抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類
，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為 IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈（L）和兩個重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda）兩種型別。五類Ig的重鏈結構不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。

重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異
，稱為可變區，分別用VH和VL表示。兩者構成抗體的抗原結合部位
，隻與相應的抗原決定簇匹配，發生特異性結合
，是抗體專一性結合抗原的結構基礎。

IgG可被木瓜蛋白酶分解為三個區段


，其中兩個相同的區段稱抗原結合片段（Fab）。每個Fab都保存結合抗原的能力
，但隻有一個抗原結合位點，是單價的，與抗原結合後不出現凝集或沉澱。另一區段稱Fc段，無抗體活性，但具有IgG有的抗原性。

IgG可被胃蛋白酶分解為兩個片段，一個Fab雙體，稱F（ab'）2，能和兩個相同的抗原結合

；另一片段類似Fc
，隨後被分解成小分子多肽，無生物活性。

IgM是由五個單體組成的五聚體
，含 10個重鏈和10個輕鏈，具有10個抗原結合價
，由於空間位置的影響，隻表現為五個抗原結合價。IgM分子量約為900000，IgG分子量約為150000。

機體被微生物感染後
，先產生IgM抗體，然後產生IgG抗體。經過一段時間，IgM抗體量逐漸減少而消失，而IgG抗體可長期存在，在疾病愈後可持續數年之久。

IgM抗體一般為保護性抗體具有免疫性。因此IgM抗體的測定

，對某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價值。

抗原抗體反應:

1.可逆性

抗原與抗體結合形成抗原抗體複合物的過程是一種動態平衡，其反應式為：

Ag+Ab→Ag・Ab

抗體的親和力（affinity）是抗原抗體間的固有結合力，可以用平衡常數K表示：

K=[Ag・Ab]／[Ag][Ab]

Ag・Ab的解離程度與K值zhi有you關guan。高gao親qin和he力li抗kang體ti的de抗kang原yuan結jie合he點dian與yu抗kang原yuan的de決jue定ding簇cu在zai空kong間jian構gou型xing上shang非fei常chang適shi合he
，兩liang者zhe結jie合he牢lao固gu，不bu易yi解jie離li。解jie離li後hou的de抗kang原yuan或huo抗kang體ti均jun能neng保bao持chi原yuan有you的de結jie構gou和he活huo性xing，因yin此ci可ke用yong親qin和he層ceng析xi法fa來lai提ti純chun抗kang原yuan或huo抗kang體ti。在zai抗kang血xue清qing中zhong，特te異yi性xing的deIgG抗體僅占總IgG中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體，稱為親和層析純抗體
，應用於免疫測定中可得到更好的效果。

2.最適比例

在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體複合物（沉澱）的量可繪製成一個曲線。曲線的高峰部分是抗原抗體比例最合適的範圍，稱為等價帶（zone of equivalence）。在等價帶前後分別為抗體過剩帶和抗原過剩帶。如果抗原或抗體極度過剩
，則無沉澱物形成，在免疫測定中稱為帶現象（zone phenomenon）。抗體過量稱為前帶（prezone），抗原過量稱為後帶（postzone）。在用免疫學方法測定抗原時，應使反應係統中有足夠的抗體量
，否則測得的量會小於實際含量，甚至出現假陰性。

3. 特異性

抗kang原yuan抗kang體ti的de結jie合he實shi質zhi上shang隻zhi發fa生sheng在zai抗kang原yuan的de抗kang原yuan決jue定ding簇cu與yu抗kang體ti的de抗kang原yuan結jie合he位wei點dian之zhi間jian。由you於yu兩liang者zhe在zai化hua學xue結jie構gou和he空kong間jian構gou型xing上shang呈cheng互hu補bu關guan係xi，所suo以yi抗kang原yuan抗kang體ti反fan應ying具ju有you高gao度du的de特te異yi性xing。例li如ru乙yi肝gan病bing毒du中zhong的de表biao麵mian抗kang原yuan（ HBsAg）、e抗原（HBeAg）和核心抗原（HBcAg），suilaiyuanyutongyibingdu
，danjinyuqixiangyingdekangtijiehe，erbuyulingwailiangzhongkangtifanying。kangyuankangtifanyingdezhezhongteyixingshimianyicedingnengzaiyifeichangfuzadedanbaizhihuahewu（例如血清）中測定某一特定的物質，而不需先分離待檢物。

但是這種特異性也不是絕對的。假使兩種化合物有著部分相同的結構，在抗原抗體反應中可出現交叉反應。例如：絨毛膜促性腺激素（hCG）和黃體生成激素（LH）均由α和β兩個亞單位組成，其結構的不同處在β亞單位
，而兩者的α亞單位是同類的。用hCG免疫動物所得的抗血清中含有抗α-hCG和抗β-hCG兩種抗體，抗α-hCG抗體將與LH中的α酶位發生交叉反應。在臨床檢驗中
，如用抗hCG抗血清作為妊娠診斷試劑檢定尿液中hCG，隻能用於hCG濃度較高的試驗
，否則婦女生理性排泄入尿液中的微量LH將與之發生交叉反應。因此在作為早孕診斷（敏感度應達到50 mIu/ml hCG）的實驗中必須應用隻對hCG特異的抗β-hCG，以避免與其它激素的交叉反應的發生。

