要提高液相色譜的效率可從以下幾方麵入手。以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。（2）減少固定相的量，但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。（3）減小固定相的顆粒度，但不能過分，過分後色譜柱的滲透率也會減小。（4）選用低粘度的移動相，以利於快速傳質，但卻不利於多組份分析。（5）適當提高柱溫，可降低移動相的粘度，但柱效和分離度也隨之降低。（6）盡量減小停滯移動相的體積，但卻加快了移動相的流速。從以上介紹可看出，zaisepufenxiguochengzhong，gezhongyinsushihuxianglianxihezhiyuede。zhiyoutongguoduizhuxiaozhidegenzongcesuan，duizijifenxifangfabuduandeyanjiuheshijian，cainengzhaodaozuijiadegongzuotiaojian。我們也應記住柱效值並不足以預測在所有條件下的柱性能，對大多數色譜工作者來說，柱性能指的是色譜柱用於特定分離的能力，而僅僅有高柱效並不能保證這種分離能力。不管用什麼特定的測試方法，都會有幾個參數影響柱效的測定。這些參數包括：洗脫液的成分和粘度及其線流速，測定塔板數所用的溶質、溫度、柱長、填料裝填方式、顆粒度，還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態曲線來計算理論塔板數。因此計算柱效（以理論塔板數n為單位）的公式習慣上定義為：式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從測峰寬的基線量起）有關的常數,ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。假如一個色譜峰真是正態峰型，那麼每種計算方法都會得到同樣的結果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向於得到對稱峰型的溶質，由於柱內的槽或空隙，也會出現非正態峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對於這些峰型，越在峰的高處測量，計算的理論塔板數值就越大（準確性越低）。在許多情況下，色譜工作者需要能反映整個峰型（包括拖尾）的柱效值,同時為了保證定量的重複性，也(ye)需(xu)要(yao)色(se)譜(pu)峰(feng)很(hen)好(hao)的(de)對(dui)稱(cheng)性(xing)。這(zhe)時(shi)對(dui)色(se)譜(pu)峰(feng)非(fei)對(dui)稱(cheng)性(xing)最(zui)敏(min)感(gan)的(de)計(ji)算(suan)方(fang)法(fa)最(zui)適(shi)合(he)。如(ru)果(guo)目(mu)的(de)僅(jin)僅(jin)是(shi)要(yao)監(jian)測(ce)色(se)譜(pu)柱(zhu)從(cong)第(di)一(yi)次(ci)使(shi)用(yong)到(dao)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)結(jie)束(shu)這(zhe)一(yi)過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)柱(zhu)效(xiao)，那麼以上任何一種方法都可以,應選擇最簡便的方法。
發布日期：2022-08-26
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