一

、標準品的要求
1、化學結構：原yuan則ze上shang標biao準zhun品pin應ying與yu被bei測ce物wu具ju有you完wan全quan相xiang同tong的de化hua學xue結jie構gou，包bao括kuo相xiang同tong的de立li體ti化hua學xue結jie構gou。但dan在zai實shi際ji工gong作zuo中zhong
，用yong化hua學xue結jie構gou完wan全quan相xiang同tong的de物wu質zhi作zuo標biao準zhun品pin是shi十shi分fen困kun難nan的de。這zhe是shi由you於yu一yi方fang麵mian來lai源yuan有you限xian，另ling一yi方fang麵mian有you些xie被bei測ce物wu本ben身shen的de化hua學xue結jie構gou還hai不bu清qing楚chu，或huo是shi有you明ming顯xian的de異yi型xing性xing。所suo以yi有you時shi也ye用yong結jie構gou類lei似si的de物wu質zhi作zuo標biao準zhun品pin。此ci時shi，應ying充chong分fen了le解jie這zhe些xie物wu質zhi與yu真zhen正zheng標biao準zhun品pin之zhi間jian的de定ding量liang關guan係xi。
2、化學純度：suoyoutongguohuaxuehechengfazhibeidexiaofenzihuahewu，douyingshigaohuaxuechundudechunpin。duimouxiedanbaileiwuzhi
，zekenengyouyuchunhuadefangfabutongeryouchayi。duici
，zaizuichujianligaifangfashi
，yingyuguojishanggongrendebiaozhuncankaopinhuogaochundudechunpinjinxingbidui。
3、免疫純度：biaojimianyifenxishitongguobijiaobeicewuzhiyubiaozhunpindemianyihuoxingshixiande

，gubeicewuzhiyubiaozhunpinduisuoyongkangtidemianyihuoxingyinggaiwanquanyizhi，jiliangzheduisuoyongdetongyikangtiyouwanquanxiangtongdeqinheli。yinci，biaozhunpindemianyichundubiqihuaxuechundugengzhongyao。
4
、反應介質：mianyixuefanyingshoufanyingjiezhihewendudengtiaojiandeyingxiang，suoyililunshangyaoqiubiaozhunpinhebeicewuyingzaiwanquanxiangtongdejiezhizhongjinxingfanying。rucedingxueqingzhongmouwuzhidenongdu，qisuoyongdebiaozhunpinyeyingrongjiezaiwubeicewudelingzhixueqingzhong
；如ru測ce定ding尿niao液ye中zhong某mou物wu質zhi的de濃nong度du
，其qi所suo用yong的de標biao準zhun品pin也ye應ying溶rong解jie在zai無wu被bei測ce物wu的de尿niao液ye中zhong等deng。但dan在zai實shi際ji工gong作zuo中zhong這zhe一yi點dian很hen難nan做zuo到dao。因yin為wei
，血xue清qing中zhong的de成cheng分fen十shi分fen複fu雜za，因yin而er無wu被bei測ce物wu的de零ling值zhi血xue清qing的de製zhi備bei非fei常chang困kun難nan，而er且qie個ge體ti血xue清qing中zhong還hai可ke能neng存cun在zai一yi些xie幹gan擾rao物wu質zhi。理li想xiang的de標biao準zhun品pin應ying該gai用yong與yu被bei測ce樣yang品pin相xiang同tong的de基ji質zhi(如血清)，先將被測物質完全去除，然後再加入已知量的被測物質的純品。
5、幹擾物質：標準品中不能有幹擾分析的物質。在作為標準品使用前，必須對那些從機體提取到的大分子物質活性進行測定。
6、標準品的批量：weibaozhengjiancedelianxukebixing，meipibiaozhunpinyingyouxiangdangdadeliang
