標準菌株的複蘇、複壯或培養物的製備應按供應商提供的說明或按已驗證的方法進行。複蘇、複壯應選擇營養成分豐富且全麵的培養基（例如：TSA/TSB/NA/NB/SDB/SDA等），一般不使用選擇性較強的培養基
；特殊的一些菌株在普通的培養基上生長不好
，可能還需添加生長因子。

標準儲備菌株應進行純度和特性確認。純度確認包括：平板劃線查看菌落形態
、革蘭氏染色
、顯微鏡觀察菌體形態等；關鍵特性確認可選擇：特征生化反應確認、試劑盒鑒定
、菌種鑒定儀鑒定等。需要注意的是
，從開啟、複蘇、複壯到純度和特性的確認，都應做好實驗記錄。

標準儲備菌株保存時，可將培養物等份懸浮於抗冷凍的培養基中，並分裝於小瓶中，藥典建議采用低溫冷凍幹燥、液氮貯存、超低溫冷凍（低於-30℃）等方法保存。低於-70℃huodiwenlengdongganzaofangfakeyiyanchangjunzhongbaocunshijian。junzhongyingshezhuanrenguanli，junzhongbaozangdedidianyingcaiquyidingdecuoshishifeiguanlizhebunengqingyihuoqu
，lirujiasuobaoguan，shuangrenbaoguandeng。

標準儲備菌株可用於製備每月或每周1次轉種的工作菌株。冷凍菌種一旦解凍轉種製備工作菌株後，不得重新冷凍和再次使用。

從保藏機構獲取的凍幹菌種為0代菌種
，每轉接一次增加一代（1代是指將活的培養物接種到微生物生長的新鮮培養基中培養，任何形式的轉種均被認為傳代一次），工作菌株的傳代次數應嚴格控製，不得超過5代，以防止過度的傳代增加菌株變異的風險。