微載體培養技術(micro-carrier culture technique)於1967年被用於動物細胞大規模培養。經過三十餘年的發展,該技術日趨完善和成熟,廣泛應用於生產疫苗、jiyingongchengchanpindeng。weizaitipeiyangshimuqiangongrenzuijufazhanqiantudeyizhongdongwuxibaodaguimopeiyangjishu,qijianjuxuanfupeiyanghetiebipeiyangdeyoudian,qierongyifangda。gaijishuyiguangfanyongyupeiyanggeleixingxibao,ru293細胞、成肌細胞、Vero細胞、CHO細胞。
一、 微載體
微載體是指直徑60-250 μm,能適用於貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。常用商品化微載體有三種:Cytodex1、2、3,Cytopore和Cytoline。
二、微載體培養原理與操作
qiyuanlishijiangduixibaowuhaideweizaitikelijiarupeiyangrongqidepeiyangyezhong,zuoweizaiti,shixibaozaiweizaitibiaomianfuzheshengchang,tongshitongguochixujiaodongshiweizaitishizhongbaochixuanfuzhuangtai。
貼壁依賴性細胞在微載體表麵上的增殖,要經曆黏附貼壁、shengchanghekuozengsangejieduan。xibaozhiyoutiefuzaigutijizhibiaomiancainengzengzhi,yincixibaozaiweizaitibiaomiandetiefushijinyibupuzhanheshengchangdeguanjian。xibaozhuyaotongguojingdianyinlihefandehualiyuweizaitinianfu,zhequjueyuxibaoyuweizaitidejiechugailvhexiangrongxing。
youyudongwuxibaowuxibaobi,duijianqielimingan,yinciweizaitipeiyangzaicaozuozhongduijiaobanzhuansujijiaobanfangshideyaoqiudoushifenyange。weizaitipeiyangyaoqiujiaobandesudufeichangman,zuidasudu75 r/min。細胞微載體培養通常分為三個時期:貼(tie)壁(bi)期(qi),過(guo)渡(du)期(qi)和(he)培(pei)養(yang)期(qi)。貼(tie)壁(bi)期(qi)和(he)過(guo)渡(du)期(qi)可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)超(chao)低(di)速(su)細(xi)胞(bao)磁(ci)力(li)攪(jiao)拌(ban)係(xi)統(tong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang),該(gai)係(xi)統(tong)具(ju)有(you)超(chao)低(di)的(de)攪(jiao)拌(ban)速(su)度(du),剪(jian)切(qie)力(li)小(xiao)且(qie)能(neng)在(zai)低(di)速(su)下(xia)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)細(xi)胞(bao)。
三、微載體培養的優勢
產(chan)業(ye)化(hua)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)首(shou)先(xian)需(xu)要(yao)提(ti)供(gong)足(zu)夠(gou)大(da)的(de)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)麵(mian)積(ji),使(shi)培(pei)養(yang)容(rong)器(qi)單(dan)位(wei)容(rong)積(ji)所(suo)提(ti)供(gong)的(de)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)麵(mian)積(ji)有(you)所(suo)增(zeng)加(jia),從(cong)而(er)提(ti)高(gao)疫(yi)苗(miao)和(he)生(sheng)化(hua)製(zhi)劑(ji)的(de)產(chan)量(liang);其次需要加強和改善細胞培養的環境,有利於細胞生長;disan,xibaodejunyihuachengduyaogao,zaiyigedafajiaoguanneipeiyangxibao,shengchanghuanjingxuyizhi。yaomanzuyishangsandianyaoqiu,changguidepeiyangpingjingtaipeiyang,shenzhishizhuanpingdouhennanmanzu,erweizaitipeiyangjishuzenenghenhaodejiejuezhexiewenti。
總結
綜上所述,微載體的優勢可以歸納為以下幾點:表麵積/體積大,單位體積培養液的細胞產率高;把懸浮細胞和貼壁細胞培養融合在一起,兼有兩者的優點;可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表麵的生長情況;簡化細胞生長過程中對各種環境因素的檢測和控製,重現性好;培養基利用率較高;放大容易;細胞收獲過程不複雜;勞動強度小;培養係統占地麵積和空間小等。
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