，yibaozhengzaijiaochangdeshijianneishiyong。meipibiaozhunpinrubaocundetiaojianshidang，zaixiangdangchangdeshijianneikebaochiqinongduhemianyihuoxingdewending。zheduiyushengchanbiaojimianyifenxishijidechangjiayouweizhongyao。
二
、標準品的分級
所謂標準品在英語中有三個名詞
，即標準品(standard)、校準品(calibrator)、和參考品(reference)。這三個名詞的意義不完全相同，但在國內它們則經常被混淆。目前在我國的標記免疫分析實踐中
，所謂的"標準品"實際上是指校準品。為使用方便先仍用"標準品一詞"。
有關標準品可分為如下的等級：
【國際參考品(international reference)】：國際參考品是由WHO指定的實驗室製備

，並與有關國家的一定機構聯係(在我國是衛生部藥品與生物製品檢定所)，beiguojigongrenweizuigaojibiedebiaozhunpin。daomuqianweizhi
，yubiaojimianyifenxiyouguandeyidashushizhong。danyouyubiaojimianyifenxifangfadexunsufazhan，henduobiaojimianyifenxifangfahaimeiyouguojicankaopin。
【國家級標準品】：國家級標準品是由國家的有關權威機構，用高化學純和高免疫純
、低di交jiao叉cha反fan應ying的de純chun品pin製zhi備bei的de
，供gong國guo家jia內nei部bu使shi用yong。國guo家jia級ji標biao準zhun品pin應ying與yu國guo際ji參can考kao品pin或huo其qi他ta國guo家jia的de國guo家jia級ji標biao準zhun品pin進jin行xing比bi對dui。我wo國guo現xian已yi有you國guo家jia級ji標biao準zhun品pin數shu種zhong，如ru胰yi島dao素su(insulin)、絨毛膜促性腺素(hCG)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)
、甲狀腺素(T4)
、肝膽酸(CG)、甲胎蛋白(AFP)等。
【實驗室標準】：shiyanshibiaozhunshiyoushiyanshiziji
，huoyoushengchanchangjiazhibeidebiaozhunpin，youchengerjibiaozhunpin。suoyoudeerjibiaozhunpindoubixujingguoyuguojiabiaozhunpinhuoguojicankaopinjinxingbiduihuoxiaozheng。rumeiyouguojicankaopinhuoguojiajibiaozhunpinde
，yeyingyuguojigongrendeshengchanchangjiadebiaozhunpinjinxingbidui。
三、標準品的製備

、鑒定

、與計量
1
、標準品的製備：標準品的製備是非常複雜的問題，也是標記免疫分析中比較難於製備的一個成分。以下討論的是實驗室標準品(或商品化試劑中標準品)的製備。
（1）基質的製備：如前所述，作為標準品的介質(基質)成(cheng)分(fen)應(ying)與(yu)被(bei)測(ce)樣(yang)品(pin)相(xiang)同(tong)。對(dui)大(da)多(duo)數(shu)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)血(xue)清(qing)中(zhong)某(mou)物(wu)質(zhi)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)，應(ying)用(yong)不(bu)含(han)被(bei)測(ce)物(wu)質(zhi)的(de)零(ling)血(xue)清(qing)製(zhi)備(bei)，以(yi)求(qiu)反(fan)應(ying)的(de)介(jie)質(zhi)環(huan)境(jing)相(xiang)當(dang)。但(dan)有(you)時(shi)零(ling)值(zhi)血(xue)清(qing)的(de)製(zhi)備(bei)十(shi)分(fen)困(kun)難(nan)，所(suo)以(yi)有(you)些(xie)標(biao)準(zhun)品(pin)用(yong)適(shi)當(dang)的(de)緩(huan)衝(chong)液(ye)製(zhi)備(bei)
，並(bing)在(zai)緩(huan)衝(chong)液(ye)中(zhong)加(jia)入(ru)一(yi)定(ding)量(liang)的(de)載(zai)體(ti)蛋(dan)白(bai)(一般用1%～2%的牛血清白蛋白)，以便使其與樣品的介質環境相近。
零值血清的製備方法有：
