(1)顆粒度是指柱填料的顆粒直徑的大小。實際上色譜柱上所標的粒徑是一個平均值。如粒徑“5μm”並不是柱中填料所有的顆粒直徑都是5μm，shijishangyouyigekelifenbudu。zhezhongfenbududuizhufanyajizhuxiaoyouzhongyaozuoyong。yibanlaishuo，pingjunkeliduyuexiao
，kelifenbuduyuexiao，sepuzhuxiaoyuegao，fanyayiyuegao。muqianC18柱填料粒徑在4～10μm之間

(2)kongjingshizhitianliaokelijiandekongjianxi。yibansuoshuodekongjingshizhitianliaodepingjunkongjing。qiuxingtianliaozhuangzhuhoupingjunkongjingfenbubijiaozhai，zhuchuangjiegoujunyun
，zhuxiaogao，zhongxianxinghao；無wu定ding形xing填tian料liao平ping均jun孔kong徑jing分fen布bu較jiao寬kuan，柱zhu床chuang結jie構gou不bu均jun勻yun，流liu動dong相xiang線xian性xing速su度du不bu均jun勻yun

，譜pu帶dai擴kuo寬kuan。平ping均jun孔kong徑jing的de大da小xiao對dui分fen離li大da分fen子zi化hua合he物wu有you較jiao大da的de影ying響xiang，在zai分fen離li含han有you較jiao大da分fen子zi的de樣yang品pin時shi可ke能neng會hui有you分fen子zi排pai阻zu效xiao應ying，或huo產chan生sheng吸xi附fu效xiao應ying從cong而er影ying響xiang定ding量liang的de回hui收shou率lv及ji準zhun確que度du。因yin而er在zai用yong反fan相xiang色se譜pu分fen離li諸zhu如ru蛋dan白bai或huo多duo肽tai樣yang品pin時shi應ying考kao慮lv選xuan用yong大da孔kong徑jing(如30 nm)的反相柱填料。孔體積作為矽膠多孔性的參數

，在分離分析較大分子化合物時可作參考，選用較大孔體積的反相柱填料。

(3)化hua學xue鍵jian合he相xiang填tian料liao在zai高gao效xiao液ye相xiang色se譜pu法fa中zhong占zhan有you極ji重zhong要yao的de地di位wei。它ta可ke以yi鍵jian合he極ji性xing較jiao大da的de有you機ji基ji團tuan，采cai用yong極ji性xing較jiao小xiao的de溶rong劑ji作zuo流liu動dong相xiang。亦yi可ke鍵jian合he極ji性xing較jiao小xiao的de有you機ji基ji團tuan，選xuan用yong極ji性xing較jiao大da的de溶rong劑ji作zuo流liu動dong相xiang。C18色譜柱是以矽烷化鍵合型(Si-O-Si-C)存在的，這類鍵合反應目前應用最為普遍。如以十八烷基三氯矽烷與全多孔型矽膠M-Porasil-C18反應生成烷基化學鍵合相
，商品名為M-Bondapak-C18。

(4)tanhanliangjitianliaozhongdehantanliang。chuantongdeceliangjishushijiangtianliaojiaredaotanqingjianduanlie，ranhoutongguocedingsunshidezhonglianghuoxingchengdeeryanghuatanlaijisuantanhanliang。keyitongguozengjiatanjiandechangduhuozengjiajianhemidulaizengjiatanhanliang。tanhanliangzengjia，zhuzidebaoliuzhizengjia。jianhexiangdesepuxingweiyujianhemiduyouguan，yeyuguijiaodemidujitianliaodebiaomianjiyouguan，tianliaodemiduyuegao
，tianzhusuoxudeguijiaoliangyueduo，zhuzidehantanliangyeyuegao。ruguoyong2種不同密度相同碳含量的填料填充柱子


，其保留行為將明顯不同。因此
，單獨以碳含量來預測色譜行為是不夠的。

(5)C18矽烷化試劑是一個大於2nm大分子
，因此會與已鍵合在相鄰的矽醇基上的C18矽(gui)烷(wan)化(hua)試(shi)劑(ji)產(chan)生(sheng)嚴(yan)重(zhong)的(de)立(li)體(ti)位(wei)阻(zu)。其(qi)結(jie)果(guo)導(dao)致(zhi)在(zai)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)有(you)大(da)量(liang)的(de)殘(can)留(liu)矽(gui)醇(chun)基(ji)沒(mei)有(you)與(yu)矽(gui)烷(wan)化(hua)試(shi)劑(ji)反(fan)應(ying)
，這(zhe)些(xie)極(ji)性(xing)的(de)矽(gui)醇(chun)基(ji)在(zai)一(yi)定(ding)色(se)譜(pu)條(tiao)件(jian)下(xia)會(hui)與(yu)堿(jian)性(xing)化(hua)合(he)物(wu)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)引(yin)起(qi)峰(feng)形(xing)拖(tuo)尾(wei)，從(cong)而(er)可(ke)影(ying)響(xiang)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)。這(zhe)些(xie)問(wen)題(ti)在(zai)一(yi)定(ding)程(cheng)度(du)上(shang)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)烷(wan)基(ji)化(hua)處(chu)理(li)加(jia)以(yi)克(ke)服(fu)。烷(wan)基(ji)化(hua)處(chu)理(li)是(shi)在(zai)鍵(jian)合(he)相(xiang)上(shang)完(wan)成(cheng)的(de)獨(du)立(li)反(fan)應(ying)

