移液九部曲
01 裝吸頭
移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉即可。
錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。
02 量程設定
操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10~100%量程範圍內操作,但在10%量程處操作對於移液技巧要求高,故推薦在35~100%量程範圍內操作。
量程調節:當由小量程調節至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉,旋轉到達超過所需量程1/3圈處再回調至所需量程。當由大量程調節至小量程時,直接連貫旋轉至所需量程。
03 潤洗
粘稠液體可以通過吸頭預潤濕的方式來達到精確移液,先吸入樣液,打出, 吸頭內壁會吸附一層液體,使表麵吸附達到飽和,然後再吸入樣液,最後打出液體的體積會很精確。
用yong同tong一yi樣yang品pin重zhong複fu吸xi液ye排pai液ye二er至zhi三san次ci,潤run洗xi為wei以yi後hou每mei次ci吸xi液ye提ti供gong相xiang同tong的de接jie觸chu麵mian,保bao證zheng操cao作zuo的de一yi致zhi性xing。對dui常chang溫wen樣yang品pin,吸xi頭tou潤run洗xi有you助zhu於yu提ti高gao準zhun確que性xing;但是對於高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準確性,請使用者特別注意。
04 吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態,傾斜角度不能超過20°
05 吸頭浸入深度
06 吸頭浸入時間
吸液後在液麵中保持一秒鍾再將吸頭平緩移開,這對於大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
07 吸液速度
勻速連貫移液,控製好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧衝入移液器內部,汙染活塞等部件。
08 排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液,略作停頓後按至第二檔進行吹液。
排液四種方式:
09 手溫
移液器不宜長時間握在手裏,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液槍使用訣竅
01 影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發生誤差;
(2)氣密性:tip和槍體的結合部,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差;
(3)吸速:容易造成tip內氣泡產生,而且會汙染槍頭;
(4)試劑的揮發:吸揮發性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產生誤差;
解決辦法:反複抽吸4~5次就可改善。
02 使用注意事項
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩地鬆開拇指,絕不允許突然鬆開,以防將溶液吸入過快而衝入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣;
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然後再正式移液,因為,吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產生誤差;
(3)濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定;
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量並進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g;
(5)移液器反複撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內部零件鬆散而損壞移液器;
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液;
(7)在zai設she置zhi量liang程cheng時shi,請qing注zhu意yi,旋xuan轉zhuan到dao所suo需xu量liang程cheng,數shu字zi清qing楚chu顯xian示shi在zai窗chuang中zhong,所suo設she量liang程cheng在zai移yi液ye器qi量liang程cheng範fan圍wei內nei不bu要yao將jiang按an鈕niu旋xuan出chu量liang程cheng,否fou則ze,會hui卡ka住zhu機ji械xie裝zhuang置zhi,損sun壞huai移yi液ye器qi。
(8)移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。
(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
(10)不bu要yao用yong大da量liang程cheng的de移yi液ye器qi移yi取qu小xiao體ti積ji的de液ye體ti,以yi免mian影ying響xiang準zhun確que度du。同tong時shi,如ru果guo需xu要yao移yi取qu量liang程cheng範fan圍wei以yi外wai較jiao大da量liang的de液ye體ti,請qing使shi用yong移yi液ye管guan進jin行xing操cao作zuo。
移液器的自行檢測
移液器在使用過程中,如果懷疑其精確度,可根據以下提示自行檢測:
01 移液器是否有漏氣?
1、自行檢測:目視法檢測:將吸取液體後的移液器垂直靜置15秒,觀察是否有液滴緩慢的流出。若有流出,說明有漏氣現象。壓力泵檢測:使用專用的壓力泵,檢測壓力情況,判斷是否漏氣。
2、 可能的原因:
(1)吸頭是否匹配?―― 使用原裝匹配的吸頭
(2)裝配吸頭時有無上緊?
(3)移液器內部氣密性不好?
02 環境的溫度差異是否會影響準確度?
移yi取qu液ye體ti的de溫wen度du與yu吸xi頭tou和he移yi液ye器qi的de溫wen度du不bu一yi致zhi的de情qing況kuang下xia,液ye體ti溫wen度du高gao於yu吸xi頭tou的de,移yi取qu的de液ye體ti體ti積ji會hui偏pian大da,液ye體ti溫wen度du低di於yu吸xi頭tou的de,移yi取qu的de液ye體ti體ti積ji會hui偏pian小xiao。
03 樣品的密度和水是否有明顯的區別?
