danbainongducedingdefangfayouhenduo，danmeizhongfangfadouyouqitedianhejuxianxing，yinerxuyaozailejiegezhongfangfadejichushanggenjubutongqingkuangxuanyongqiadangdefangfa，yimanzu不同的要求。例如凱氏定氮法結果精確

，但操作複雜
，用於大批量樣品的測試則不太合適；Lowry法精確度較高
，但是比較費時，且每步的時間要求相對嚴格
；Bradford法靈敏簡便

，但易受去垢劑的影響；BCA法以其試劑穩定
，抗幹擾能力強，結果穩定
，靈敏度高而受歡迎。

1. Bradford法：

原理：在酸性環境中
，蛋白質結合考馬斯亮藍G250染料
，導致染料的吸收峰發生位移
，從紅棕色形式（吸收峰 465nm）轉化為藍色形式（吸收峰 610nm）。這兩種形式在 595nm 處光吸收差異most大，因此 595nm 是測定考馬斯染料-蛋白複合物的藍色的best波(bo)長(chang)。結(jie)合(he)到(dao)每(mei)個(ge)蛋(dan)白(bai)質(zhi)分(fen)子(zi)上(shang)的(de)考(kao)馬(ma)斯(si)染(ran)料(liao)分(fen)子(zi)數(shu)大(da)致(zhi)與(yu)蛋(dan)白(bai)所(suo)帶(dai)正(zheng)電(dian)荷(he)的(de)數(shu)量(liang)成(cheng)正(zheng)比(bi)，因(yin)此(ci)通(tong)過(guo)比(bi)色(se)法(fa)可(ke)以(yi)測(ce)定(ding)溶(rong)液(ye)中(zhong)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)含(han)量(liang)。

優點：

1. 靈敏度高，可以檢測到1μg/ml的蛋白質濃度。

2. 反應時間短
，反應時間隻需5-10分鍾。

3. 操作簡單
，隻需加入試劑，混合均勻即可。

4. 適用範圍廣

，適用於大部分類型的蛋白質。

5. 不受溶液中還原劑的影響。

缺點：

1. 受幹擾：某些離子和化合物會幹擾測定結果，去垢劑（表麵活性劑）會產生強烈幹擾
，使得與許多常用的緩衝液不兼容。

2. 靈敏度不穩定：不同蛋白質的靈敏度不同，有些蛋白質可能無法被檢測到。肽或蛋白質的分子量必須大於 3,000 道爾頓才能被檢出。

3. 需要標準曲線：需要製備標準曲線來計算蛋白質濃度
，增加了操作步驟。

近來市場上已出現能兼容去垢劑的Bradford法蛋白定量試劑盒
，可以兼容各種常用的蛋白緩衝液，大大拓展了應用範圍。