高壓蒸汽滅菌器滅菌效果驗證一般有化學指示劑法、留點溫度計法
、自製測溫管法和生物指示劑法，每(mei)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)原(yuan)理(li)都(dou)是(shi)相(xiang)似(si)的(de)，主(zhu)要(yao)是(shi)通(tong)過(guo)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)時(shi)滅(mie)菌(jun)器(qi)裏(li)的(de)溫(wen)度(du)能(neng)否(fou)達(da)到(dao)要(yao)求(qiu)。我(wo)們(men)可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)選(xuan)擇(ze)其(qi)中(zhong)一(yi)種(zhong)或(huo)多(duo)種(zhong)方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)驗(yan)證(zheng)。

一
、化學指示劑法

原理：化學指示劑在一定溫度與作用時間下
，會受熱變色或變形
，根據這一特點來判斷是否達到需要的滅菌參數。

一般實驗室常用的是3M壓(ya)力(li)滅(mie)菌(jun)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)，這(zhe)種(zhong)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)是(shi)利(li)用(yong)滅(mie)菌(jun)前(qian)後(hou)膠(jiao)帶(dai)顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)來(lai)判(pan)斷(duan)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)。它(ta)是(shi)由(you)熱(re)敏(min)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)與(yu)顯(xian)色(se)劑(ji)及(ji)漆(qi)輔(fu)料(liao)製(zhi)成(cheng)油(you)墨(mo)，並(bing)將(jiang)油(you)墨(mo)以(yi)條(tiao)紋(wen)狀(zhuang)印(yin)製(zhi)在(zai)特(te)製(zhi)的(de)一(yi)麵(mian)膠(jiao)紙(zhi)帶(dai)製(zhi)成(cheng)。指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)粘(zhan)貼(tie)於(yu)包(bao)裹(guo)外(wai)，長(chang)度(du)不(bu)低(di)於(yu)5cm，並輕壓膠帶以增加粘性和封包效果；在121℃持續20min或130℃持續4min後，膠帶上印有的斜行的白色指示線條會完全變黑，成為黑色線條
；如變色不均勻或不徹底
，可認為該包裹不符合滅菌條件。

二、留點溫度計法

原理：留點溫度計法是利用水銀溫度計不回流的特性，其原理跟傳統體溫計相似
，可以指示滅菌器在滅菌過程中達到的最高溫度。

驗(yan)證(zheng)時(shi)把(ba)水(shui)銀(yin)溫(wen)度(du)計(ji)放(fang)在(zai)盛(sheng)水(shui)的(de)大(da)三(san)角(jiao)瓶(ping)裏(li)，滅(mie)菌(jun)時(shi)把(ba)三(san)角(jiao)瓶(ping)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)上(shang)部(bu)和(he)下(xia)部(bu)

，滅(mie)菌(jun)結(jie)束(shu)後(hou)看(kan)水(shui)銀(yin)溫(wen)度(du)計(ji)的(de)溫(wen)度(du)和(he)要(yao)求(qiu)溫(wen)度(du)是(shi)否(fou)一(yi)致(zhi)。此法隻能驗證溫度，不能指示滅菌時間是否達到要求，因此是滅菌器驗證的最低標準。

三、自製測溫管法

原理：利li用yong一yi些xie化hua學xue藥yao品pin受shou熱re熔rong化hua後hou再zai冷leng卻que，晶jing體ti的de外wai形xing不bu同tong的de特te性xing，把ba化hua學xue藥yao品pin密mi封feng在zai小xiao玻bo璃li管guan內nei，滅mie菌jun時shi放fang在zai滅mie菌jun器qi裏li，滅mie菌jun完wan後hou觀guan察cha晶jing體ti的de形xing狀zhuang，就jiu可ke以yi判pan斷duan溫wen度du是shi否fou達da標biao。

常用的試劑是苯甲酸，苯甲酸的熔點為121-123℃
，跟gen我wo們men要yao求qiu的de滅mie菌jun器qi的de滅mie菌jun溫wen度du基ji本ben吻wen合he，因yin此ci滅mie菌jun時shi把ba固gu體ti苯ben甲jia酸suan密mi封feng在zai小xiao玻bo璃li管guan內nei放fang進jin滅mie菌jun器qi
，滅mie菌jun結jie束shu就jiu可ke以yi觀guan察cha苯ben甲jia酸suan的de狀zhuang態tai來lai驗yan證zheng滅mie菌jun器qi是shi否fou達da到dao了le要yao求qiu溫wen度du。這zhe種zhong方fang法fa的de局ju限xian跟gen留liu點dian溫wen度du計ji法fa相xiang同tong，也ye隻能指示滅菌時的溫度，對滅菌時間是否達到要求無法判斷。