4.敏感性

在測定血清中某一物質的含量時
，化學比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應測定法的敏感度約為5~10 μg/ml，免疫測定中凝膠擴散法和濁度法的敏感度與酶反應法相仿。標記的免疫測定的敏感度可提高數千倍，達ng/ml水平。例如，用放射免疫測定法或酶免疫測定法測定HBsAg，其敏感度可達0.1ng/ml。

免疫測定在臨床檢驗中的應用：

youyugezhongkangyuanchengfen，baokuoxiaofenzidebankangyuan
，junkeyongyizhibeiteyixingdekangxueqinghuodankelongkangti
，liyongcikangtizuoweishijijiukejiancebiaobenzhongxiangyingdekangyuan
，yincimianyicedingdeyingyongfanweijiguang，zailinchuangjianyanzhongkeyongyuceding：

1)  體液中的各種蛋白質，包括含量極少的蛋白質如甲胎蛋白等。

2)  激素，包括小分子量的甾體激素等。

3)  抗生素和藥物。

4)  病原體抗原，HBsAg

、HBeAg等。

5)  另外，也可利用純化的抗原檢測標本中的抗體
，例如抗-HBs等。

5. 標記的免疫測定

如上所述，免疫測定是一種很敏感的測定方法，抗原抗體反應後直接測定形成的沉澱或濁度
，敏感度可達5~10 μg/ml
，danzailinchuangjianyanzhong
，mouxiedaicewuzaibiaobenzhongdehanliangyuandiyuzheyishuiping，yinciyaoxunzhaozengjiamingandudefangfa。biaojidemianyicedingshijiangjianceshijizhongdekangyuanhuokangtiyongkeweiliangcedingdewuzhijiayibiaoji，tongguocedingbiaojiwulaitigaomingandu。zaifangshemianyicedinghemeimianyicedingzhong，biaojiwufenbieweifangshexinghesuhemei
，zuihouyongcedingfangshexinghemeihuolilaijisuandaijianwudeliang，mingandukebizhijiecedingchendianwutigaoshubaizhishuqianbei。zaibiaojimianyicedingzhong，yibanjiaruguoliangdebiaojishijiyibaozhengyudaicewufanying。yibiaojikangti（Ab ※）檢測抗原（Ag）為例
，反應式如下：

Ag+ Ab※ →AgAb※+Ab※

在反應產物中有與Ag結合的Ab※和遊離和Ab※ ，如ru不bu將jiang兩liang者zhe分fen離li而er測ce定ding標biao記ji物wu
，測ce得de的de結jie果guo將jiang為wei兩liang者zhe之zhi和he。因yin此ci
，遊you離li標biao記ji物wu與yu結jie合he標biao記ji物wu的de分fen離li是shi標biao記ji免mian疫yi測ce定ding中zhong的de重zhong要yao步bu驟zhou。可ke采cai用yong多duo種zhong手shou段duan
，固gu相xiang載zai體ti是shi其qi中zhong之zhi一yi。如ru將jiang抗kang原yuan或huo抗kang體ti包bao被bei在zai固gu相xiang載zai體ti上shang，然ran後hou再zai與yu標biao記ji的de抗kang原yuan或huo抗kang體ti直zhi接jie反fan應ying，結jie合he的de標biao記ji物wu被bei固gu定ding在zai載zai體ti上shang，而er遊you離li的de標biao記ji物wu留liu於yu溶rong液ye中zhong。這zhe樣yang可ke以yi通tong過guo洗xi滌di將jiang遊you離li的deAb※除去
，結合標記物的測定可在固相上進行。

6.酶免疫測定

酶免疫測定（enzymeimmunoassay）可分為均相（homogenous）和非均相（heterogenous）兩種類型。在均相EIAzhongkebujinxingyoulidehejiehedebiaojiwudefenlierzhijiecedingbiaojiwu。liruzaimouzhongtiaojianxia

，kangyuankangtifanyinghouxingchengdemeibiaojikangyuankangtifuhewuzhongdemeishiquqiduidiwuzuoyongdehuoli，yinercechudemeihuolizhijiefanyingyoulidemeibiaojiwu。junxiangEIA在臨床檢驗中較少應用。非均相EIA需先進行遊離的和結合的標記物的分離。如前所述，固相載體可用作一種分離手段。這種固相酶免疫測定方法在1971年最初建立時稱為酶聯免疫吸附劑測定（enzymelinked immunosorbent assay），簡稱ELISA，在國內有譯作酶聯免疫吸附試驗的
，雖然含義不全確切，但已習用。