，以(yi)減(jian)少(shao)在(zai)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)的(de)矽(gui)醇(chun)基(ji)。烷(wan)基(ji)化(hua)處(chu)理(li)采(cai)用(yong)小(xiao)分(fen)子(zi)(如三甲矽烷)的試劑，其空間位阻遠小於C18基團。大多數固定相僅有30%可覆蓋的鍵合位置。據報道
，通過某些極活躍的化學試劑及特殊的反應條件，最高的覆蓋量可達50%。很好地了解矽膠鍵合相的物理特性將有助於在高效液相色譜的反應中選擇合適的色譜柱。表麵上看C18柱雖然化學官能團相同，而實際上不同品牌的C18柱性能可能有很大差別，從而產生不同的分離結果。

1.2 C₁₈柱的規格對色譜柱的影響　

柱填料的選擇關係到色譜分離的可能性，而柱規格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測能力及每次分析的溶劑消耗等。柱規格包括兩方麵：柱內徑和柱長度。柱內徑，分析型一般為2～6 mm,製備型20 mm，大者可達80 mm
；柱長度，分析型5～30 cm


，製備型15～50 cm。一(yi)般(ban)來(lai)說(shuo)，柱(zhu)內(nei)徑(jing)不(bu)影(ying)響(xiang)分(fen)離(li)度(du)與(yu)分(fen)析(xi)時(shi)間(jian)的(de)關(guan)係(xi)。今(jin)天(tian)

，柱(zhu)技(ji)術(shu)已(yi)發(fa)展(zhan)到(dao)不(bu)同(tong)柱(zhu)內(nei)徑(jing)的(de)柱(zhu)子(zi)能(neng)夠(gou)具(ju)有(you)相(xiang)同(tong)的(de)性(xing)能(neng)。不(bu)同(tong)內(nei)徑(jing)的(de)柱(zhu)子(zi)又(you)各(ge)具(ju)特(te)點(dian)，對(dui)相(xiang)同(tong)的(de)分(fen)析(xi)時(shi)間(jian)和(he)分(fen)離(li)度(du)來(lai)說(shuo)，內(nei)徑(jing)大(da)的(de)柱(zhu)子(zi)比(bi)內(nei)徑(jing)小(xiao)的(de)柱(zhu)子(zi)多(duo)消(xiao)耗(hao)溶(rong)劑(ji)。另(ling)一(yi)方(fang)麵(mian)，較(jiao)小(xiao)內(nei)徑(jing)的(de)柱(zhu)子(zi)對(dui)相(xiang)同(tong)的(de)檢(jian)測(ce)信(xin)號(hao)來(lai)說(shuo)所(suo)需(xu)樣(yang)品(pin)量(liang)亦(yi)較(jiao)少(shao)。因(yin)此(ci)，在(zai)樣(yang)品(pin)量(liang)有(you)限(xian)時(shi)，可(ke)使(shi)用(yong)小(xiao)內(nei)徑(jing)柱(zhu)。柱(zhu)長(chang)度(du)增(zeng)加(jia)雖(sui)可(ke)改(gai)善(shan)分(fen)離(li)效(xiao)果(guo)，但(dan)阻(zu)力(li)也(ye)隨(sui)之(zhi)增(zeng)加(jia)，必(bi)須(xu)提(ti)高(gao)入(ru)口(kou)壓(ya)力(li)。柱(zhu)壓(ya)是(shi)同(tong)時(shi)影(ying)響(xiang)增(zeng)加(jia)分(fen)離(li)度(du)和(he)減(jian)少(shao)分(fen)析(xi)時(shi)間(jian)的(de)主(zhu)要(yao)障(zhang)礙(ai)。分(fen)離(li)度(du)、分析時間及柱壓三者相互製約
，選擇好其中兩者，則第3個因素也就選好了。長柱可以給出高分離度，短柱可提供快速分離，我們可以根據樣品情況去選用合適的色譜柱。

1.3 C₁₈柱選用的基本原則　

(1)選用經過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現象。

(2)選用含碳量高的柱子
，增加保留值。

(3)選用較短的柱子(如15 cm，7.5 cm)。

(4)選用小顆粒度的填料。

(5)對分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。