A
、吸附法：血清中小分子物質如三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)等
，可用活性炭吸附去除。這種方法簡便，但待測物質難以清除幹淨
，而且大分子活性物質不能用此法進行製備。
B、反複凍融法：duidafenzihuoxingwuzhikexuanyongdizhixueqing
，jingfanfudongrongshibeicewuzhishihuo。yongzhezhongfangfakeshimouxiedanbaileijisudabufenshihuo
，danyenanyidedaozhenzhengdelingzhixueqing。
C
、親和層析法：用特異性抗體製備親和層析柱
，用以吸附被測抗原。用這種方法可以得到高質量的零值血清，但本法比較複雜而且成本也高。
（2）標準物純品的選擇：應選擇高化學純和高免疫純的純品作標準品。其中免疫純尤為重要，在標準品中不應含有與被測物質有交叉反應的物質。
（3）標準品的製備：xianyonglingzhixueqingpeizhigaonongdudebiaozhunpin，ranhougenjushiyanxitongdeyaoqiu，yonglingzhixueqingjianggaozhixueqingxishizhiyingyoudenongdu
，zhichengfuheyudingyaoqiude，youbutongnongduzuchengdexiliebiaozhunpin。
2、標準品的鑒定
（1）免疫活性的鑒定：選用高特異性的抗血清分別作公認標準品(如WHO的國際參考品或國家標準品)的(de)待(dai)鑒(jian)定(ding)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)，並(bing)觀(guan)察(cha)兩(liang)條(tiao)曲(qu)線(xian)的(de)平(ping)行(xing)性(xing)。如(ru)兩(liang)條(tiao)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)平(ping)行(xing)，說(shuo)明(ming)兩(liang)種(zhong)物(wu)質(zhi)對(dui)同(tong)一(yi)抗(kang)體(ti)有(you)相(xiang)同(tong)的(de)親(qin)和(he)力(li)
，即(ji)二(er)者(zhe)是(shi)同(tong)質(zhi)性(xing)物(wu)質(zhi)。如(ru)兩(liang)條(tiao)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)不(bu)平(ping)行(xing)，說(shuo)明(ming)兩(liang)種(zhong)物(wu)質(zhi)具(ju)有(you)異(yi)質(zhi)性(xing)
，因(yin)而(er)這(zhe)一(yi)待(dai)鑒(jian)定(ding)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)是(shi)不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)的(de)。
（2）濃度的標定：用(yong)已(yi)鑒(jian)定(ding)過(guo)的(de)，免(mian)疫(yi)活(huo)性(xing)合(he)格(ge)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)，與(yu)公(gong)認(ren)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)作(zuo)濃(nong)度(du)相(xiang)同(tong)的(de)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)。此(ci)時(shi)
，兩(liang)條(tiao)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)應(ying)該(gai)是(shi)基(ji)本(ben)重(zhong)合(he)的(de)。如(ru)果(guo)兩(liang)者(zhe)平(ping)行(xing)但(dan)不(bu)重(zhong)合(he)，則(ze)取(qu)兩(liang)條(tiao)劑(ji)量(liang)反(fan)應(ying)曲(qu)線(xian)的(de)50%結合處的相應劑量( ED50 )計算二者的換算係數
，然後調整待鑒定標準品的濃度，直至使兩條劑量反應曲線完全或基本重合為止。
