玻璃儀器
正(zheng)確(que)的(de)使(shi)用(yong)各(ge)種(zhong)玻(bo)璃(li)儀(yi)器(qi)對(dui)於(yu)減(jian)少(shao)人(ren)員(yuan)傷(shang)害(hai)事(shi)故(gu)及(ji)保(bao)證(zheng)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)安(an)全(quan)是(shi)非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao)的(de)。實(shi)驗(yan)室(shi)中(zhong)不(bu)允(yun)許(xu)使(shi)用(yong)破(po)損(sun)的(de)玻(bo)璃(li)儀(yi)器(qi)。對(dui)於(yu)不(bu)能(neng)修(xiu)複(fu)的(de)玻(bo)璃(li)儀(yi)器(qi),應(ying)當(dang)按(an)照(zhao)廢(fei)物(wu)處(chu)理(li)。在(zai)修(xiu)複(fu)玻(bo)璃(li)儀(yi)器(qi)前(qian)應(ying)清(qing)除(chu)其(qi)中(zhong)所(suo)殘(can)留(liu)的(de)化(hua)學(xue)藥(yao)品(pin)。實(shi)驗(yan)室(shi)人(ren)員(yuan)在(zai)使(shi)用(yong)各(ge)種(zhong)玻(bo)璃(li)器(qi)皿(min)時(shi),應(ying)注(zhu)意(yi)以(yi)下(xia)事(shi)項(xiang):
(1)在(zai)橡(xiang)皮(pi)塞(sai)或(huo)橡(xiang)皮(pi)管(guan)上(shang)安(an)裝(zhuang)玻(bo)璃(li)管(guan)時(shi),應(ying)戴(dai)防(fang)護(hu)手(shou)套(tao)。先(xian)將(jiang)玻(bo)璃(li)管(guan)的(de)兩(liang)端(duan)用(yong)火(huo)燒(shao)光(guang)滑(hua),並(bing)用(yong)水(shui)或(huo)油(you)脂(zhi)塗(tu)在(zai)接(jie)口(kou)處(chu)作(zuo)潤(run)滑(hua)劑(ji)。對(dui)粘(zhan)結(jie)在(zai)一(yi)起(qi)的(de)玻(bo)璃(li)儀(yi)器(qi),不(bu)要(yao)試(shi)圖(tu)用(yong)力(li)拉(la),以(yi)免(mian)傷(shang)手(shou)。
(2)破碎玻璃應放入利器盒(供應室可領利器盒)處chu理li。較jiao大da的de破po碎sui玻bo璃li應ying放fang入ru專zhuan門men的de加jia厚hou箱xiang子zi,並bing封feng裝zhuang好hao,貼tie明ming警jing示shi標biao識shi,等deng待dai學xue院yuan處chu理li。破po碎sui玻bo璃li在zai放fang入ru垃la圾ji桶tong前qian,應ying用yong水shui衝chong洗xi幹gan淨jing。
(3)不要將加熱的器皿放在過冷的台麵上,以防止溫度急劇變化而引起玻璃儀器破碎。
生物安全櫃
1、應參考國家標準和相關文獻,對所有可能的使用者都介紹生物安全櫃的使用方法和局限性。應當發給工作人員書麵的規章、安全手冊或操作手冊。特別需要明確的是,當出現溢出﹑破損或不良操作時,安全櫃就不再能保護操作者。
2、生物安全櫃運行正常時才能使用。
3、生物安全櫃在使用中不能打開玻璃觀察擋板。
4、安全櫃內應盡量少放置器材或標本,不能影響後部壓力排風係統的氣流循環。
5、安an全quan櫃gui內nei不bu能neng使shi用yong本ben生sheng燈deng,否fou則ze燃ran燒shao產chan生sheng的de熱re量liang會hui幹gan擾rao氣qi流liu並bing可ke能neng損sun壞huai過guo濾lv器qi。允yun許xu使shi用yong微wei型xing電dian加jia熱re器qi,但dan最zui好hao使shi用yong一yi次ci性xing無wu菌jun接jie種zhong環huan。
