1.簡述：薄層色譜法
，是將適宜的固定相塗布於玻璃板上，成一均勻薄層。等點樣、展開後
，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用以進行藥品的鑒別
，雜質檢查或含量測定的方法。

 

2.儀器與材料：

 

2.1玻板：除另有規定外，用5cm×20cm
，10cm×20cm或20cm×20cm的規格
，要求光滑，平整、洗淨後的不附水珠，晾幹。

 

2.2固定相或載體：最常用的有矽膠G、矽膠GF、矽膠H
、矽膠HF254，其次有矽藻土、矽藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。其顆粒大小，一般要求直徑為10—40?m。薄層塗布
，一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種
；前者係將固定相直接塗布於玻璃板上，後者係在固定相中加入一定量的粘合劑，一般常用10—15%煆石膏(CaSO4·2H2O在140℃烘4小時)，混勻後加水適量使用
，或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.5—0.7%)適量調成糊狀
，均勻塗布於玻璃板上。也有含一定展開液或緩衝液的薄層。

 

2.3塗布器：應能使固定相或載體在玻璃板上塗成一層符合厚度要求的均勻薄層。

 

2.4點樣器：常用具支架的微量注射器或定時毛細管，應能使點樣位置正確集中。

 

2.5展開室：應使用適合薄層板大小的玻璃製薄層色譜展開缸，並有嚴密蓋子，除另有規定外
，底部應平整光滑，應便於觀察。

 

3.操作方法：

 

3.1薄層板製備：除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表麵的泡後，倒入塗布器中，在玻璃板上平穩地移動塗布器進行塗布(厚度為0.2—0.3mm)，取下塗好薄層的玻璃板，置水平台上於室溫下晾幹，後在110℃烘30分鍾。即置有幹燥劑的幹燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。

 

3.2點樣：除另有規定外，用點樣器點樣於薄層板上，一般為圓點
，點樣基線距底邊2.0cm，點樣直徑為2——4mm，點間距離約為1.5—2.0cm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表麵。

 

3.3展開：展開室如需預先用展開劑飽和
，可在室中加入足夠量的展開劑，並在壁上貼二條與室一樣高、寬(kuan)的(de)濾(lv)紙(zhi)條(tiao)
，一(yi)端(duan)浸(jin)入(ru)展(zhan)開(kai)劑(ji)中(zhong)

，密(mi)封(feng)室(shi)頂(ding)的(de)蓋(gai)，使(shi)係(xi)統(tong)平(ping)衡(heng)或(huo)按(an)正(zheng)文(wen)規(gui)定(ding)操(cao)作(zuo)。將(jiang)點(dian)好(hao)樣(yang)品(pin)的(de)薄(bo)層(ceng)板(ban)放(fang)入(ru)展(zhan)開(kai)室(shi)的(de)展(zhan)開(kai)劑(ji)中(zhong)，浸(jin)入(ru)展(zhan)開(kai)劑(ji)的(de)深(shen)度(du)為(wei)距(ju)薄(bo)層(ceng)板(ban)底(di)邊(bian)0.5—1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中)，密封室蓋，等展開至規定距離(一般為10—15cm)
，取(qu)出(chu)薄(bo)層(ceng)板(ban)，晾(liang)幹(gan)

，按(an)各(ge)品(pin)種(zhong)項(xiang)下(xia)的(de)規(gui)定(ding)檢(jian)測(ce)，如(ru)需(xu)用(yong)薄(bo)層(ceng)掃(sao)描(miao)儀(yi)對(dui)色(se)譜(pu)斑(ban)點(dian)作(zuo)掃(sao)描(miao)檢(jian)出(chu)，或(huo)直(zhi)接(jie)在(zai)薄(bo)層(ceng)上(shang)對(dui)色(se)譜(pu)斑(ban)點(dian)作(zuo)掃(sao)描(miao)定(ding)量(liang)，則(ze)可(ke)用(yong)薄(bo)層(ceng)掃(sao)描(miao)法(fa)。薄(bo)層(ceng)掃(sao)描(miao)的(de)方(fang)法(fa)，除(chu)另(ling)有(you)規(gui)定(ding)外(wai)，可(ke)根(gen)據(ju)各(ge)種(zhong)薄(bo)層(ceng)掃(sao)描(miao)儀(yi)的(de)結(jie)構(gou)特(te)點(dian)及(ji)使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)，結(jie)合(he)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)
，選(xuan)擇(ze)吸(xi)收(shou)法(fa)或(huo)熒(ying)光(guang)法(fa)，用(yong)雙(shuang)波(bo)長(chang)或(huo)單(dan)波(bo)長(chang)掃(sao)描(miao)。由(you)於(yu)影(ying)響(xiang)薄(bo)層(ceng)掃(sao)描(miao)結(jie)果(guo)的(de)因(yin)素(su)很(hen)多(duo)，故(gu)應(ying)在(zai)保(bao)證(zheng)供(gong)試(shi)品(pin)的(de)斑(ban)點(dian)在(zai)一(yi)定(ding)濃(nong)度(du)範(fan)圍(wei)內(nei)呈(cheng)線(xian)性(xing)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)，將(jiang)供(gong)試(shi)品(pin)與(yu)對(dui)照(zhao)品(pin)在(zai)同(tong)一(yi)塊(kuai)薄(bo)層(ceng)上(shang)展(zhan)開(kai)後(hou)掃(sao)描(miao)
，進(jin)行(xing)比(bi)較(jiao)並(bing)計(ji)算(suan)定(ding)量(liang)，以(yi)減(jian)少(shao)誤(wu)差(cha)。各(ge)種(zhong)供(gong)試(shi)品(pin)
，隻(zhi)有(you)得(de)到(dao)分(fen)離(li)度(du)和(he)重(zhong)現(xian)性(xing)好(hao)的(de)薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)，才(cai)能(neng)獲(huo)得(de)滿(man)意(yi)的(de)結(jie)果(guo)。

 

4.注意事項：

 

4.1所用玻璃板應洗淨不掛水珠
，光滑平整。

 

4.2鋪板要均勻，厚度適宜，並於室溫下晾幹後在110℃活化30分鍾，置於有幹燥劑的幹燥箱或幹燥器中備用。

 

4.3點樣點一般為圓點，不能太大。