3、標準品的計量：許xu多duo小xiao分fen子zi抗kang原yuan或huo半ban抗kang原yuan已yi能neng得de到dao純chun品pin或huo進jin行xing合he成cheng，它ta們men對dui作zuo為wei標biao準zhun品pin的de要yao求qiu可ke以yi得de到dao基ji本ben的de滿man足zu，其qi計ji量liang多duo直zhi接jie用yong單dan位wei體ti積ji中zhong的de重zhong量liang表biao示shi，如rumg / ml、ng / ml 
、pg / ml等。最近WHO推薦用質量單位取代重量單位
，即mol / L、mmol / L、或nmol / L等deng。對dui大da分fen子zi的de活huo性xing物wu質zhi則ze比bi較jiao複fu雜za。由you於yu得de不bu到dao絕jue對dui的de純chun品pin，故gu很hen難nan直zhi接jie用yong單dan位wei體ti積ji中zhong的de重zhong量liang或huo單dan位wei體ti積ji中zhong的de質zhi量liang計ji量liang。因yin此ci，常chang用yong該gai物wu質zhi的de生sheng物wu活huo性xing單dan位wei表biao示shi，如ruIU / L、mIU / L等。
四、標準品的穩定性與保存
如(ru)前(qian)所(suo)述(shu)，為(wei)保(bao)證(zheng)檢(jian)測(ce)的(de)連(lian)續(xu)可(ke)比(bi)性(xing)
，每(mei)批(pi)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)有(you)相(xiang)當(dang)大(da)的(de)量(liang)，以(yi)保(bao)證(zheng)能(neng)在(zai)較(jiao)長(chang)時(shi)間(jian)內(nei)使(shi)用(yong)。因(yin)此(ci)，每(mei)批(pi)標(biao)準(zhun)品(pin)應(ying)在(zai)適(shi)當(dang)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)保(bao)存(cun)，使(shi)其(qi)免(mian)疫(yi)活(huo)性(xing)和(he)濃(nong)度(du)保(bao)持(chi)穩(wen)定(ding)。
1、影響標準品穩定的因素
（1）基質中的酶、細菌汙染、pH的變化、氧化
、潮濕等因素都可以導致標準品的變性，而且這些變化可因高溫和光照加速。
（2）在保存過程中發生聚合反應等分子結構的變化，可使標準品失活。
（3）容器內壁的吸附作用和溶劑的蒸發可造成標準品濃度的改變。
（4）保存條件不適當也可以影響標準品的穩定性，如反複的凍融可降低標準品的免疫活性等。
2、標準品的保存方法
（1）冷凍幹燥法：冷leng凍dong幹gan燥zao對dui標biao準zhun品pin的de濃nong度du和he免mian疫yi活huo性xing無wu明ming顯xian的de影ying響xiang

，是shi目mu前qian最zui常chang用yong的de保bao存cun方fang法fa。冷leng凍dong幹gan燥zao製zhi品pin在zai低di溫wen下xia，可ke在zai較jiao長chang的de時shi間jian內nei保bao持chi穩wen定ding。但dan應ying用yong冷leng凍dong幹gan燥zao製zhi品pin時shi
，複fu溶rong體ti積ji的de準zhun確que度du十shi分fen重zhong要yao。因yin此ci，要yao用yong經jing過guo校xiao準zhun的de量liang器qi準zhun確que的de複fu溶rong，以yi減jian少shao標biao準zhun品pin的de濃nong度du誤wu差cha。
（2）在標準品中加一定量的防腐劑可減少細菌汙染的影響。
（3）密閉真空保存或充入惰性氣體等方法也可以增加標準品的穩定性。 目前最常用的方法是：在標準品中加入少量的防腐劑(如0.1%疊氮鈉或0.1%硫柳汞)，冷(leng)凍(dong)幹(gan)燥(zao)後(hou)密(mi)封(feng)，並(bing)在(zai)低(di)溫(wen)下(xia)保(bao)存(cun)。但(dan)應(ying)注(zhu)意(yi)，一(yi)旦(dan)複(fu)溶(rong)後(hou)應(ying)放(fang)低(di)溫(wen)保(bao)存(cun)，並(bing)不(bu)得(de)反(fan)複(fu)凍(dong)溶(rong)。複(fu)溶(rong)後(hou)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)其(qi)有(you)效(xiao)期(qi)明(ming)顯(xian)縮(suo)短(duan)，一(yi)般(ban)不(bu)超(chao)過(guo)6～8周，有些物質可能更短。