把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法,稱為歸一化法。
各成分校正因子一致時可用該法,該法簡便、準確,特別是進樣量不容易準確控製時,進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。
其他操作條件,如流速、柱溫等變化對定量結果的影響也很小。GC應用廣於HPLC。
外標法(標準曲線法、直接比較法)
首先用欲測組分的標準樣品繪製標準工作曲線。具體作法是:yongbiaozhunyangpinpeizhichengbutongnongdudebiaozhunxilie,zaiyuyucezufenxiangtongdeseputiaojianxia,dengtijizhunqueliangjinyang,celianggefengdefengmianjihuofenggao,yongfengmianjihuofenggaoduiyangpinnongduhuizhibiaozhungongzuoquxian,cibiaozhungongzuoquxianyingshitongguoyuandiandezhixian。ruobiaozhungongzuoquxianbutongguoyuandian,shuomingcedingfangfacunzaixitongwucha。標準工作曲線的斜率即為絕對校正因子。
dangyucezufenhanliangbianhuabuda,bingyizhizheyizufendedagaihanliangshi,yekeyibubihuizhibiaozhungongzuoquxian,eryongdandianxiaozhengfa,jizhijiebijiaofadingliang。dandianxiaozhengfashijishangshiliyongyuandianzuoweibiaozhungongzuoquxianshangdelingyigedian。yinci,dangfangfacunzaixitongwuchashi(即標準工作曲線不通過原點),單點校正法的誤差較大。因此規定,y=ax+b 。b的絕對值應不大於100%響應值是y的2%。
標準曲線法的優點:繪hui製zhi好hao標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian後hou測ce定ding工gong作zuo就jiu很hen簡jian單dan了le,計ji算suan時shi可ke直zhi接jie從cong標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian上shang讀du出chu含han量liang,這zhe對dui大da量liang樣yang品pin分fen析xi十shi分fen合he適shi。特te別bie是shi標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian繪hui製zhi後hou可ke以yi使shi用yong一yi段duan時shi間jian,在此段時間內可經常用一個標準樣品對標準工作曲線進行單點校正,以確定該標準工作曲線是否還可使用。
標準曲線法的缺點:每次樣品分析的色譜條件(檢測器的響應性能,柱溫度,流動相流速及組成,進樣量,柱效等)很難完全相同,因此容易出現較大誤差。另外,標準工作曲線繪製時,一般使用欲測組分的標準樣品(或已知準確含量的樣品),因此對樣品前處理過程中欲測組分的變化無法進行補償。
內標法
選擇適宜的物質作為欲測組分的參比物,定量加到樣品中去,依據欲測組分和參比物在檢測器上的響應值(峰麵積或峰高)之比和參比物加入的量進行定量分析的方法稱為內標法。
neibiaofadeguanjianshixuanzeheshideneibiaowu。neibiaowuyingshiyuanyangpinzhongbucunzaidechunwuzhi,gaiwuzhidexingzhiyingjinkenengyuyucezufenxiangjin,buyubeiceyangpinqihuaxuefanying,tongshiyaonengwanquanrongyubeiceyangpinzhong。neibiaowudefengyingjinkenengjiejinyucezufendefeng,huoweiyujigeyucezufendefengzhongjian,danbixuyuyangpinzhongdesuoyoufengbuzhongdie,jiwanquanfenkai。yibanhuixuanzebiaozhunwuzhidetongweisuwuzhizuoweineibiaowu。
內標法的優點:進樣量的變化,色譜條件的微小變化對內標法定量結果的影響不大,特別是在樣品前處理(如濃縮、萃取,衍生化等)前加入內標物,然後再進行前處理時,可部分補償欲測組分在樣品前處理時的損失。若要獲得很高精度的結果時,可以加入數種內標物,以提高定量分析的精度。
內標法的缺點:選擇合適的內標物比較困難,內標物的稱量要準確,操作較麻煩。使用內標法定量時要測量欲測組分和內標物的兩個峰的峰麵積(或峰高),根據誤差疊加原理,內標法定量的誤差中,由於峰麵積測量引起的誤差是標準曲線法定量的2-2,danshiyouyujinyangliangdebianhuaheseputiaojianbianhuayinqidewucha,neibiaofabibiaozhunquxianfayaoxiaohenduo,suoyizongdelaishuo,neibiaofadingliangbibiaozhunquxianfadingliangdezhunqueduhejingmidudouyaohao。
標準加入法
biaozhunjiarufashizhishangshiyizhongteshudeneibiaofa,shizaixuanzebudaoheshideneibiaowushi,yiyucezufendechunwuzhiweineibiaowu,jiarudaodaiceyangpinzhong,ranhouzaixiangtongdeseputiaojianxia,cedingjiaruyucezufenchunwuzhiqianhouyucezufendefengmianji(或峰高),從而計算欲測組分在樣品中的含量的方法。
標準加入法的優點:不bu需xu要yao另ling外wai的de標biao準zhun物wu質zhi作zuo內nei標biao物wu,隻zhi需xu欲yu測ce組zu分fen的de純chun物wu質zhi,進jin樣yang量liang不bu必bi十shi分fen準zhun確que,操cao作zuo簡jian單dan。若ruo在zai樣yang品pin的de前qian處chu理li之zhi前qian就jiu加jia入ru已yi知zhi準zhun確que量liang的de欲yu測ce組zu分fen,則ze可ke以yi完wan全quan補bu償chang欲yu測ce組zu分fen在zai前qian處chu理li過guo程cheng中zhong的de損sun失shi,是shi色se譜pu分fen析xi中zhong較jiao常chang用yong的de定ding量liang分fen析xi方fang法fa。
標準加入法的缺點:要求加入欲測組分前後兩次色譜測定的色譜條件完全相同,以保證兩次測定時的校正因子完全相等,否則將引起分析測定的誤差。
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