大(da)部(bu)分(fen)移(yi)液(ye)器(qi)出(chu)廠(chang)前(qian)的(de)校(xiao)準(zhun)是(shi)用(yong)水(shui)作(zuo)為(wei)標(biao)準(zhun)液(ye)進(jin)行(xing)測(ce)試(shi)的(de),如(ru)果(guo)所(suo)操(cao)作(zuo)的(de)液(ye)體(ti)與(yu)水(shui)的(de)比(bi)重(zhong)有(you)很(hen)大(da)差(cha)異(yi),所(suo)給(gei)出(chu)的(de)不(bu)精(jing)確(que)度(du)和(he)不(bu)準(zhun)確(que)度(du)就(jiu)不(bu)能(neng)滿(man)足(zu),從(cong)而(er)產(chan)生(sheng)誤(wu)差(cha)。
04 吸液速度太快是否會導致體積不準確?
吸液速度太快會產生反衝和氣泡,導致移液體積不準確。
ps:移液器長時間不用時建議將刻度調至最大量程,讓彈簧恢複原形,延長移液器的使用壽命。
移液器錯誤操作及處理
做zuo為wei液ye體ti操cao作zuo中zhong最zui常chang用yong的de手shou動dong可ke調tiao精jing密mi移yi液ye器qi,在zai使shi用yong過guo程cheng中zhong有you些xie錯cuo誤wu的de操cao作zuo會hui給gei操cao作zuo本ben身shen帶dai來lai誤wu差cha,有you些xie會hui造zao成cheng機ji器qi的de損sun壞huai等deng,在zai這zhe裏li簡jian單dan總zong結jie如ru下xia:
錯誤:裝配吸頭時用移液器反複撞擊吸頭,以上緊;
正確:插入吸頭,左右輕轉旋轉上緊吸頭;
分析:撞擊會造成移液器內部齒輪組合的鬆動,長期操作會對移液器的精確性造成影響;
分析:撞擊會造成移液器內部齒輪組合的鬆動,長期操作會對移液器的精確性造成影響;
錯誤:吸頭與移液器不匹配,影響氣密性;
正確:選用與移液器匹配、有質量保證的吸頭;
分析:吸頭的不匹配,主要表現為對氣密性的影響。會直接影響移液器的精確性,通常會移液操作會小於設定量;
錯誤:吸液時,移液器傾斜吸液;
正確:垂直吸液;
分析:傾斜的狀態會造成氣壓麵的改變。會對移液精度造成影響;
錯誤:吸頭內含有未打出的液體時,移液器平置於桌麵;
正確:將移液器垂直掛在移液器支架上;
分析:吸(xi)頭(tou)內(nei)含(han)有(you)未(wei)打(da)出(chu)液(ye)體(ti),移(yi)液(ye)器(qi)平(ping)放(fang)之(zhi)後(hou)液(ye)體(ti)有(you)可(ke)能(neng)會(hui)流(liu)到(dao)移(yi)液(ye)器(qi)體(ti)內(nei)部(bu),這(zhe)會(hui)對(dui)移(yi)液(ye)器(qi)內(nei)部(bu)組(zu)件(jian)造(zao)成(cheng)影(ying)響(xiang),嚴(yan)重(zhong)的(de)會(hui)造(zao)成(cheng)損(sun)壞(huai),較(jiao)差(cha)汙(wu)染(ran)等(deng)情(qing)況(kuang)的(de)發(fa)生(sheng);
錯誤:用大量程的移液器移取小體積的液體;
正確:移液體積需保證在移液器所提供的量程範圍之內才符合不準確度和不精確度的要求;
分析:因為空氣墊的存在,是造成移液器不準確度的主要原因。移液器的選擇應該是最大量程,最接近目的液體轉移量的選型原則;
錯誤:吸取具有強揮發性的液體;
正確:不建議用普通移液器做強揮發型液體轉移;
分析:如果一定要移取強揮發性的液體,應該在移液結束後立刻拆開移液器,讓蒸汽揮發,同時,建議使用外置活塞式移液器;
錯誤:吸液速度和放液速度過快;
正確:慢吸慢放;
分析:快吸對於1mL及以上量程的移液器,很容易造成液體上衝,過快的放液會增加液體的殘留量。
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