6、所有工作必須在工作台麵的中後部進行,並能夠通過玻璃觀察擋板看到。
7、盡量減少操作者身後的人員活動。
8、操作者不應反複移出和伸進手臂以免幹擾氣流。
9、不要使實驗記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵,因為這將幹擾氣體流動,引起物品的潛在汙染和操作者的暴露。
10、工作完成後以及每天下班前,應使用適當的消毒劑對生物安全櫃的表麵進行擦拭。
11、在安全櫃內的工作開始前和結束後,安全櫃的風機應至少運行5min。
12、在生物安全櫃內操作時,不能進行文字工作。
13、通過在生物安全櫃內人工產生微生物(枯草杆菌芽孢) ,在生物安全櫃外用培養皿采集枯草杆菌芽孢判定生物安全櫃對工作人員的防護能力。
超淨台
1、使用前15-20分鍾用75%酒精擦拭工作台麵,將實驗所需的物品放於台麵中間工作區的兩側,使用的移液器吸頭、試管、培養皿等均事先滅菌。
2、使用前15-20分鍾開紫外燈,對工作區域進行照射殺菌,將細菌、病毒全部殺死。為避免物品過多而導致紫外滅菌不徹底,台麵平時隻需放移液器、75%酒精噴壺、75%酒精棉、接種器、酒精燈、記號筆和打火機等。
3、使用前10分鍾將通風機啟動,以排除臭氧等有害氣體。
4、操作時將照明燈開關打開,關掉殺菌燈。
5、操作前用75%酒精棉擦洗雙手和前臂。任何進入超淨台的物品都必須經過75%酒精擦拭後才可進入超淨台。
6、工作台麵不要存放不必要的物品,以保持工作區的潔淨氣流不受幹擾。打開各種瓶蓋前先過火,以固定灰塵,打開的瓶口、試管口過火,鑷子、接種器使用前應經火灼燒以再除菌。
7、不要在工作台麵上記錄,工作時應盡量避免明顯擾亂氣流的動作。
8、工作完畢後,也必須以75%酒精擦拭台麵,並且將使用過的器具材料歸定位,垃圾清理幹淨,停止風機運行,關掉照明燈,將上述不屬於超淨台麵的個人物品拿走。
9、操作員需嚴格按照上述規程實驗,使用移液器時用酒精棉擦拭移液器頭。吸頭等用前需用報紙包好並滅菌,且僅限個人使用。
10、為配合發酵工作,避免染菌,超淨台周圍需定期進行打掃並消毒。用福爾馬林(40%甲醛)加少量高錳酸鉀定期對房間進行密閉熏蒸。
注:超淨台進風口的背麵或正麵的下方,金屬網罩內有一普通泡沫塑料片或無紡布,用以阻擋大顆粒塵埃,應常檢查、拆(chai)洗(xi),如(ru)發(fa)現(xian)泡(pao)沫(mo)塑(su)料(liao)老(lao)化(hua),要(yao)及(ji)時(shi)更(geng)換(huan)。工(gong)作(zuo)台(tai)麵(mian)正(zheng)麵(mian)的(de)金(jin)屬(shu)網(wang)罩(zhao)內(nei)是(shi)超(chao)級(ji)濾(lv)清(qing)器(qi),超(chao)級(ji)濾(lv)清(qing)器(qi)也(ye)可(ke)更(geng)換(huan),如(ru)因(yin)使(shi)用(yong)年(nian)久(jiu),塵(chen)粒(li)堵(du)塞(sai),風(feng)速(su)減(jian)小(xiao),不(bu)能(neng)保(bao)證(zheng)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)時(shi),則(ze)可(ke)換(huan)上(shang)新(xin)的(de)。
培養箱
培養箱是培養微生物的主要設備,可用於細菌、細胞的培養繁殖。其原理是應用人工的方法在培養箱內造成微生物和細胞、細菌生長繁殖的人工環境,如控製一定的溫度、濕度、氣體等。培養箱使用過程整體要注意以下幾點:
1、培養箱應放置在清潔整齊、幹燥通風的工作間內,箱內的培養物不宜放置過擠,之間應保持適當間隔,以利冷(熱)空氣的對流循環。無論放入或取出物品應隨手關門,以免溫度波動。
2、帶有製冷壓縮機的要遵守冰箱保養的注意事項,如保持電壓穩定、不要過度傾斜、不要短時間內反複開關儀器、及時清掃散熱器上的灰塵等。
3、隔水式培養箱應注意先加水再通電,同時應經常檢查水位,及時添加水。
