采血 

 

（一）材料與試劑 

1．抗凝劑

（1）肝素：肝gan素su是shi含han硫liu酸suan基ji的de粘zhan多duo糖tang，常chang用yong其qi鈉na鹽yan或huo鉀jia鹽yan
，它ta能neng阻zu止zhi凝ning血xue酶mei原yuan轉zhuan化hua為wei凝ning血xue酶mei，進jin而er抑yi製zhi纖xian維wei蛋dan白bai原yuan形xing成cheng纖xian維wei蛋dan白bai
，從cong而er阻zu止zhi血xue液ye凝ning固gu。常chang用yong的de肝gan素su溶rong液ye濃nong度du為wei1 000U/ml
，市售肝素多為100U~126U／mg。

（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理鹽水配製成4％的溶液備用。

（3）阿氏液（Alsever液）
，配方如下：

枸櫞酸鈉（Na3 C6 H5 O7 ·5H2 O） 0.80g

枸櫞酸 0.0325g

葡萄糖 2.05g

氯化鈉 0.42g

H2 O 加至 100.00ml

混勻溶解後，114.3℃高壓蒸汽滅菌10min備用。

阿氏液中既含有枸櫞酸鈉抗凝劑
，又含有細胞生存的營養，所以它既可做抗凝劑，又可做血細胞的保存液。

2．針頭 根據不同動物和采血部位，采用不同型號的針頭，用前必須滅菌或消毒。

3．采血容器 注射器或三角瓶等。

4．采血動物。

 

（二）操作方法 

1．采血法 各種動物采血方法不一。馬、牛、羊等大動物一般從頸靜脈采血，豬從頸靜脈、qianqiangjingmaihuoerjingmaicaixue
，jiaqinyouyixiajingmaihuoxinzangcaixue，tuyouxinzanghuoerjingmaicaixue，quanyoujingjingmaihuosizhijingmaicaixue，tunshuyouxinzangcaixue，xiaobaishuzekeduanweihuojianduanyexiaxueguanhuojianduanyanqiucaixue。

2．抗凝 采集血液最關鍵的問題是抗凝
，采用什麼方法進行抗凝，則根據實驗的要求和條件而定。最常用的方法如下：

（1）肝素抗凝：采血時，使每ml血液含15U~20U肝素即可。計算采集的血液量，按1 000U/ml的(de)量(liang)加(jia)入(ru)肝(gan)素(su)，直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)采(cai)血(xue)容(rong)器(qi)中(zhong)，采(cai)血(xue)時(shi)，邊(bian)采(cai)血(xue)邊(bian)輕(qing)輕(qing)搖(yao)動(dong)，使(shi)抗(kang)凝(ning)劑(ji)和(he)血(xue)液(ye)混(hun)勻(yun)。對(dui)於(yu)采(cai)少(shao)量(liang)的(de)血(xue)液(ye)或(huo)小(xiao)動(dong)物(wu)采(cai)血(xue)，可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)注(zhu)射(she)器(qi)抽(chou)取(qu)一(yi)定(ding)量(liang)的(de)肝(gan)素(su)液(ye)，再(zai)采(cai)血(xue)直(zhi)接(jie)抗(kang)凝(ning)。

（2）EDTA抗凝：采血前，用滅菌生理鹽水將EDTA配製成4％溶液
，然後按預采血液的量，以每ml血液加入1mg~2mg的EDTA的液體量於采血容器內。采血，並不斷搖動采血容器
，使之混勻。

（3）玻璃珠法：預先將適量的玻璃珠（根據采血量多少而定）清(qing)洗(xi)後(hou)
，裝(zhuang)入(ru)采(cai)血(xue)容(rong)器(qi)中(zhong)
，滅(mie)菌(jun)後(hou)備(bei)用(yong)。采(cai)血(xue)過(guo)程(cheng)中(zhong)，邊(bian)采(cai)邊(bian)搖(yao)采(cai)血(xue)瓶(ping)，以(yi)使(shi)小(xiao)玻(bo)璃(li)珠(zhu)在(zai)血(xue)液(ye)中(zhong)滾(gun)動(dong)，以(yi)機(ji)械(xie)地(di)除(chu)去(qu)纖(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)
，使(shi)血(xue)液(ye)不(bu)能(neng)凝(ning)固(gu)。本(ben)法(fa)雖(sui)較(jiao)麻(ma)煩(fan)，但(dan)對(dui)淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)的(de)活(huo)性(xing)影(ying)響(xiang)最(zui)小(xiao)
，且(qie)可(ke)減(jian)少(shao)血(xue)小(xiao)板(ban)的(de)混(hun)雜(za)。

（4）阿氏液采血：以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液，邊采邊輕輕搖動采血瓶，使之混勻。用阿氏液采血，除了抗凝外，多用於紅細胞的保存。一般在4℃條件下，阿氏液中保存的紅細胞2周其活性和特性不變。

 

紅細胞的分離技術 

（一）材料與試劑 

1．肝素等抗凝劑

2．3％明膠液 取明膠3g，溶於0.9％滅菌鹽水100ml中，114.3℃滅菌10min，冷卻後4℃冰箱保存。臨用時，37℃預熱10min。

3．阿氏液

 

（二）操作方法 

1．采血抗凝
，即為紅細胞。由於紅細胞與白細胞的比例相差懸殊，一般白細胞混雜在其中
，忽略不計。

2．根(gen)據(ju)紅(hong)細(xi)胞(bao)的(de)用(yong)途(tu)，可(ke)做(zuo)進(jin)一(yi)步(bu)的(de)處(chu)理(li)。如(ru)計(ji)算(suan)紅(hong)細(xi)胞(bao)
，可(ke)直(zhi)接(jie)稀(xi)釋(shi)計(ji)數(shu)。如(ru)需(xu)做(zuo)補(bu)體(ti)結(jie)合(he)反(fan)應(ying)，或(huo)其(qi)它(ta)溶(rong)紅(hong)細(xi)胞(bao)反(fan)應(ying)，則(ze)需(xu)將(jiang)紅(hong)細(xi)胞(bao)進(jin)行(xing)充(chong)分(fen)的(de)清(qing)洗(xi)，以(yi)除(chu)去(qu)附(fu)著(zhe)在(zai)紅(hong)細(xi)胞(bao)膜(mo)表(biao)麵(mian)的(de)血(xue)漿(jiang)。一(yi)般(ban)用(yong)等(deng)滲(shen)的(de)稀(xi)釋(shi)液(ye)連(lian)續(xu)清(qing)洗(xi)

，2 000r/min離心10min，重複3~4次。

3．如需儲藏備用，則以阿氏液做抗凝劑采血，混勻後置4℃冰箱保存
，可保存2周，其活性尚可。