操作要點：①取新鮮毛蚶肉，蒸煮後絞碎，與其澄清後的煮汁一並使用，用硫酸調節至pH 2.5
，煮沸0.5小時左右，濾去沉澱物。②向濾液中加1％的活性炭，攪拌2小時
，濾去清液，濾液再用活性炭吸附1次，合並兩次經過吸附的活性炭
，加入2倍量的酸水攪拌15分鍾，除去沾在活性炭上的雜質。濾去液體，用碳酸鈉調節至pH 9.5
，再加入1％的亞硝酸鈉，加熱攪拌2小時過濾。③洗脫液中加入1％亞硝酸鈉和20％正丁醇不斷攪拌，同時加熱至60～70℃保持2小時，如溶液有大量蛋白質析出，將析出蛋白質濾去
，再加入硫酸銨至飽和，攪拌並加熱至65～75℃保持1小時。④靜置，待液體分層後
，分出正丁醇溶液，再用鹽酸調節至pH 2.5
，然後用0.1摩／升鹽酸提取7～8次，將抽提液用碳酸鈉調節pH為4.5～5.0。⑤將上述溶液用碳酸鈉調節pH 8.5，在通風櫥中緩慢加入0.7％氰化物，攪拌均勻後，置於暗處約5小時，氰化即可完成。⑥向氰化液中加入食鹽
，使溶液呈飽和狀態，用酚-丁ding醇chun混hun合he液ye抽chou提ti數shu次ci。二er氰qing絡luo合he物wu即ji溶rong解jie於yu有you機ji溶rong劑ji層ceng。抽chou提ti液ye中zhong加jia入ru等deng量liang三san氯lv甲jia烷wan，充chong分fen攪jiao拌ban，並bing用yong蒸zheng餾liu水shui抽chou提ti。再zai在zai水shui抽chou提ti液ye中zhong加jia入ru四si氯lv化hua碳tan和he蒸zheng餾liu水shui抽chou提ti。最zui後hou水shui抽chou提ti液ye用yong乙yi醚mi洗xi滌di，即ji得de到dao較jiao純chun的de玫mei瑰gui紅hong溶rong液ye。⑦將兩倍體積的丙酮加入活化後的氧化鋁攪拌

，靜置。待氧化鋁沉降傾出上層丙酮，另加入1倍體積丙酮，倒入層析柱中。向濃維生素B12溶液中加入3倍體積的純丙酮混合均勻後

，灌人層析柱。待全部溶液通過後
，再以80％丙bing酮tong溶rong液ye洗xi滌di吸xi附fu柱zhu。在zai衝chong洗xi過guo程cheng中zhong，層ceng析xi柱zhu上shang即ji分fen離li出chu不bu同tong顏yan色se環huan，最zui上shang一yi環huan為wei黃huang褐he色se，第di二er環huan為wei橙cheng紅hong色se，最zui下xia一yi環huan為wei桃tao紅hong色se
，即ji為wei維wei生sheng素suB12。隨著時間的延長

，各環的分離也愈完全。在桃紅色環降至層析柱2／3處時，改用50％丙酮水溶液洗脫，收集桃紅色洗脫液，在水溶鍋中加熱濃縮至原體積的1／8。⑧在濃縮液中加入10倍量純丙酮混合均勻，把溶液置於5℃冷庫中放置2天
，維生素B12 即ji逐zhu漸jian結jie晶jing成cheng玫mei瑰gui紅hong色se的de針zhen狀zhuang或huo棱leng柱zhu狀zhuang的de晶jing體ti，待dai母mu液ye的de紅hong色se極ji淡dan時shi，倒dao出chu母mu液ye，用yong丙bing酮tong洗xi滌di結jie晶jing數shu次ci
，再zai用yong乙yi醚mi洗xi滌di
，在zai真zhen空kong幹gan燥zao箱xiang中zhong避bi光guang幹gan燥zao。