4、開(kai)關(guan)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)箱(xiang)要(yao)小(xiao)心(xin),培(pei)養(yang)箱(xiang)打(da)開(kai)後(hou)要(yao)盡(jin)快(kuai)關(guan)上(shang),先(xian)要(yao)扭(niu)緊(jin)玻(bo)璃(li)門(men),再(zai)關(guan)上(shang)培(pei)養(yang)箱(xiang)門(men)。培(pei)養(yang)箱(xiang)鐵(tie)架(jia)子(zi)和(he)盛(sheng)水(shui)托(tuo)盤(pan)要(yao)定(ding)時(shi)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)處(chu)理(li)。隨(sui)時(shi)留(liu)意(yi)最(zui)底(di)層(ceng)的(de)盛(sheng)水(shui)托(tuo)盤(pan),必要時補充高壓滅菌水。隨時留意細胞培養箱二氧化碳濃度,必要時立即更換二氧化碳鋼瓶。
搖床
1、電源必須有可靠的保護接地線,禁止非專業人員拆卸電器控製部分。
2、儀器長時間低溫運行時,要注意除霜或按期做加熱驅潮處理。
3、搖床高速旋轉工作時,為避免儀器產生大的振動,所占的培養試劑瓶應在搖台上對稱放置,各瓶的培養液應大致相等。
4、儀器長期不用時,特別是在雨季或潮濕季節,應定期通電運行5-8h以驅除設備電氣元件吸附的水分。
5、帶有製冷壓縮機的要遵守冰箱保養的注意事項,如保持電壓穩定、不要過度傾斜、不要短時間內反複開關儀器、及時清掃散熱器上的灰塵等。
6、務必將東西放牢,並在啟動前確認別人的東西已經放牢。
7、一定要在搖床開啟直至生至最大轉速後,搖床運行平穩後才能離開。
8、若不慎將液體灑出,一定要將其擦幹淨,防止滋生雜菌。
9、若有東西掉入機芯或卡在搖板底下無法清理,請關閉搖床轉移所有培養物,並第一時間告知負責人。嚴禁帶故障運行。
移液器
移液器操作規範和使用注意事項:
1、設定移液體積
從大量程調節至小量程為正常調節方法,逆時針旋轉刻度即可;從小量程調節至大量程時,應先調至超過設定體積刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證移液器的精確度。
2、裝配移液槍頭
將jiang移yi液ye槍qiang垂chui直zhi插cha入ru吸xi頭tou,左zuo右you旋xuan轉zhuan半ban圈quan,上shang緊jin即ji可ke。用yong移yi液ye器qi撞zhuang擊ji吸xi頭tou的de方fang法fa是shi非fei常chang不bu可ke取qu的de,長chang期qi這zhe樣yang操cao作zuo回hui導dao致zhi移yi液ye器qi的de零ling件jian因yin撞zhuang擊ji而er鬆song散san,嚴yan重zhong會hui導dao致zhi調tiao節jie刻ke度du的de旋xuan鈕niu卡ka住zhu搜sou索suo。
3、吸液及放液
垂直吸液,吸頭尖端浸入液麵3mm以下,吸液前槍頭先在液體中預潤洗;慢吸慢放,放液時如果量很小則應吸頭尖端可靠容器內壁。
4、吸有液體的移液槍不應平放,槍頭內的液體很容易汙染槍內部而可能導致槍的彈簧生鏽。
5、移液槍在每次實驗後應將刻度調至最大,讓彈簧回複原型以延長移液槍的使用壽命。
6、吸取液體時一定要緩慢平穩地鬆開拇指,絕不允許突然鬆開,以防將溶液吸入過快而衝入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。
7、為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然後再正式移液,因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層”液膜”,造成排液量偏小而產生誤差。
8、濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。
9、可用分析天平稱量所取純水的重量並進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。