四、生物指示劑法

原理：利li用yong非fei致zhi病bing性xing的de嗜shi熱re脂zhi肪fang杆gan菌jun的de芽ya孢bao作zuo為wei指zhi示shi菌jun
，來lai測ce定ding熱re力li滅mie菌jun的de效xiao果guo。嗜shi熱re脂zhi肪fang杆gan菌jun的de芽ya孢bao對dui熱re的de抗kang性xing較jiao強qiang，其qi耐nai熱re能neng力li與yu病bing原yuan微wei生sheng物wu肉rou毒du梭suo菌jun芽ya孢bao相xiang似si，以yi此ci為wei指zhi示shi菌jun，驗yan證zheng滅mie菌jun器qi能neng否fou達da到dao滅mie菌jun要yao求qiu。

生物指示劑分為三種：芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點：下層的前、中
、後和上層

、中層的中央點。滅菌後取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白腖水中
，55-60℃培養2-7天，若培養基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好
；如果培養基黃色渾濁，說明芽孢未被殺滅
，滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。

muqianshiyanshihaichangyongshangpinhuadeshengwuzhishiguan，qiyuanliyuyabaoxuanyeheyabaojunpianxiangtong，zhishiguanzhongyoushirezhifangyabaoganjunyabaohepeiyangyebolixiaoguan，jiangzhishiguanfangzaimiejunrongqineidegegedianshang，gaoyamiejunhou，jiangguanzhongshengpeiyangyedeboliguanjisui
，peiyangyecongneibudexiaoguanzhongbeifangchu，fangru56℃培養箱中培養，同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格
，指示管內的芽孢複活後生長會改變肉湯的顏色是肉湯變為黃色；若是滅菌器滅菌效果良好則管內芽孢被滅活不再生長，肉湯仍舊是原來的紫色。

對dui於yu滅mie菌jun器qi的de效xiao果guo驗yan證zheng
，目mu前qian並bing沒mei有you相xiang關guan標biao準zhun嚴yan格ge的de要yao求qiu驗yan證zheng的de頻pin次ci，但dan是shi實shi驗yan室shi應ying當dang自zi行xing製zhi定ding驗yan證zheng頻pin次ci規gui定ding
，並bing嚴yan格ge按an照zhao要yao求qiu進jin行xing。從cong操cao作zuo性xing和he驗yan證zheng結jie論lun兩liang個ge方fang麵mian出chu發fa，小xiao編bian推tui薦jian使shi用yong指zhi示shi膠jiao帶dai和he生sheng物wu指zhi示shi管guan
，因yin為wei這zhe兩liang種zhong方fang法fa操cao作zuo簡jian單dan，可ke以yi對dui滅mie菌jun效xiao果guo進jin行xing全quan麵mian的de驗yan證zheng。

附：滅菌時的注意事項（一些進口的全自動滅菌鍋可不用考慮排氣）

使用高壓蒸氣滅菌器時，首先應注意在開放蒸氣的同時，排除滅菌器內的冷空氣。必須將器內冷空氣全部排除後，才(cai)可(ke)關(guan)閉(bi)排(pai)氣(qi)孔(kong)。假(jia)如(ru)滅(mie)菌(jun)器(qi)內(nei)仍(reng)存(cun)留(liu)有(you)部(bu)分(fen)空(kong)氣(qi)時(shi)

，則(ze)壓(ya)力(li)表(biao)上(shang)雖(sui)已(yi)達(da)到(dao)了(le)某(mou)一(yi)壓(ya)力(li)值(zhi)
，但(dan)器(qi)內(nei)之(zhi)溫(wen)度(du)仍(reng)未(wei)達(da)到(dao)相(xiang)應(ying)之(zhi)度(du)數(shu)。存(cun)留(liu)的(de)空(kong)氣(qi)越(yue)多(duo)，則(ze)二(er)者(zhe)相(xiang)差(cha)也(ye)越(yue)大(da)
，器(qi)內(nei)溫(wen)度(du)不(bu)足(zu)，滅(mie)菌(jun)則(ze)不(bu)徹(che)底(di)。（很多人在做發酵法培養基滅菌時會出現小導管中有氣泡
，不妨也可以嚐試多排出滅菌器內的冷空氣，有奇效哦）。