操作方法一：

1.以無菌操作取檢樣25g（或25ml)，放於225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內
，經充分振搖或研磨製成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液後
，最好置滅菌均質器中以8000~10000r/min的速度處理1min，製成1：10的均勻稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml
，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內
，振搖試管混合均勻
，製成1：100的稀釋液。另取1ml滅菌吸管
，按上項操作順序
，製10倍遞增稀釋液
，如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。

2.無菌操作：操作中必須有“無菌操作”的概念

，所用玻璃器皿必須是完全滅菌的，不得殘留有細菌或抑菌物質。所用剪刀、鑷子等器具也必須進行消毒處理。樣品如果有包裝，應用75%乙醇在包裝開口處擦拭後取樣。操作應當在超淨工作台或經過消毒處理的無菌室進行。瓊脂平板在工作台暴露15分鍾，每個平板不得超過15個菌落。

3.采樣的代表性：如係固體樣品，取樣時不應集中一點
，宜多采幾個部位。固體樣品必須經過均質或研磨，液體樣品須經過振搖，以獲得均勻稀釋液。

4.樣品稀釋誤差：為wei減jian少shao樣yang品pin稀xi釋shi誤wu差cha，在zai連lian續xu遞di次ci稀xi釋shi時shi
，每mei一yi稀xi釋shi液ye應ying充chong分fen振zhen搖yao
，使shi其qi均jun勻yun，同tong時shi每mei一yi稀xi釋shi度du應ying更geng換huan一yi支zhi吸xi管guan。在zai進jin行xing連lian續xu稀xi釋shi時shi，應ying將jiang吸xi管guan內nei液ye體ti沿yan管guan壁bi流liu入ru，勿wu使shi吸xi管guan尖jian端duan伸shen入ru稀xi釋shi液ye內nei，以yi免mian吸xi管guan外wai部bu粘zhan附fu的de檢jian液ye溶rong於yu其qi內nei。為wei減jian少shao稀xi釋shi誤wu差cha，SN標準采用取10mL稀釋液，注入90mL緩衝液中。

5.稀釋液：樣品稀釋液主要是滅菌生理鹽水，有的采用磷酸鹽緩衝液（或0.1%蛋白腖水），後者對食品中已受損傷的細菌細胞有一定的保護作用。如對含鹽量較高的食品（如醬油）進行稀釋，可以采用滅菌蒸餾水。 

 
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