10、zaishezhiliangchengshi,qingzhuyixuanzhuandaosuoxuliangcheng,shuziqingqingchuchuzaixianshichuangzhong,suosheliangchengzaiyiyeqiliangchengfanweineibuyaojianganniuxuanchuliangcheng,fouzehuikazhujixiezhuangzhi,sunhuaileyiyeqi。
11、移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
12、不(bu)要(yao)用(yong)大(da)量(liang)程(cheng)的(de)移(yi)液(ye)器(qi)移(yi)取(qu)小(xiao)體(ti)積(ji)的(de)液(ye)體(ti),以(yi)免(mian)影(ying)響(xiang)準(zhun)確(que)度(du)。同(tong)時(shi),如(ru)果(guo)需(xu)要(yao)移(yi)取(qu)量(liang)程(cheng)範(fan)圍(wei)以(yi)外(wai)較(jiao)大(da)量(liang)的(de)液(ye)體(ti),請(qing)使(shi)用(yong)移(yi)液(ye)管(guan)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
移液器的校準方法:
1、準備超純水、萬分之一天平(如果校正0.5~2.5ul量程的,至少要十萬分之一的天平)、溫濕度計、恒溫室,還需準備一個小口容器,防止水分揮發。
2、按移液器總量程的100%、50%、10%分別進行第三和第四步。
3、吸(xi)頭(tou)要(yao)反(fan)複(fu)吸(xi)取(qu)超(chao)純(chun)水(shui)三(san)次(ci)後(hou),吸(xi)取(qu)固(gu)定(ding)容(rong)積(ji)的(de)超(chao)純(chun)水(shui),推(tui)入(ru)放(fang)置(zhi)在(zai)天(tian)平(ping)上(shang)的(de)小(xiao)口(kou)容(rong)器(qi)中(zhong),待(dai)數(shu)據(ju)穩(wen)定(ding)讀(du)取(qu)天(tian)平(ping)數(shu)值(zhi),同(tong)時(shi)記(ji)錄(lu)溫(wen)度(du)。重(zhong)複(fu)10次。
4、將測量的數據用iso8655中的計算公式計算獲得對應溫度下的體積,取平均值。
5、根據三個測量點的偏差,用移液器專用的校正扳手(不同品牌的移液器的校正窗和扳手的形式是不同)通過移液器的校正窗進行調整。
6、重複3、4步,直至偏差在ISO8655的要求內為止。
如果是電動移液器,那校正就簡單多了,一般測量完三個校正點的數據後,直接進入校正界麵,將誤差數據輸入就可以自動校正了。
yibanhaishijiaogeichangjiahuozhedailishangjinxingxiaozhengbijiaofangxin,yibandiquzongdaidoushigoumailezidongxiaozhengpingtaide,jiangyiyeqifangzaishangmian,jiqizidongjinxingcelianghexiaozhenggongzuode。
熒光生物顯微鏡
顯微鏡的操作方法及注意事項
1、使用分析測試中心顯微鏡,必須預約和登記。開機先開顯微鏡電源,需要用熒光時再開熒光;開機後,放上待觀察樣品,首先明場觀察(bright field)時(shi),請(qing)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)物(wu)鏡(jing),物(wu)鏡(jing)倍(bei)數(shu)從(cong)小(xiao)到(dao)大(da)觀(guan)察(cha)。將(jiang)樣(yang)品(pin)置(zhi)於(yu)載(zai)物(wu)台(tai)上(shang),調(tiao)節(jie)高(gao)度(du)和(he)亮(liang)度(du)。轉(zhuan)動(dong)載(zai)物(wu)台(tai)時(shi),請(qing)輕(qing)輕(qing)轉(zhuan)動(dong)。用(yong)完(wan)需(xu)將(jiang)亮(liang)度(du)調(tiao)到(dao)最(zui)低(di)再(zai)離(li)開(kai)。
