液相色譜儀色譜柱使用及維護 每天用足夠的時間來平衡色譜柱,您就會在處理問題方麵獲得最大的"補償",而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!------ 一定得做! 新xin的de色se譜pu柱zhu在zai使shi用yong之zhi前qian應ying該gai在zai您nin自zi己ji的de液ye相xiang色se譜pu儀yi上shang進jin行xing性xing能neng測ce試shi,即ji使shi用yong色se譜pu柱zhu附fu帶dai的de檢jian驗yan報bao告gao上shang測ce試shi條tiao件jian和he樣yang品pin來lai測ce定ding該gai色se譜pu柱zhu的de柱zhu效xiao。並bing且qie,在zai以yi後hou的de使shi用yong中zhong,應ying時shi常chang對dui色se譜pu柱zhu進jin行xing測ce試shi。 卡套柱的安裝(不加預柱) 1.將卡套架套入柱芯 2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高於夾套(見左圖) 3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片 4.將卡套帽和卡套架旋在一起,然後用手擰緊 5.然後依同樣的順序連接好柱子的另一端 6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手擰即可;若為不鏽鋼接頭應使用專用扳手 注意:shiyongkataozhushi,liangduandekataoyingshikelianjiezaizhuxinshang。buguanninshipinghengsepuzhuhuoshiqingxi,renheshihoudoubunengjiangkataoquxialai,fouzehuizaochengtianliaodeliushi。 卡套柱的安裝(加預柱) 1.將卡套架套入柱芯 2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高於柱芯(見左圖) 3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片 4.將"子彈頭"預柱放入卡套片內 5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然後用手擰緊 6.然後依同樣的順序連接好柱子的另一端 7.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手擰即可;若為不鏽鋼接頭應使用專用扳手 更換色譜柱濾網和玻璃棉過濾片(同時可以修補色譜柱) 注意:在取出反相柱芯的濾網和玻璃片之前,應該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈衝洗,而且修補工具的頭部也應該蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出濾網和玻璃棉濾片時帶出柱子內的填料。 1.將修補工具中的2套入柱芯的頂端 2.將修補工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中,並順時針方向旋轉到旋緊 3.一手握柱芯,另一隻手輕輕地向外拉3,取出柱芯頂端的濾網 4.用一個小鏟子輕輕地取出濾網下麵的玻璃棉以及被汙染的填料 5.將新的填料用甲醇潤濕,然後填入挖去的部位,壓平 6.照(左圖)裝上新的玻璃棉濾網,並用修補工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端 7.柱芯頂端套上2,然後參照(左圖)將濾網放入 8.壓緊,然後取下2,再用4將濾網的邊緣壓平 平衡色譜柱 反相色譜柱在經過出廠測試後是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由於色譜柱在儲存或運輸過程中可能會幹掉,因此在用流動相分析樣品之前,應使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動相中含有緩衝鹽,應注意用純水"過渡"。 矽gui膠jiao柱zhu或huo極ji性xing色se譜pu柱zhu在zai經jing過guo出chu廠chang測ce試shi後hou是shi保bao存cun在zai正zheng庚geng烷wan中zhong的de。如ru果guo該gai色se譜pu柱zhu需xu要yao使shi用yong含han水shui的de流liu動dong相xiang,請qing在zai使shi用yong流liu動dong相xiang之zhi前qian用yong乙yi醇chun或huo異yi丙bing醇chun平ping衡heng 如何平衡色譜柱? 平衡過程中,將流速緩慢地提高 用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(緩衝鹽或離子對試劑度如果較低,則需要較長的時間來平衡) 色譜柱的再生 進行色譜柱再生時,應使用一個謙價的泵,我們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。 表1 建議用來衝洗的溶劑體積 色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積 125-4 1.6ml 30ml 250-4 3.2ml 60ml 250-10 -20ml 400ml 請根據下表選擇您的再生方法: 極性固定相(如Si,NH2,DIOL基色譜填料)的再生: 正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水 非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水 0.05M稀硫酸可以用來清洗已汙染的色譜柱 注意: 在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由於NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應該在水洗後用0.1M的氨水衝洗,然後再用水衝洗至堿溶液完全流出。 如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去矽膠表麵吸附的雜質,用0.05M稀硫酸衝洗非常有效。 色譜柱的維護 1.使用預柱保護分析柱(矽膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度) 2.大多數反相色譜柱的pH穩定範圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH範圍 3.避免流動相組成及極性的劇烈變化 4.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理 5.如果使用極性或離子性的緩衝溶液作流動相,應在實驗完畢柱子衝洗幹淨,並保存大乙腈中 6.壓力升高是需要更換預柱的信號
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