柱前衍生化的條件
首先,如果要是想在色譜中使用柱前衍生化,其衍生化反應應該滿足以下幾個條件:
1、反應能迅速、定量的進行,反應重複性好,反應條件不苛刻,容易操作;
2、反應的選擇性高,最好隻與目標化合物反應,即反應具有專一性;
3、衍生化反應產物隻有一種,反應的副產物和過量衍生化試劑不幹擾目標化合物的分離與檢測;
4、衍生化試劑方便易得,通用性好。
氣相色譜常見的衍生化反應
1、酯化衍生化方法
(1)甲醇法:youjisuanyujiachunzaicuihuajitiaojianxiajiare,fashengzhihuafanying,shengchengyoujisuanjiazhi。yibancaiyongsanfuhuapengzuocuihuaji,tongchangjiangsanfuhuapengtongrujiachunpeizhizhihuaji,yinweipeizhiguochengzhongyifangre,youyidingdeweixianxing,xianzaiyeyoushangpinhuadesanfuhuapengjiachunrongyekezhijiegoumaishiyong。
(2)重氮甲烷法:zhongdanjiawankeyiyuyoujisuanfanyingshengchengyoujisuanjiazhifangchudanqi。cifajianbianyouxiao,fanyingsudukuai,zhuanhualvgao,jiaoshaofufanying,buyinruzazhi,danshifanyingyaozaifeishuijiezhizhongjinxing。suiranfanyingtiaojianwenhe,danshizhongdanjiawanbuwending,youbaozhaxing、有毒,製備與使用時要特別小心。另外,酚羥基在常溫下可以與重氮甲烷反應,但在0℃下可以避免酚羥基反應。
(3)三氟乙酸酐法: 在三氟乙酸酐的存在下有機酸和酸可以反應生成酯,比較適合空間位阻較大的有機酸和醇或酚的酯化。
(4)其他酯化法:有時為了提高方法的靈敏度和選擇性,需要製備甲酯之外的酯,方法與甲酯化方法類似,可以用重氮乙烷、重氮丙烷、重氮甲苯代替重氮甲烷以製得相應的酯,且這些實際的穩定性好、爆炸性小。用三氟化硼的丙醇、丁醇或戊醇溶液與有機酸反應也可以製得相應的丙酯、丁酯或戊酯。
2、酰化衍生化方法
酰化能降低羥基、氨基、巰(qiu)基(ji)的(de)極(ji)性(xing),改(gai)善(shan)這(zhe)些(xie)化(hua)合(he)物(wu)的(de)色(se)譜(pu)性(xing)能(neng),並(bing)提(ti)高(gao)這(zhe)些(xie)化(hua)合(he)物(wu)的(de)揮(hui)發(fa)性(xing),增(zeng)加(jia)某(mou)些(xie)易(yi)氧(yang)化(hua)化(hua)合(he)物(wu)的(de)穩(wen)定(ding)性(xing)。當(dang)酰(xian)化(hua)時(shi)引(yin)入(ru)含(han)有(you)鹵(lu)離(li)子(zi)的(de)酰(xian)基(ji)時(shi),還(hai)可(ke)以(yi)提(ti)高(gao)使(shi)用(yong)ECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應活性的酰化物。
(1)乙酰化法:標準乙酰化法是將樣品溶於氯仿中,與乙酸酐和乙酸在50℃反應2-6h,真空出去剩餘試劑。還可以乙酸鈉為堿性催化劑,以乙酸酐為乙酰化試劑進行乙酰化反應,用於糖類分析。吡啶、三甲胺、甲基咪唑也可以作為堿性催化劑。乙酰化反應通常在非水介質中進行,但是胺類和酚類化合物乙酰化時可在水溶液中進行。
(2)多氟酰化法:常用的多氟化試劑是三氟乙酰(TFA)、五氟丙酰(PFP)和七氟丁酰(HFB),其活性是TFA>PFP>HFB。TFA和PFP的衍生物揮發性較強,而HFB的衍生物ECDlingmindujiaogao。duofuxianhuafanyingshijianchulequjueyuduofuxianhuashijidehuoxing,haiqujueyumubiaohuahewudehuoxing。duoshuqingkuangxiafuxianhuafanyingbuxurongji,danyouxieqingkuangxiayeshixuyaorongjide,ciwaiyoushihaixuyaojiajianxingcuihuaji。
3、鹵化衍生化法
在目標化合物中引入鹵原子後可使用ECD檢測器,提高檢測的靈敏度,同時可以改善揮發性和穩定性,常用的鹵化衍生化方法如下:
(1)鹵素法:用鹵素直接作為衍生化試劑處理樣品,鹵素的作用是加成或取代。
(2)鹵化氫法:常用HCl和HBr為衍生化試劑與不飽和鏈發生加成反應或與羥基發生置換反應。
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