2、觀察熒光時,首先打開熒光光源,等待幾分鍾後再觀察。選擇合適的激發光,觀察完必須將熒光關閉再離開。
3、拍攝圖像時,在相連接的電腦上打開相應軟件,將顯微鏡的相應旋鈕打到view上,調節曝光時間等參數。用完需要將光源和照相機關閉。
4、用yong完wan後hou,請qing核he對dui是shi否fou關guan閉bi熒ying光guang光guang源yuan和he顯xian微wei鏡jing電dian源yuan,聚ju光guang鏡jing是shi否fou蓋gai上shang蓋gai子zi,載zai物wu台tai是shi否fou放fang置zhi低di位wei,物wu鏡jing是shi否fou調tiao至zhi無wu物wu鏡jing對dui準zhun載zai物wu台tai,然ran後hou罩zhao上shang目mu鏡jing,蓋gai上shang紅hong布bu袋dai防fang灰hui塵chen。
5、請在記錄本上如實登記。
6、yiqideguangyuanshiyoushoumingde,qingbenzhejieyueyuanze,wanchengshiyanshiqingjishiguandeng。ruoliangcishiyongjiangeshijianduankeyibubiguandeng,ruojiangeshijianchangqingjishiguandeng。yinweijingchangkaiguanyiqiyehuiyingxiangguangyuanshouming。
7、物(wu)鏡(jing)不(bu)可(ke)用(yong)手(shou)或(huo)者(zhe)其(qi)他(ta)物(wu)體(ti)觸(chu)摸(mo)。所(suo)以(yi)觀(guan)察(cha)樣(yang)品(pin)盡(jin)量(liang)蓋(gai)蓋(gai)玻(bo)片(pian),如(ru)果(guo)沒(mei)蓋(gai)蓋(gai)玻(bo)片(pian)的(de)請(qing)務(wu)必(bi)注(zhu)意(yi)樣(yang)品(pin)不(bu)得(de)沾(zhan)到(dao)並(bing)汙(wu)染(ran)物(wu)鏡(jing),若(ruo)不(bu)小(xiao)心(xin)汙(wu)染(ran)了(le)物(wu)鏡(jing),請(qing)及(ji)時(shi)用(yong)擦(ca)鏡(jing)紙(zhi)按(an)“水→70%乙醇→100%乙醇”步驟從中心向外螺旋轉圈清理對應物鏡。
成像係統
凝膠成像分析係統可以應用在蛋白電泳凝膠,DNA凝膠,樣品進行圖像采集並進行定性和定量分析。
使用注意事項:
1、注意開機順序,先開凝膠成像係統,再打開電腦進入軟件。
2、紫外凝膠照相時要防止EB汙染儀器,凝膠成像係統的門不能用汙染的手套接觸,進行軟件操作時同樣不能被汙染的手套接觸。
3、在使用紫外光源照相的過程中,不可以打開凝膠成像係統前麵板。
4、照相後將廢膠取出,並用較軟的紙擦拭幹淨。
5、調焦時要輕,動作不要劇烈。
6、保持觀測室內環境幹燥,及時將遺留在觀測板上的水或其他液體檫幹。
7、使用儀器時,要將門及觀測台關緊,否則將無法正常使用紫外燈。
8、盡可能不要將電腦連接到因特網或局域網上,同時在電腦上安裝殺毒軟件,做到專機專用。
9、較長時間不用儀器時,請將儀器用防塵罩蓋上。
10、為延長燈管的使用壽命,請觀測好凝膠後及時關閉光源。
pH計
pH計使用注意事項:
1、儀器標定校正的次數取決於試樣、電極性能及對測量的精確度要求,一般經一次標定後可連續使用一周或更長時間,pH計校準時使用對應校準液,按照儀器說明書校準,在下列情況時,儀器必須重新標定:
(a)長期未用的電極和新換的電極。
(b)測量濃酸(pH<2)以後,或測量濃堿(ph>12)以後。
(c)測量含有氟化物的溶液和較濃的有機溶液以後。
(d)被測溶液溫度與標定時的溫度相差過大時。
