一般地說,根據樣品的性質決定采用何種液相色譜方法,然後再選擇不同類型的柱。即不同類型的柱則代表了不同的色譜方法。
不同種類色譜柱的差異在於柱結構、柱填料和柱尺寸的不同。
色譜柱有不同的尺寸(長度和內徑),分製備型、常規分析型和微型。不同類型柱的硬件也不同,(包括接頭、柱管等方麵),還有徑向加壓柱和夾套加熱柱等。
不同液相色譜法的尺寸根據需要可以選取,普通分析3~30cm長,內徑4~8mm。常用20cm長、4.6mm內徑的柱。製備型柱內徑一般為8mm、25cm長。微型柱內徑l~3mm,長10~20cm。butongdetianliaofenxidexiaoguokenengbutong,zheshiyinweishengchanguochengbutongsuozhi。tongyichangshangshengchandetongzhongtianliaoyinpihaobutongyehuiyouchayi,zhezhongchayikenengcongjizhijiukaishi(表麵積、雜質、特殊處理),還有鍵合的化學物質(一氯或三氯矽烷反應劑),不同廠家生產的填料還會因專利技術(預處理、鍵合過程、填裝技術)等不同而呈現較大差異。由於種種差異、僅能假設同一批號的柱有基本相同的性質。
多數柱填料基質采用多孔矽膠微粒,通常有球形和無定形兩種,具有不同的粒度、孔徑和表麵積。多孔聚合物微粒也適用於反相色譜。聚合物柱的流動相範圍廣,流動相pH值可在1至13之間。而矽膠基質pH僅能在2.5和7之(zhi)間(jian)。顯(xian)然(ran),聚(ju)合(he)物(wu)柱(zhu)要(yao)好(hao)一(yi)些(xie),但(dan)目(mu)前(qian)仍(reng)是(shi)以(yi)矽(gui)膠(jiao)基(ji)質(zhi)的(de)柱(zhu)為(wei)主(zhu)。原(yuan)則(ze)上(shang),聚(ju)合(he)物(wu)柱(zhu)可(ke)以(yi)克(ke)服(fu)矽(gui)膠(jiao)基(ji)質(zhi)柱(zhu)的(de)某(mou)些(xie)不(bu)足(zu),但(dan)需(xu)要(yao)大(da)量(liang)的(de)實(shi)驗(yan)來(lai)證(zheng)實(shi),要(yao)進(jin)一(yi)步(bu)考(kao)查(zha)聚(ju)合(he)物(wu)基(ji)質(zhi)填(tian)料(liao)的(de)全(quan)麵(mian)優(you)越(yue)性(xing)。
在實際工作中,選擇性能良好的色譜柱可得到好的結果,首先要注意柱徑、長度、填料種類和填料粒度。
評價色譜柱的好壞不僅隻是N數,還應考慮組分在柱上的保留、鍵合相表麵的物性、柱壓降以及峰不對稱因子As等。每一根新色譜柱都應標出詳細參數,主要內容包括公司名稱、柱名稱(商標)、柱填料、尺寸。附一張標準參考色譜圖,並標出色譜條件、樣品名稱、流動相組成、流速、柱溫、進樣體積、檢測器、峰的保留時間及峰名稱等。評價一根色譜柱的主要指標是:①塔板數N值;②峰不對稱因子As;③柱壓降;④鍵合相濃度。
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