2、pH電dian極ji前qian端duan的de保bao護hu瓶ping內nei有you適shi量liang電dian極ji浸jin泡pao溶rong液ye,電dian極ji頭tou浸jin泡pao其qi中zhong,以yi保bao持chi玻bo璃li球qiu泡pao和he液ye接jie界jie的de活huo化hua。測ce量liang時shi旋xuan鬆song瓶ping蓋gai,拔ba出chu電dian極ji,用yong純chun水shui洗xi淨jing即ji可ke使shi用yong。使shi用yong後hou再zai將jiang電dian極ji插cha進jin並bing旋xuan緊jin瓶ping蓋gai,以yi防fang止zhi溶rong液ye滲shen出chu,如ru發fa現xian保bao護hu瓶ping中zhong的de浸jin泡pao液ye有you混hun濁zhuo,發fa黴mei現xian象xiang,應ying及ji時shi洗xi淨jing,並bing調tiao換huan新xin的de浸jin泡pao液ye。
3、電極浸泡液的配製:電極浸泡液即為3MKCl。電極應避免長期浸泡在純水、蛋白質溶液和酸性氟化物溶液中,並防止和有機矽油脂接觸。
4、經常保持儀器的清潔和幹燥,特別要注意保持電計、電極插口的高度清潔和幹燥,否則將導致測量失準或失效,如有沾汙可用醫用棉花和無水酒精揩淨並吹幹。
5、fuhedianjiqianduandeminganboliqiupao,bunengyuyingwujiechu,renheposunhecamaodouhuishidianjishixiao。celiangqianhecelianghoudouyingyongchunshuiqingxidianji,qingxihoujiangdianjishuaigan,buyaoyongzhijincashiqiupao,zheyanghuishidianjidianweibuwending,yanchangxiangyingshijian。zaizhanchouxingshiyangzhongcedinghou,dianjixuyongchunshuifanfuchongxiduoci,yichuquzhanzaibolimoshangdeshiyang,huoxianyongshiyiderongjiqingxi,zaiyongchunshuixiqurongji。
6、電(dian)極(ji)經(jing)長(chang)期(qi)使(shi)用(yong),或(huo)被(bei)測(ce)溶(rong)液(ye)中(zhong)含(han)有(you)易(yi)汙(wu)染(ran)敏(min)感(gan)玻(bo)璃(li)球(qiu)泡(pao)或(huo)堵(du)塞(sai)液(ye)接(jie)界(jie)的(de)物(wu)質(zhi),而(er)使(shi)電(dian)極(ji)鈍(dun)化(hua),其(qi)現(xian)象(xiang)是(shi)敏(min)感(gan)梯(ti)度(du)降(jiang)低(di),響(xiang)應(ying)慢(man),讀(du)數(shu)不(bu)準(zhun),可(ke)根(gen)據(ju)不(bu)同(tong)情(qing)況(kuang)采(cai)取(qu)下(xia)列(lie)措(cuo)施(shi):
(a)玻璃球泡汙染老化:將電極用0.1mol/L稀鹽酸浸泡24小時,用純水洗淨,然後再用電極浸泡液浸泡24小時,如果鈍化比較嚴重,也可將電極下端浸泡在4% HF(氫氟酸)中3~5秒種,用純水洗淨,然後在電極浸泡液中浸泡24小時,使之複新。
(b)玻璃球泡和液接界汙染的清洗:(供參考)
汙染物 清洗劑
無機金屬氧化物 低於1mol/L稀酸
有機油脂類物 稀洗滌劑(弱堿性)
樹脂高分子物質 稀酒精、乙醚
蛋白質血球沉澱物 酸性酶溶液(如食母生片)
顏料類物質 稀漂白液、過氧化物
電極外殼的材料是聚碳酸酯,選用清洗劑時請注意,如四氯化碳、三氯乙稀、四氫呋喃等請慎用,因為這些試劑會溶解聚碳酸酯材料,從而使電極失效。
7、儀器一般配有三瓶pH校正溶液(pH4.00、pH6.86和pH9.18各一瓶),這三瓶不同顏色的校正緩衝溶液內含防黴消毒劑,因此可以在環境溫度下長期存放而不變質。
8、pH電極電極斜率低於85% 時(視測試精度和範圍而定,且校正緩衝溶液要準確),則應考慮對電極進行活化處理或更換電極。
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